苦马豆素（SW）是一种具有抗肿瘤功能的生物碱。为了解苦马豆素在抗肿瘤过程中的作用效果，科研...

苦马豆素（SW）是一种具有抗肿瘤功能的生物碱。为了解苦马豆素在抗肿瘤过程中的作用效果，科研人员进行了相关研究。

（1）细胞发生癌变的根本原因是_____。癌变后，细胞膜上的_____等物质减少，使得癌细胞容易在体内分散和转移。同时，某些癌细胞的细胞膜成分发生改变，出现甲胎蛋白等物质，这些物质可以作为_____刺激机体产生特异性免疫，这种现象体现了细胞膜具有_____的功能。癌细胞的线粒体也较正常细胞减少，从而影响了癌细胞中的_____过程。（填选项前的字母）

A．葡萄糖分解成丙酮酸、[H]　　 B．丙酮酸转化成乳酸 C．丙酮酸和水彻底分解成 CO2 和[H]　　 D．[H]与氧结合形成 H2O

（2）细胞凋亡是_____所决定的细胞自动结束生命的过程。为研究 SW 对胃癌细胞凋亡的影响，科研人员进行了下列实验：取胃癌细胞用_____处理，使之分散成单个细胞，用细胞培养液进行培养，此细胞培养液与植物组织培养基最主要的不同是需要添加_____。将制备好的细胞悬液放入恒温_____培养箱内，在适宜条件下培养一段时间后，加入不同浓度的SW，分别培养 24h、48h、72h 后，统计结果如下：

将经实验处理过的胃癌细胞制成装片在显微镜下进行观察，可以观察到癌细胞出现了凋亡的特征。结合图中数据可以得出的结论是_____。

（3）为研究不同浓度SW在治疗肿瘤的过程中对机体免疫调节功能的影响，科研人员利用正常小鼠和移植肿瘤的小鼠进行了相关实验。实验过程中，除设置不同浓度SW处理的正常小鼠和移植肿瘤的小鼠外，还需设置_____作为对照。（填选项前的字母）

A．注射等量清水的正常小鼠　　

B．注射等量生理盐水的正常小鼠

C．注射等量生理盐水的移植肿瘤小鼠　

D．注射等量不同浓度 SW 的移植肿瘤小鼠

如果还需要将 SW 与具有免疫调节功能的临床应用药物左旋咪唑的效果进行比较，应设置_____作为对照才能得出结论。

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苦马豆素（SW）是一种具有抗肿瘤功能的生物碱。为了解苦马豆素在抗肿瘤过程中的作用效果，科研人员进行了相关研究。

（1）细胞发生癌变的根本原因是________。癌变后，细胞膜上的________等物质减少，使得癌细胞容易在体内分散和转移。同时，某些癌细胞的细胞膜成分发生改变，出现甲胎蛋白等物质，这些物质可以作为________刺激机体产生特异性免疫，这种现象体现了细胞膜具有________的功能。癌细胞的线粒体也较正常细胞减少，从而影响了癌细胞中的________（填选项前的符号）过程。

A．葡萄糖分解成丙酮酸、[H]

B．丙酮酸转化成乳酸

C．丙酮酸和水彻底分解成CO2和[H]

D．[H]和氧结合形成H2O

（2）细胞凋亡是________所决定的细胞自动结束生命的过程。为研究SW对胃癌细胞凋亡的影响，科研人员进行了下列实验：取胃癌细胞用________处理后，使之分散成单个细胞，用细胞培养液进行培养，此细胞培养液与植物组织培养基最主要的不同是需要添加________。将制备好的细胞悬液在适宜条件下培养一段时间后，加入不同浓度的SW，分别培养24h、48h、72h后，统计结果如下：

将经实验处理过的胃癌细胞制成装片在显微镜下进行观察，可以观察到癌细胞出现了凋亡的特征。结合图中数据可以得出的结论是__________________________。

（3）为研究不同浓度SW在治疗肿瘤的过程中对机体免疫调节功能的影响，科研人员利用正常小鼠和移植肿瘤的小鼠进行了相关实验。实验过程中，除设置不同浓度SW处理的实验组以外，还需设置________作为对照。（填选项前的符号）

A．注射等量清水的正常小鼠

B．注射等量生理盐水的正常小鼠

C．注射等量生理盐水的移植肿瘤小鼠

D．注射等量不同浓度SW的移植肿瘤小鼠

如果还需要将SW与具有免疫调节功能的临床应用药物左旋咪唑的效果进行比较，应设置________作为对照才能得出结论。

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PD-1与PD-L1是目前肿瘤治疗的热门靶点蛋白。sPD-1是PD-1的可溶形式，能够被分泌至胞外。为探讨sPD-1对肿瘤疫苗抗乳腺癌作用的影响，科研人员进行了相关研究。

（1）因为癌细胞具有____________等特征，癌症的治疗非常困难。肿瘤疫苗是新型治疗方法，其原理是将肿瘤抗原导入人体内，激活患者自身的免疫应答，从而达到控制或清除肿瘤的目的，下列可做为肿瘤抗原的是____________（填写序号）。

①衰老肿瘤细胞②肿瘤相关蛋白或多肽③含有肿瘤抗原基因的表达载体④肿瘤细胞内的脱氧核糖

（2）研究发现，肿瘤疫苗可激活T细胞并诱导其产生IFN-γ（一种淋巴因子）。用不同浓度的IFN-γ培养小鼠乳腺癌细胞，并对其细胞膜上PD-L1表达情况进行检测，结果如图1：

与对照组相比，实验组小鼠乳腺癌细胞膜蛋白PD-L1表达____________。

（3）进一步研究发现，在正常机体中，组织细胞表面的PD-L1与T细胞表面的PD-1结合（如图2），使T细胞活性被适当抑制，避免了免疫过强而导致自身免疫性疾病的发生。肿瘤细胞PD-L1的高水平表达会____________（填“降低”或“增加”）肿瘤细胞被免疫系统清除的可能性。研究发现使用肿瘤疫苗时随着时间的延长而作用效果减弱，根据（2）和（3）推测可能的原因是____________，从而抑制了T细胞对肿瘤细胞的清除作用。

（4）为了解决这一问题，科研人员对作为肿瘤疫苗的衰老癌细胞疫苗进行了基因改造，使其可以大量分泌可与PD-L1结合的sPD-1，并进行了如下实验：实验小鼠皮下接种小鼠乳腺癌细胞，随机分为三组，分别给予衰老癌细胞疫苗、高表达sPD-1的衰老癌细胞疫苗、磷酸缓冲液（对照）处理，分别于6、12、18、24、30天记录并统计无瘤小鼠的比例，结果如图3所示。综合上述实验分析，解释高表达sPD-1的衰老癌细胞疫苗组无瘤小鼠比例最高的可能机理____________。

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PD-1与PD-L1是目前肿瘤治疗的热门靶点蛋白。sPD-1是PD-1的可溶形式，能够被分泌至胞外。为探讨sPD-1对肿瘤疫苗抗乳腺癌作用的影响，科研人员进行了相关研究。

（1）因为癌细胞具有____________等特征，癌症的治疗非常困难。肿瘤疫苗是新型治疗方法，其原理是将肿瘤抗原导入人体内，激活患者自身的免疫应答，从而达到控制或清除肿瘤的目的，下列可做为肿瘤抗原的是____________（填写序号）。

①衰老肿瘤细胞②肿瘤相关蛋白或多肽③含有肿瘤抗原基因的表达载体④肿瘤细胞内的脱氧核糖

（2）研究发现，肿瘤疫苗可激活T细胞并诱导其产生IFN-γ（一种淋巴因子）。用不同浓度的IFN-γ培养小鼠乳腺癌细胞，并对其细胞膜上PD-L1表达情况进行检测，结果如图1：

与对照组相比，实验组小鼠乳腺癌细胞膜蛋白PD-L1表达____________。

（3）进一步研究发现，在正常机体中，组织细胞表面的PD-L1与T细胞表面的PD-1结合（如图2），使T细胞活性被适当抑制，避免了免疫过强而导致自身免疫性疾病的发生。肿瘤细胞PD-L1的高水平表达会____________（填“降低”或“增加”）肿瘤细胞被免疫系统清除的可能性。研究发现使用肿瘤疫苗时随着时间的延长而作用效果减弱，根据（2）和（3）推测可能的原因是____________，从而抑制了T细胞对肿瘤细胞的清除作用。

（4）为了解决这一问题，科研人员对作为肿瘤疫苗的衰老癌细胞疫苗进行了基因改造，使其可以大量分泌可与PD-L1结合的sPD-1，并进行了如下实验：实验小鼠皮下接种小鼠乳腺癌细胞，随机分为三组，分别给予衰老癌细胞疫苗、高表达sPD-1的衰老癌细胞疫苗、磷酸缓冲液（对照）处理，分别于6、12、18、24、30天记录并统计无瘤小鼠的比例，结果如图3所示。综合上述实验分析，解释高表达sPD-1的衰老癌细胞疫苗组无瘤小鼠比例最高的可能机理____________。

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苦马豆素（SW）最早是从植物灰苦马豆中分离获得，为了研究SW是否具有抑制肿瘤细胞生长的作用，许多学者做了大量研究，请根据以下实验研究过程及研究结果回答问题。

①取小鼠肝癌Hepal-6细胞

②制成单细胞悬液，接种于多孔板，加入等量培养液，每组设5个平行孔

③于37℃、5%CO₂培养箱中分别培养24h

④加入等量不同浓度SW溶液，于37℃、5%CO₂培养箱中分别培养

⑤分别在24h、48h、72h时吸取培养液，观察结果，得到不同浓度SW对细胞存活率影响曲线（图1）

⑥将培养48h的培养液离心，细胞染色，在荧光显微镜下观察拍照，记录正常细胞和凋亡细胞数目，并采用免疫荧光细胞技术检测细胞凋亡蛋白Bax和Bcl-2表达量状况，汇总统计结果（表1）

（1）实验中首先将小鼠肝癌Hepal-6细胞制成单细胞悬液，于37℃、5%CO₂培养箱中培养的目的是____________________________________。

（2）实验中对照组的处理方法应为_____________________________，利用多孔板培养时，每组设置5个平行孔同时进行培养，计数后统计平均值是为了_____________________________________。

（3）分析图1中曲线可知，SW对肝癌Hepal-6细胞作用效果的特点是：

①___________________________________________________________；

②____________________________________________________________。

（4）表1结果说明SW可以诱发细胞___________________，从分子水平上分析，SW可以导致癌细胞内__________的合成量增加，该基因表达的过程可以表示为______________________。

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（8分）苦马豆素(SW)最早是从植物灰苦马豆中分离获得，为了研究SW是否具有抑制肿瘤细胞生长的作用，许多学者做了大量研究，实验过程及实验结果如下：

①取小鼠肝癌Hepal-6细胞。

②制成单细胞悬液，等量接种于多孔板，加入等量培养液，每组设5个平行孔。

③于37℃、5％CO2培养箱中培养24 h。

④加入等量不同浓度的SW溶液，于37℃、5％CO2培养箱中培养。

⑤分别在24 h、48 h、72 h时吸取培养液，观察记录结果，得到不同浓度的SW对细胞存活率的影响曲线如图所示。

⑥将培养48h的培养液离心，细胞染色，在荧光显微镜下观察拍照，记录正常细胞和凋亡细胞的数目，并采用免疫荧光细胞技术检测细胞凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表达量状况，汇总统计结果如下表。

培养48h后细胞数目及凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表达状况

注：“+”的数量表示相对值的大小

回答下列问题：

（1）实验中首先将小鼠肝癌Hepal-6细胞制成单细胞悬液，于37℃、5％CO2培养箱中培养的目的是　　　　　　　　　　　　 。培养箱中要有适量的无菌空气，原因是　　　　　　　　　　 。肝癌细胞悬液中细胞有悬浮生长的特征，可能的原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（2）实验中利用多孔板培养时，每组设置5个平行孔同时进行培养，计数后统计平均值是为了　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（3）分析图中曲线可知，SW对肝癌Hepal-6细胞的作用效果是：①　　　　　　　　　　　　　　

　　　　　　　　 ；②　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（4）表中结果说明SW可以诱发细胞　　　　　　　 ，从而抑制肿瘤细胞生长，从分子水平上分析，SW可能是导致癌细胞内　　　　　　　　　　 的合成量增加。

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苦马豆素(SW)最早是从植物灰苦马豆中分离获得，为了研究SW是否具有抑制肿瘤细胞生长的作用，许多学者做了大量研究，实验过程及实验结果如下：

①取小鼠肝癌Hepal-6细胞。

②制成单细胞悬液，等量接种于多孔板，加入等量培养液，每组设5个平行孔。

③于37℃、5％CO2培养箱中培养24 h。

④加入等量不同浓度的SW溶液，于37℃、5％CO2培养箱中培养。

⑤分别在24 h、48 h、72 h时吸取培养液，观察记录结果，得到不同浓度的SW对细胞存活率的影响曲线如图所示。

⑥将培养48 h的培养液离心，细胞染色，在荧光显微镜下观察拍照，记录正常细胞和凋亡细胞的数目，并采用免疫荧光细胞技术检测细胞凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表达量状况，汇总统计结果如下表。

培养48h后细胞数目及凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表达状况

注：“+”的数量表示相对值的大小

回答下列问题：

（1）实验中首先将小鼠肝癌Hepal-6细胞制成单细胞悬液，于37℃、5％CO2培养箱中培养的目的是　　　　　　　　　　　　 。培养箱中要有适量的无菌空气，原因是　　　　　　　　　　 。肝癌细胞悬液中细胞有悬浮生长的特征，可能的原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（2）实验中利用多孔板培养时，每组设置5个平行孔同时进行培养，计数后统计平均值是为了　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（3）分析图中曲线可知，SW对肝癌Hepal-6细胞的作用效果是：①　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 ；②　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（4）表中结果说明SW可以诱发细胞　　　　　　　 ，从而抑制肿瘤细胞生长，从分子水平上分析，SW可能是导致癌细胞内　　　　　　　　　　 的合成量增加。

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蜂毒素是工蜂毒腺分泌的多肽，具有抗菌、抗病毒及抗肿瘤等广泛的生物学效应。 体外研究发现，蜂毒素对多种癌细胞具有强烈的杀伤作用。研究表明，阻断癌细胞增殖周期可引起细胞凋亡．科研人员为研究蜂毒素对人胃癌细胞的影响及作用机制，进行了以下实验。请完善实验并回答问题。

①方法步骤：

a．取4只相同的培养瓶编号，分别加入等量的完全培养液并接种等量离体胃癌细胞。

b．I号培养瓶为空白对照，向2～4号培养瓶中分别加入______μg/mL蜂毒素溶液。

c．培养48小时后，检测并统计______，结果如图1所示。

d．重复a、b步骤，检测凋亡基因（Bax、Bel-2）的表达，结果如图2所示。

②分析讨论：

a．图1表明　　　　　　　　 　　　　　 。

b．图1、图2表明：从基因水平上看，蜂毒素诱导胃癌细胞凋亡与______有关。当 Bel-2蛋白/Bax蛋白的比值出现______趋势时，将会诱导胃癌细胞凋亡。

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苦马豆素(SW)最早是从植物灰苦马豆中分离获得的，许多学者做了大量研究，得到不同浓度SW对细胞存活率的影响曲线如图所示，为了验证SW具有抑制肿瘤细胞生长的作用，某生物兴趣小组重复了学者们所做的实验，其过程如下，请完善相关内容。

(1)实验目的：____________________________________________________________。

(2)实验操作：

实验组：取小鼠肝癌Hepal­6细胞，培养24 h后加入等量不同浓度的SW溶液分别培养，并分别在24 h、48 h、72 h时吸取培养液，观察结果。

对照组：________________________________________________________________。

(3)该兴趣小组所得的实验结果与图中相似，该实验的结论为____________________

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

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荷仙菇是一种药食兼用的大型真菌，具有抗癌、免疫调节、提高造血功能等功效。科研人员进行了荷仙菇抗肿瘤作用的研究。将荷仙菇超微菌粉用生理盐水配制成高、中、低剂量的溶液，并设置不同的对照组，每组10只带瘤小鼠。各组给药体积均为0.2mL/10g，每天1次，连续给药10天。末次给药24h后，处死小鼠进行相关分析，得到的数据如下表所示。请分析作答：

（1）对照组甲加入的试剂是目前常用的非特异性抗肿瘤药物——环磷酰胺，其主要作用机理是与DNA发生交叉联结，抑制DNA的合成，对处于细胞增殖______期的肿瘤细胞作用最明显。五组实验中，该组的抑瘤率最_________。但使用该药物的患者容易出现白细胞数量下降、恶心呕吐等不良反应。对照组乙对小鼠的处理应是每天注射_______________。

（2）实验结果说明_______________________________________。

（3）要证明荷仙菇的抗肿瘤作用，还应对小鼠进行胸腺指数（胸腺重量/体重）、脾脏指数（脾脏重量/体重）的测定。若实验结果支持荷仙菇能抗肿瘤，则胸腺指数和脾脏指数与对照组相比应显著______，这是因为__________________。

（4）另有实验结果表明，3个给药组小鼠的干扰素含量与对照组相比均上升，血管内皮细胞生长因子的含量则均下降，说明这两种物质对小鼠肿瘤生长状况的影响分别是_________。

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