胚胎干细胞介导法(转基因动物培育的途径之一)的主要操作过程是：将外源基因导入胚胎干细胞，然...

胚胎干细胞介导法(转基因动物培育的途径之一)的主要操作过程是：将外源基因导入胚胎干细胞，然后将转基因的胚胎干细胞注射于受体动物胚胎后可参与宿主的胚胎构成，形成嵌合体，直至达到种系嵌合。下列是实验过程示意图，有关分析不正确的是

A．①的培养基中需加入动物血液，并保持无菌、温度适宜、营养充足

B．与②相比，③的培养基中应加入有筛选作用的物质

C．产生的嵌合体小鼠通过杂交可以获得纯合体转基因小鼠

D．外源DNA导入的ES细胞产生的变异类型属于基因重组

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（12分）胚胎干细胞介导法（转基因动物培育的途径之一），即将外源基因导入胚胎干细胞，然后将转基因的胚胎干细胞注射于受体动物胚胎，参与宿主的胚胎构成，形成嵌合体，直至达到种系嵌合。下图是实验过程示意图，请分析回答下列问题：

（1）胚胎干细胞（ES细胞）体外培养时需要在________条件下进行，由于人们对细胞所需营养物质还没有搞清楚，因此在使用合成培养基培养细胞时需加入________。

（2）图中②表示导入________时期的胚胎。生成嵌合体小鼠④，外源DNA转染的ES细胞产生的变异类型属于________。构建外源DNA分子所用的限制性内切酶、DNA连接酶分别作用于图中的________（a、b）处。

（3）1984年我国第一例转生长激素基因的鱼诞生，但鱼类易于逃逸、扩散，会引起生态安全性问题，试分析原因：。

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转基因动物是指将特定的外源基因导入动物受精卵或胚胎，使之稳定整合于动物的染色体基因组并能遗传给后代的一类动物。目前培育转基因动物的方法主要有显微注射法、反转录病毒感染法等。请回答：

（1）通过显微注射法培育转基因动物是目前最常用且成功率较高的方法，大致过程包括超数排卵、受精、显微注射、胚胎移植和目的基因的表达与检测。超数排卵阶段常用__________激素对供体母畜进行处理以获得更多的卵子；显微注射前要进行冲卵，冲卵是将__________________________________从子宫冲出的操作，冲卵的生理基础是____________________

（2）通过反转录病毒感染法培育转基因动物是借助病毒将目的基因整合于宿主细胞染色体DNA上的方法。这种方法首先要获得基因表达载体，获得基因表达载体必须的工具酶是___________________________，在表达载体中目的基因插入的位置应在________________________之间；表达载体的碱基序列无法由基因表达产物推知，其原因是____________________________________________。

（3）培育转基因动物时，通常选择____________________作为受体细胞，胚胎移植前，要对母畜进行同期发情处理，其目的是_______________________________________________。

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下图是科学家培育某种转基因牛的流程图，a-h为操作过程，下列叙述错误的是

A.b过程采取激素注射等方法对良种母牛作超数排卵处理

B.d过程的外源基因可通过农杆菌转化法导入受精卵

C.e过程培养基需添加动物血清且放在CO2恒温培养箱中培养

D.从受精卵到转基因牛（e-h）过程涉及胚胎体外培养、胚胎分割和胚胎移植等技术

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胚胎干细胞（ES细胞）介导法是转基因动物培育的途径之一，请据下图绿色荧光蛋白老鼠的培育流程回答相关问题：

（1）胚胎干细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞，在形态上，表现为_________，在体外培养的条件下具有__________的特点。

（2）基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤，此过程中常用到的酶是__________。将修饰后的绿色荧光蛋白基因导人ES细胞常采用的方法是__________；培养过程中，ES细胞所需的气体主要有02和C02，其中02是__________，C02用来维持培养液的pH值。

（3）为检测ES细胞的染色体上是否含有绿色荧光蛋白基因，在分子水平上可采用的方法是__________；图中④过程中要将含外源基因的ES细胞导人囊胚的__________。将得到的重组胚胎导入⑤体内，其存活的基础是__________。

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下图表示用显微注射法导入目的基因获得转基因鼠的过程，据图回答。

（1）培育转基因哺乳动物时，与用早期胚胎细胞作受体细胞相比，受精卵的优势是_______

___________________。

（2）受精卵可以从供体母鼠体内获得，也可以通过体外受精获得。

①若受精卵细胞从供体母鼠体内获得，其基本过程是：首先对供体母鼠用促性腺激素进行__________处理，再通过自然交配或___________完成受精，最后从供体母鼠输卵管中获得受精卵细胞。

②若受精卵通过体外受精，基本操作过程包括________________、__________________和受精。

（3）过程Ⅲ表示受精卵经过体外培养，形成早期胚胎，再移植到受体母鼠体内。培养过程中，培养液添加一定量的_________，以防止杂菌污染；可通过________，以便清除代谢产物。

（4）用显微注射技术将目的基因导入受体细胞，需要构建基因表达载体吗？为什么？

_____________________________________________________________________________

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在培育“乳腺生物反应器”的过程中，可能涉及(　　 )

A.导入外源基因 B.诱导细胞融合

C.挑选雌性胚胎 D.胚胎移植

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基因疫苗是指编码外源性抗原的基因导入人和动物体内，让其在宿主细胞中表达抗原蛋白，诱导机体产生免疫应答. 某科研所计划利用基因疫苗，通过基因工程和胚胎工程技术培育具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛. 请回答下列问题：

(1)基因表达载体的构建是基因工程的核心，一个完整的基因表达载体至少包括目的基因，_____________，_____________，标记基因等.

(2)动物基因工程常用的受体细胞是_____________和_____________，因为该细胞的全能性高，一般用_____________法将目的基因导入受体细胞.

(3)欲检测高产奶牛体内是否出现口蹄疫病毒的抗原蛋白，在分子水平上检测的方法及结果是从基因牛中提取_____________，用__________________________杂交，如果出现杂交带，表明奶牛中出现了抗原蛋白，如果不出现杂交带，表明奶牛中未出现抗原蛋白.

(4)胚胎工程最后一道工序是胚胎移植，其实质是__________________________________________.

(5)为提高胚胎的利用率，可以采用胚胎分割技术，应该选用什么样的胚胎进行分割？

_____________________________________________________________________________________.

(6)现已经通过基因工程和胚胎工程技术培育出一头具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛，可以采用_____________技术获得具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛.请简要叙述过程.

_____________________________________________________________________________________.

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【生物一一选修3:现代生物科技专题】基因疫苗是指编码外源性抗原的基因导入人和动物体内，让其在宿主细胞中表达抗原蛋白，诱导机体产生免疫应答。某科研所计划利用基因疫苗，通过基因工程和胚胎工程技术培育具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛。请回答下列问题：

(1)基因表达软体的构建是基因工程的核心，一个完整的基因表达载体至少包括目的基因、_______、标记基因等。

(2)动物基因工程常用的受体细胞是___________，因为该细胞的全能性高，一般用______法将目的基因导入受体细胞。

(3)欲检测高产奶牛体内是否出现口蹄疫病毒的抗原蛋白，在分子水平上检的方法及结果是从转基因牛中提取________，用_______杂交，如果出现杂交带，表明奶牛中出现了抗原蛋白，如果不出现杂交带，表明奶牛中未出现抗原蛋白。

(4)胚胎工程最后一道工序处胚胎移植，其实效是___________ 。

(5)为提高胚胎的利用率，可以采用胚胎分割技术，应该选用什么样的胚胎进行分割___________？

(6)现已经通过基因工程和胚胎工程技术培育出一头具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛，可以采用___________技术获得更多具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛。

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基因疫苗是指将编码外源性抗原的基因导入人和动物体内，让其在宿主细胞中表达抗原蛋白,诱导机体产生免疫应答。某科研所计划采用基因工程和胚胎工程技术培育具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛。请回答下列问题：

（1）基因表达载体的构建是基因工程的核心，一个完整的基因表达载体至少包括启动子、________、________、________。启动子位于基因的________________，有了它才可以驱动基因转录。

（2）制备基因疫苗的基因可以从基因文库中获取，基因文库实际上是含有某种生物不同基因的许多DNA片段的________________群体。

（3）检测高产奶牛体内是否出现口蹄疫病毒的抗原蛋白，在分子水平上的检测方法是________。

（4）胚胎工程最后一道工序的实质是________________________________________。

（5）为提高胚胎的利用率，可以采用胚胎分割技术,应该选用________________的桑椹胚或囊胚进行分割。

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