MstII是一种限制性核酸内切酶,它总是在CCTGAGG的碱基序列中的A--G之间切断DNA。细胞色素C是一种蛋白质,下图所示用MstII处理后的三叶草细胞色素C的基因片断。下列有关叙述正确的是( )
A.MstII处理的细胞色素C基因得到的片段可以用DNA聚合酶连接起来
B.用MstII处理得到图示基因片段要切断6个磷酸二酯键
C.用MstII处理细胞色素C正常基因后将产生3个DNA片段
D.细胞色素C基因某处CCTGAGG突变为CCTCCTG,MstII处理后产生4个片段
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MstII是一种限制性核酸内切酶,它总是在CCTGAGG的碱基序列中的A--G之间切断DNA。细胞色素C是一种蛋白质,下图所示用MstII处理后的三叶草细胞色素C的基因片断。下列有关叙述正确的是( )
A.MstII处理的细胞色素C基因得到的片段可以用DNA聚合酶连接起来
B.用MstII处理得到图示基因片段要切断6个磷酸二酯键
C.用MstII处理细胞色素C正常基因后将产生3个DNA片段
D.细胞色素C基因某处CCTGAGG突变为CCTCCTG,MstII处理后产生4个片段
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Mst Ⅱ是一种限制性内切酶,它总是在CCTGAGG的碱基序列中切断DNA。图中显示了用Mst Ⅱ处理后的正常β-血红蛋白基因片段。镰刀型细胞贫血症的根本原因是β-血红蛋白基因突变。下列有关叙述中,错误的是( )
A.在起初的正常β-血红蛋白基因中有3个CCTGAGG序列
B.若β-血红蛋白基因某一处CCTGAGG突变为CCTCCTG,则用Mst Ⅱ处理该基因后产生3个DNA片段
C.将Mst Ⅱ酶用于镰刀型细胞贫血症的基因诊断,若产生3个DNA片段,则β-血红蛋白基因正常
D.将Mst Ⅱ酶用于镰刀型细胞贫血症的基因诊断,若产生4个DNA片段,则β-血红蛋白基因正常
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下列有关基因工程的叙述正确的是
A.用同种限制性核酸内切酶切割载体与含目的基因的DNA片段可获相同黏性末端
B.以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因与原基因的碱基序列相同
C.检测到受体细胞中含有目的基因就标志着基因工程育种已经成功
D.质粒上的抗生素抗性基因有利于质粒与外源基因连接
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若某种限制性核酸内切酶的识别序列是CCTAGG,它在A和G之间切断DNA。下图表示用该酶处理某基因后产生的片段。下列有关叙述错误的是
A.该正常基因中有3个CCTAGG序列
B.产生的DNA片段可用DNA连接酶连接起来
C.用该酶处理得到图示基因片段要水解6个磷酸二酯键
D.若该基因某处有一个CCTAGC突变为CCTAGG,用该酶处理后将产生5个切口,5个片断
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若某种限制性核酸内切酶的识别序列是CCTAGG,它在A和G之间切断DNA。下图表示用该酶处理某基因后产生的片段。下列有关叙述正确的是
A. 该正常基因中有4个CCTAGG序列
B. 产生的DNA片段可用DNA连接酶连接起来
C. 用该酶处理得到图示基因片段要水解3个磷酸二酯键
D. 若该基因某处有一个CCTAGG突变为CCTAGC,用该酶处理后将产生5个片段
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若某种限制性核酸内切酶的识别序列是CCTAGG,它在A和G之间切断DNA。下图表示用该酶处理某基因后产生的片段。下列有关叙述正确的是
A.该正常基因中有3个CCTAGG序列
B.产生的DNA片段可用核糖核酸连接酶连接起来
C.用该酶处理得到图示基因片段要水解3个磷酸二酯键
D.若该基因某处有一个CCTAGC突变为CCTAGG,用该酶处理后将产生5个片段
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新一代基因编辑工具由Cas9(一种限制性核酸内切酶)和向导RNA构成。该复合体能与DNA分子上的特定序列结合,并在合适位点切断DNA双链(如下图所示)。DNA被切断后,细胞会启动DNA损伤修复机制,在此基础上如果为细胞提供一个修复模板,细胞就会按照提供的模板在修复过程中引入片段插入或定点突变,从而实现基因编辑。
请回答:
(1)在将编码Cas9的基因导入真核细胞的转基因操作中,若控制合成Cas9的基因序列已知,可用___方法合成目的基因,再构建___导入真核细胞,该过程中需要使用的酶是__
A.限制性核酸内切酶 B.DNA连接酶 C.限制性核酸内切酶和DNA连接酶 D.DNA聚合酶
上述转基因操作成功的标志是__ 。
(2)如图所示,基因编辑工具发挥作用时,向导RNA分子的序列与基因组DNA中特定碱基序列因为___所以能结合在一起,然后由Cas9催化__键断裂,从而使DNA分子断裂。
(3)一般来说,在使用基因编辑工具对不同基因进行编辑时,应使用Cas9和___(填“相同”或“不同”)的向导RNA进行基因的相关编辑。
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I.新一代基因编辑工具由 Cas9(一种限制性核酸内切酶)和向导RNA构成。该复合体能与DNA分子上的特定序列结合,并在合适位点切断DNA双链(如下图所示)。DNA被切断后,细胞会启动DNA损伤修复机制,在此基础上如果为细胞提供一个修复模板,细胞就会按照提供的模板在修复过程中引入片段插入或定点突变,从而实现基因编辑。请回答:
(1)在将编码Cas9的基因导入真核细胞的转基因操作中,若控制合成Cas9的基因序列已知,可用_______方法合成目的基因,再构建表达载体导入真核细胞。上述转基因操作成功的标志________________。
(2)如图1所示,基因编辑工具发挥作用时,向导RNA分子的序列与基因组DNA中特定碱基序列因为碱基互补序列所以能结合在一起,然后由Cas9催化__________键断裂,从而使 DNA分子断裂。
(3)一般来说,在使用基因编辑工具对不同基因进行编辑时,应使用Cas9和_____(填“相同”或“不同”)的向导RNA进行基因的相关编辑。
(4)如图2所示,若用两种识别切割序列完全不同的限制酶E和F从基因组DNA上切下目的基因,并将之取代质粒pZHZ1(3.7kb,1kb=1000对碱基)上相应的E—F区域(0.2kb)。已知在质粒pZHZl中,限制酶G切割位点距限制酶E切割位点0.8kb,限制酶H切割位点距限制酶F切割位点O.5kb。若分别用限制酶G和H酶切两份重组质粒pZHZ2样品,据表所列为酶切结果。请将目的基因内部的限制酶G和H切割位点标注在图3中。_______
Ⅱ.青光眼是导致人类失明的三大致盲眼病之一,其中发育性青光眼(婴幼儿型和青少年型)具有明显的家族遗传倾向。检查发现,发育型青光眼患者角膜小梁细胞中M蛋白异常。为研究其病因,研究者用含绿色荧光蛋白基因G或红色荧光蛋白基因R的质粒、正常人M蛋白基因(M+)或青光眼患者M蛋白基因(M-),构建基因表达载体,分别导入Hela细胞中进行培养,一段时间后检测培养液和细胞中荧光的分布情况,实验分组及检测结果如下表(示只含荧光蛋白基因的质粒片段;示含荧光蛋白基因和M蛋白基因的质粒片段,此时两基因表达的产物是一个整体)。
(1) 据下表推测,发育型青光眼的病因是_______异常导致其指导合成的M蛋白异常,导致小梁细胞中的M蛋白___________________,而在细胞中大量积累,最终导致小梁细胞功能异常。
(2)下表中第___________组实验可以判断:发育型青光眼是显性遗传病。
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镰刀型细胞贫血症的病因是血红蛋白基因的碱基序列发生了改变。检测这种碱基序列改变必须使用的酶是( )
A.解旋酶 B.DNA连接酶 C.限制性核酸内切酶 D.RNA聚合酶
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IGF-2是小鼠正常发育必需的一种蛋白质,缺乏时小鼠个体矮小。小鼠细胞中A1基因控制IGF-2的合成,若突变为A2基因则表达失效。有研究发现,DNA存在如图所示的甲基化现象,甲基化不导致碱基序列的改变,小鼠卵细胞形成时若A.基因特定区域发生甲基化,会阻断该基因的转录,精子形成时无此现象。
(1)据题可知,A1基因和A2基因是一对_______。A2是A1发生碱基对______等变化所致。
(2)A1基因的甲基化是否属于基因突变?____为什么? ______________________。
(3)用A1基因制成基因探针, ________________(填“能”“不能”)在上述卵细胞中检测到A1基因的mRNA。基因型为A1A2的小鼠可能表现为个体矮小,请解释原因________________________。
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