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[生物一选修1生物技术实践专题]
针对蔬菜废弃物纤维素降解慢的难题，从自然界中采集堆肥、枯树叶等样品进行分离，筛选分解能力较强的纤维素分解菌。回答下列问题：
（1）采集的样品中的纤维素分解菌能产生纤维素酶，该酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即____酶、____酶和葡萄糖苷酶，葡萄糖苷酶可将_____________分解成葡萄糖。
（2）为了确保能够从样品中分离到所需要的微生物，通常可以通过__________增加纤维素分解菌的浓度。配制的培养基按物理性质分属于______培养基，其中碳源为__________,除碳源外，还应有的营养物质有水、氮源、________。
（3）为了分离出分解能力强的纤维素分解菌的单个菌落，用_________法将富含纤维素分解
菌的溶液接种到无色的培养基上，待长出菌落后，覆盖_____溶液，10～15分钟后倒去，再
经过________溶液的处理，15min后倒掉，此时，产生纤维素酶的菌落周围将会出现________。
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[生物——选修1：生物技术实践]
针对蔬菜废弃物纤维素降解慢的难题，从自然界中采集堆肥、枯树叶等样品进行分离，筛选分解能力较强的纤维素分解菌。某研究小组探究了温度对纤维素分解菌分解能力的影响，实验步骤如下：①纤维素分解菌的筛选、分离及纯化→②纤维素分解菌菌株数量的测定→③纤维素酶活力测定和降解滤纸能力的检测。请回答下列问题：
（1）步骤①中，用________法将1 mL菌液逐步稀释成10-6的悬浊液。为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表）：
酵母膏
无机盐
淀粉
纤维素粉
琼脂
CR 溶液
水
培养基甲
+
+
+
+
-
+
+
培养基乙
+
+
+
-
+
+
+
注："+"表示有，"-"表示无。
据表判断，培养基甲_____（填"能"或"不能"）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是________；培养基乙________（填"能"或"不能"）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是____________。某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是____。
（2）对土壤中该类微生物进行计数，则步骤①采用的接种方法是______________。
（3）纤维素酶的测定方法，一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的________进行定量测定的方法。
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对于农作物秸秆的处理手段越来越倾向于添加高效降解微生物进行腐熟堆肥。为了寻求高效降解纤维素的微生物，某科研团队进行了纤维素优势分解菌的筛选实验。主要步骤如下：
①制备培养基。
②纤维素分解菌的分离、纯化。取富集培养后的土样培养液，经适当稀释后，移取培养液各0.1mL分别接种到能分别筛选出细菌、真菌和放线菌的固体培养基上进行分离、纯化培养。
③纤维素分解菌的初筛。将已经纯化的菌株接种到同一个以纤维素为唯一碳源的固体培养基上，使用刚果红染色法，根据培养基平板上透明圈直径（D）与菌落直径（d）比值的大小，初步筛选出纤维素优势分解菌。
回答下列问题：
（1）为了制成固体培养基，除了水、碳源、氮源和无机盐等基本配方以外，培养基中通常还需加入________。微生物吸收的无机盐的作用是_________________________________________________________________（答出两点即可）。
（2）步骤②、③中，若将稀释后且富含多种类型微生物的土样培养液直接涂布于同一个以纤维素为唯一碳源的固体培养基上，可能导致错过优势纤维素分解菌的发现，原因是___________________________。某研究人员将1mL培养液稀释100倍后，在4个平板上分别接入0.1mL的稀释液，经适当培养后，4个平板上的菌落数分别是15、151、155、159，据此可得出1L培养液中的活菌数是__________个。
（3）步骤③中，刚果红可以与纤维素形成______色复合物。接种在培养基上初筛分离得到的4个菌株的观察结果如下表。据表分析，哪号菌株产生的纤维素酶活性最高或其纤维素酶量最大？理由是什么？_______________________________________________
菌株编号
菌落直径d（cm）
透明圈直径D（cm）
D/d
1
0.3
0.9
3.00
2
0.3
0.6
2.00
3
0.3
1.3
4.33
4
0.6
2.0
3.33
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分离筛选降解纤维素能力强的微生物对于解决秸秆等废弃物资源的再利用和环境污染问题具有理论和实际意义。研究人员从土壤和腐烂的秸秆中分离筛选出能高效降解纤维素的菌株，并对筛选出的菌株进行了初步研究。
（1）对培养基进行灭菌的常用方法是 。为在培养基表面形成单个菌落，若以接种环为工具，则用 法进行接种。
（2） 先将样品悬液稀释后涂在放有滤纸条的固体培养基上进行筛选得到初筛菌株。再将初筛菌株接种到以 为唯一碳源的培养基培养2～5天，加入 溶液后，依据出现的颜色反应进行筛选，观察菌落特征并测量 。同时将初筛菌株制备成的菌液放入加有滤纸条的液体培养基中，恒温振荡培养8天，观察滤纸条的破损情况。结果见表。由表可知，8种菌株中1、3、7号菌株产酶能力较强,原因是 。
注: ① DP = （D / d） 2，其中d表示菌落直径（cm） ，D表示水解圈直径（cm）
②“+”为滤纸边缘膨胀， “+ + ”为滤纸整齐膨胀并弯曲，“+ + + ”为滤纸不定形“+ + + +”为成团糊状“+ + + + +” 为半清状
（3） 为进一步研究1、3、7号菌株对秸秆降解的效果。分别用这三种菌株对秸秆进行处理，并在第5天和第10天对秸秆和秸秆中含有的纤维素、半纤维素以及木质素等组分的降解情况进行了测定。结果见下图。
由图分析可知，三种菌株对 的降解最强，与第5天结果相比，第10天秸秆各组分中 的降解率变化最大。整体分析 号菌株的降解效果最好。
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【生物——选修1：生物技术实践】人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃，可用来发酵处理秸秆，提高秸秆的营养价值。为了增强发酵效果，研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株，并对其降解纤维素能力进行了研究。请回答下列问题：
（1）下列操作必需在严格无菌条件下进行的是_______________。
A.称量培养基的各种成分 B.利用平板划线法接种细菌
C.用酒精擦拭双手 D.溶化培养基的各种成分
（2）按功能分，筛选该菌株时所用的培养基称为_____培养基；该培养基中必须添加的成分有___等。
A.琼脂 B.葡萄糖 C.硝酸铵 D.纤维素
（3）此菌株在培养过程中能被利福平（一种抗生素）抑制，下列微生物中也能被利福平抑制的一组是_。
A.硝化细菌 B.手足口病毒 C.自生固氮菌 D.小球藻
（4）刚果红可以与纤维素形成红色复合物,但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。研究人员在刚果红培养基平板上,筛到了几株有透明降解圈的菌落(见下图)。 图中降解圈大小与纤维素酶的_________________有关。初步判断图中降解纤维素能力最强的菌株是________(填图中序号)。
（5）研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株J1和J4,在不同温度和 pH 条件下进行发测得发酵液中酶活性的结果见下图,推测菌株___________更适合用于人工瘤胃发酵,理由是______________。
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【生物一选修1生物技术实践】
传统发酵技术和微生物分离、纯化过程中，无菌操作是微生物接种技术的关键。某实验小组欲从油脂污染的土壤中筛选出能高效降解脂肪的菌株。
（1）在菌株筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以_________为唯一碳源的固体培养基上；随后对培养基采用高压蒸汽灭菌，目的是__________________。
（2）为了筛选出目的菌株，可将适量的_________(试剂）滴加在平板中的菌落周围，洗去浮色后若菌落周围出现________________，则说明此菌株能够降解脂肪。
（3）把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，需利用_____________法进行接种，注意每次操作前均要___________；操作时首尾区______________。
（4）细菌培养产生的单个菌落在生态学中称为_________________；实验结束后，使用过的培养基应该进行____________处理后才能倒掉。
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[生物——选修1:生物技术实践）有些细菌可以分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染，某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题：
（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以_____________为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于_____________培养基。
（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即_____________和_____________。
（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力_______。
（4）通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常采用的灭菌方法有灼烧灭菌、_________和_______。无菌技术要求实验操作应在酒精灯_____________（1分）附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。
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【生物—选修1：生物技术实践】
有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染，某同学欲从污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题：
（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于 培养基。
（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即 和 。
（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力 。
（4）通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、 和 。无菌技术要求实验操作应在 附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。
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当猪粪和小麦秸秆自然堆肥的温度上升到55℃时，实验小组采集样品以获取纤维素高温分解菌。下图表示目的菌的分离过程，请回答下列问题：
在高温堆肥中取样→选择培养→X→将样品接种到鉴别纤维高温分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落
（1）在取样前，对猪粪和小麦秸秆进行高温堆肥的目的是_________。取样后进行选择培养的目的是______________________。
（2）图中X所表示的操作过程为_________，之后需要将样品接种到_______（物理性质）培养基上。
（3）鉴别纤维素高温分解菌的培养基的成分为羧基甲纤维素钠（CMC-Na）12.0g、NaCl 4.0g、NH2PO4 2.0g、MgSO4•7H2O 0.3g、蒸馏水100mL、琼脂、刚果红，pH为7.0～7.4。
①分析培养基的成分可知，该培养基中为纤维素高温分解菌提供碳源的物质是_____________。若要培养霉菌，需要将培养基的pH调至________（填“酸”“碱”或“中”）性。
②鉴别纤维素高温分解菌的原理是纤维素能和刚果红形成一种__________________，而纤维素高温分解菌能产生_____________________将纤维素分解而出现透明圈。
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【选修1：生物技术实践】有些细菌可以分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。请回答：
（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的固体培养基上。从功能上讲，该培养基属于 培养基。
（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即 和 。
（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力 。
（4）通常情况下，在微生物的培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、 和 。无菌技术要求实验操作应在酒精灯 附近进行，以免周围环境中微生物的污染。
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