苦马豆素(SW)最早是从植物灰苦马豆中分离获得的，许多学者做了大量研究，得到不同浓度SW对...

苦马豆素(SW)最早是从植物灰苦马豆中分离获得的，许多学者做了大量研究，得到不同浓度SW对细胞存活率的影响曲线如图所示，为了验证SW具有抑制肿瘤细胞生长的作用，某生物兴趣小组重复了学者们所做的实验，其过程如下，请完善相关内容。

(1)实验目的：____________________________________________________________。

(2)实验操作：

实验组：取小鼠肝癌Hepal­6细胞，培养24 h后加入等量不同浓度的SW溶液分别培养，并分别在24 h、48 h、72 h时吸取培养液，观察结果。

对照组：________________________________________________________________。

(3)该兴趣小组所得的实验结果与图中相似，该实验的结论为____________________

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

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苦马豆素（SW）最早是从植物灰苦马豆中分离获得，为了研究SW是否具有抑制肿瘤细胞生长的作用，许多学者做了大量研究，请根据以下实验研究过程及研究结果回答问题。

①取小鼠肝癌Hepal-6细胞

②制成单细胞悬液，接种于多孔板，加入等量培养液，每组设5个平行孔

③于37℃、5%CO₂培养箱中分别培养24h

④加入等量不同浓度SW溶液，于37℃、5%CO₂培养箱中分别培养

⑤分别在24h、48h、72h时吸取培养液，观察结果，得到不同浓度SW对细胞存活率影响曲线（图1）

⑥将培养48h的培养液离心，细胞染色，在荧光显微镜下观察拍照，记录正常细胞和凋亡细胞数目，并采用免疫荧光细胞技术检测细胞凋亡蛋白Bax和Bcl-2表达量状况，汇总统计结果（表1）

（1）实验中首先将小鼠肝癌Hepal-6细胞制成单细胞悬液，于37℃、5%CO₂培养箱中培养的目的是____________________________________。

（2）实验中对照组的处理方法应为_____________________________，利用多孔板培养时，每组设置5个平行孔同时进行培养，计数后统计平均值是为了_____________________________________。

（3）分析图1中曲线可知，SW对肝癌Hepal-6细胞作用效果的特点是：

①___________________________________________________________；

②____________________________________________________________。

（4）表1结果说明SW可以诱发细胞___________________，从分子水平上分析，SW可以导致癌细胞内__________的合成量增加，该基因表达的过程可以表示为______________________。

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（8分）苦马豆素(SW)最早是从植物灰苦马豆中分离获得，为了研究SW是否具有抑制肿瘤细胞生长的作用，许多学者做了大量研究，实验过程及实验结果如下：

①取小鼠肝癌Hepal-6细胞。

②制成单细胞悬液，等量接种于多孔板，加入等量培养液，每组设5个平行孔。

③于37℃、5％CO2培养箱中培养24 h。

④加入等量不同浓度的SW溶液，于37℃、5％CO2培养箱中培养。

⑤分别在24 h、48 h、72 h时吸取培养液，观察记录结果，得到不同浓度的SW对细胞存活率的影响曲线如图所示。

⑥将培养48h的培养液离心，细胞染色，在荧光显微镜下观察拍照，记录正常细胞和凋亡细胞的数目，并采用免疫荧光细胞技术检测细胞凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表达量状况，汇总统计结果如下表。

培养48h后细胞数目及凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表达状况

注：“+”的数量表示相对值的大小

回答下列问题：

（1）实验中首先将小鼠肝癌Hepal-6细胞制成单细胞悬液，于37℃、5％CO2培养箱中培养的目的是　　　　　　　　　　　　 。培养箱中要有适量的无菌空气，原因是　　　　　　　　　　 。肝癌细胞悬液中细胞有悬浮生长的特征，可能的原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（2）实验中利用多孔板培养时，每组设置5个平行孔同时进行培养，计数后统计平均值是为了　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（3）分析图中曲线可知，SW对肝癌Hepal-6细胞的作用效果是：①　　　　　　　　　　　　　　

　　　　　　　　 ；②　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（4）表中结果说明SW可以诱发细胞　　　　　　　 ，从而抑制肿瘤细胞生长，从分子水平上分析，SW可能是导致癌细胞内　　　　　　　　　　 的合成量增加。

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苦马豆素(SW)最早是从植物灰苦马豆中分离获得，为了研究SW是否具有抑制肿瘤细胞生长的作用，许多学者做了大量研究，实验过程及实验结果如下：

①取小鼠肝癌Hepal-6细胞。

②制成单细胞悬液，等量接种于多孔板，加入等量培养液，每组设5个平行孔。

③于37℃、5％CO2培养箱中培养24 h。

④加入等量不同浓度的SW溶液，于37℃、5％CO2培养箱中培养。

⑤分别在24 h、48 h、72 h时吸取培养液，观察记录结果，得到不同浓度的SW对细胞存活率的影响曲线如图所示。

⑥将培养48 h的培养液离心，细胞染色，在荧光显微镜下观察拍照，记录正常细胞和凋亡细胞的数目，并采用免疫荧光细胞技术检测细胞凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表达量状况，汇总统计结果如下表。

培养48h后细胞数目及凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表达状况

注：“+”的数量表示相对值的大小

回答下列问题：

（1）实验中首先将小鼠肝癌Hepal-6细胞制成单细胞悬液，于37℃、5％CO2培养箱中培养的目的是　　　　　　　　　　　　 。培养箱中要有适量的无菌空气，原因是　　　　　　　　　　 。肝癌细胞悬液中细胞有悬浮生长的特征，可能的原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（2）实验中利用多孔板培养时，每组设置5个平行孔同时进行培养，计数后统计平均值是为了　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（3）分析图中曲线可知，SW对肝癌Hepal-6细胞的作用效果是：①　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 ；②　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（4）表中结果说明SW可以诱发细胞　　　　　　　 ，从而抑制肿瘤细胞生长，从分子水平上分析，SW可能是导致癌细胞内　　　　　　　　　　 的合成量增加。

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苦马豆素（SW）最早是从植物灰苦马豆中分离获得，为了研究SW对肿瘤细胞DNA复制的影响。研究者提出了以下实验思路：

（1）实验分组：

甲组：培养液+肿瘤细胞+3H-TDR(3H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷)+生理盐水

乙组：培养液+肿瘤细胞+3H-TDR+SW（用生理盐水配制），每组设置若干个重复样品。

（2）分别测定两组的CRD（细胞内的放射性强度），求每组的平均值。

（3）将各样品在适宜条件下培养合适时间后，测定CRD，求每组平均值并进行统计分析。（要求与说明：答题时用SW、CRD、3H-TDR表示相关名词）请回答：

（1）肿瘤细胞DNA复制时所需的酶有　　　　　　　　　　　　 ，复制方式是　　　　　　　　 。

（2）预测实验的可能结果及结论：若乙组CRD明显高于甲组，则说明　　　　　　 　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　　 　　 ； 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 ；　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（3）实验中每组设置若干个重复样品的目的是　　　　　　　　　　　　　　　　　　 ,实验中采用3H-TDR的原因是　　　　 　　　　 　　　 ，可根据　　　　　　　 的变化来判断DNA复制情况。

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（8分）苦马豆素（SW）是从灰苦马豆中分离出来而得名，被认为是“未来的肿瘤治疗药物”。以下是相关的实验研究过程及结果：

①将等量的小鼠肝癌Hepal-6细胞悬液，分别接种于若干支含等量培养液的培养瓶中。

②将培养瓶放于37℃、5%CO2培养箱中培养24h，静置、去除上清液；

③分别加入等量但含不同浓度SW的培养液，于37℃、5%CO2培养箱中继续培养；

④分别在24h、48h、72h时吸取培养液，观察结果，得到不同浓度SW对细胞存活率影响曲线（图）。

请回答：

（1）处于间期的肝癌Hepal-6细胞，其分子水平的主要变化是　　　　　　　　　　　　　 。

（2）③实验要设置对照组，对照组的处理方法应为　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。步骤③中每个实验组设置5个培养瓶同时进行培养，计数后统计　　　　　　 ，这是为了　　　　　　　　　　　 ，使实验结果更可信。

（3）分析图1中曲线可知，SW对肝癌Hepal-6细胞作用效果的特点是：

①　　　　　　　　　　　　　　　　 ，对细胞生长（存活）的抑制作用越强；

②　　　　　　　　　　　　　　　　 ，对细胞生长（存活）的抑制作用越强。

（4）将培养48h的培养液离心，去除上清液后经过一系列的处理及分析，得到下表结果：

表：培养48h细胞数目及凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表达量

注：“＋”的数量表示相对值的多少

据此推测，SW可能是通过诱发癌细胞　　　　　　　　 来抑制肿瘤生长的，其原因可能是SW促进了癌细胞内基因的表达。

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苦马豆素(SW)因从灰苦马豆中分离出来而得名，被认为是“未来的肿瘤治疗药物”。以下是相关的实验研究过程及结果。

①将等量的小鼠肝癌Hepal－6细胞悬液，分别接种于若干个含有等量培养液的培养瓶中；

②将培养瓶放于37 ℃、5% CO2培养箱中培养24 h，静置、去除上清液；

③分别加入等量但含不同浓度SW的培养液，于37 ℃、5% CO2培养箱中继续培养；

④分别在24 h、48 h、72 h时吸取培养液，观察结果，得到不同浓度SW对细胞存活率影响曲线如图所示。

请回答下列问题。

(1)培养箱中5% CO2的作用是______________________________________。

(2)处于间期的肝癌Hepal－6细胞，其分子水平的主要变化是________________________________________________________________。

(3)步骤③中需要设置对照组，对照组的处理方法应为________。步骤③中每个实验组设置5个培养瓶同时进行培养，计数后统计平均值，这是为了________________，使实验结果更准确。

(4)分析图中曲线可知，SW对肝癌Hepal－6细胞作用效果的特点是①______________________________________________________________；

②__________________________________________________________。

(5)将培养48 h的培养液离心，去除上清液后经过一系列的处理及分析，得到培养48 h细胞数目及凋亡蛋白Bax和Bcl－2的表达量如表所示：

注：“＋”的数量表示相对值的多少

据此推测，SW可能是通过诱发癌细胞________来抑制肿瘤生长的，其原因可能是SW促进了癌细胞内________________的表达。

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（12分）为了探究苦马豆素（SW）对肝癌细胞体外生长的作用，研究员做了以下实验：

材料与用具：小鼠肝癌组织、SW、rpmi-1640培养液（用于培养癌细胞）、生理盐水、活细胞检测仪、培养皿等（说明：对动物细胞的培养过程和检测方法不做具体要求）

（1）完善实验步骤：

①配制细胞悬液：用胰蛋白酶将小鼠肝癌组织消化成单个细胞，加入________________配制成单细胞悬液，随机均分为若干组，并各组测定初始细胞数；

②实验分组：　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 ；

③培养：以上各级置于37oC、5％的二氧化碳培养箱中分别培养；

④检测与处理：分别在24h、48h、72 h时取样检测各组存活的细胞数，求细胞存活率(细胞存活率=实验组/对照组×l00％)。请分析回答：

（2）请你设计一张表格，用以记录和处理实验数据。

（3）下图表示本实验结果的坐标曲线图，据图你能得出结论是___________。

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苦马豆素（SW）是一种具有抗肿瘤功能的生物碱。为了解苦马豆素在抗肿瘤过程中的作用效果，科研人员进行了相关研究。

（1）细胞发生癌变的根本原因是_____。癌变后，细胞膜上的_____等物质减少，使得癌细胞容易在体内分散和转移。同时，某些癌细胞的细胞膜成分发生改变，出现甲胎蛋白等物质，这些物质可以作为_____刺激机体产生特异性免疫，这种现象体现了细胞膜具有_____的功能。癌细胞的线粒体也较正常细胞减少，从而影响了癌细胞中的_____过程。（填选项前的字母）

A．葡萄糖分解成丙酮酸、[H]　　 B．丙酮酸转化成乳酸 C．丙酮酸和水彻底分解成 CO2 和[H]　　 D．[H]与氧结合形成 H2O

（2）细胞凋亡是_____所决定的细胞自动结束生命的过程。为研究 SW 对胃癌细胞凋亡的影响，科研人员进行了下列实验：取胃癌细胞用_____处理，使之分散成单个细胞，用细胞培养液进行培养，此细胞培养液与植物组织培养基最主要的不同是需要添加_____。将制备好的细胞悬液放入恒温_____培养箱内，在适宜条件下培养一段时间后，加入不同浓度的SW，分别培养 24h、48h、72h 后，统计结果如下：

将经实验处理过的胃癌细胞制成装片在显微镜下进行观察，可以观察到癌细胞出现了凋亡的特征。结合图中数据可以得出的结论是_____。

（3）为研究不同浓度SW在治疗肿瘤的过程中对机体免疫调节功能的影响，科研人员利用正常小鼠和移植肿瘤的小鼠进行了相关实验。实验过程中，除设置不同浓度SW处理的正常小鼠和移植肿瘤的小鼠外，还需设置_____作为对照。（填选项前的字母）

A．注射等量清水的正常小鼠　　

B．注射等量生理盐水的正常小鼠

C．注射等量生理盐水的移植肿瘤小鼠　

D．注射等量不同浓度 SW 的移植肿瘤小鼠

如果还需要将 SW 与具有免疫调节功能的临床应用药物左旋咪唑的效果进行比较，应设置_____作为对照才能得出结论。

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苦马豆素（SW）是一种具有抗肿瘤功能的生物碱。为了解苦马豆素在抗肿瘤过程中的作用效果，科研人员进行了相关研究。

（1）细胞发生癌变的根本原因是________。癌变后，细胞膜上的________等物质减少，使得癌细胞容易在体内分散和转移。同时，某些癌细胞的细胞膜成分发生改变，出现甲胎蛋白等物质，这些物质可以作为________刺激机体产生特异性免疫，这种现象体现了细胞膜具有________的功能。癌细胞的线粒体也较正常细胞减少，从而影响了癌细胞中的________（填选项前的符号）过程。

A．葡萄糖分解成丙酮酸、[H]

B．丙酮酸转化成乳酸

C．丙酮酸和水彻底分解成CO2和[H]

D．[H]和氧结合形成H2O

（2）细胞凋亡是________所决定的细胞自动结束生命的过程。为研究SW对胃癌细胞凋亡的影响，科研人员进行了下列实验：取胃癌细胞用________处理后，使之分散成单个细胞，用细胞培养液进行培养，此细胞培养液与植物组织培养基最主要的不同是需要添加________。将制备好的细胞悬液在适宜条件下培养一段时间后，加入不同浓度的SW，分别培养24h、48h、72h后，统计结果如下：

将经实验处理过的胃癌细胞制成装片在显微镜下进行观察，可以观察到癌细胞出现了凋亡的特征。结合图中数据可以得出的结论是__________________________。

（3）为研究不同浓度SW在治疗肿瘤的过程中对机体免疫调节功能的影响，科研人员利用正常小鼠和移植肿瘤的小鼠进行了相关实验。实验过程中，除设置不同浓度SW处理的实验组以外，还需设置________作为对照。（填选项前的符号）

A．注射等量清水的正常小鼠

B．注射等量生理盐水的正常小鼠

C．注射等量生理盐水的移植肿瘤小鼠

D．注射等量不同浓度SW的移植肿瘤小鼠

如果还需要将SW与具有免疫调节功能的临床应用药物左旋咪唑的效果进行比较，应设置________作为对照才能得出结论。

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