(10分)大豆花叶病毒(RNA病毒)是世界性大豆病害,是造成大豆减产的重要原因。某科研小组制备了大豆花叶病毒的空衣壳蛋白(CP蛋白),生产过程大致如下,请回答问题:
(1)图中的①是指 。
(2)过程II中应用的酶是 。此过程中,先要在大豆花叶病毒的基文库查找 的核苷酸序列,以便合成特异性引物。
(3)在上述生产流程中, (填序号)是基因工程生产CP衣壳蛋白的核心步骤。为检测样液中是否含有有效成分,在VII可使用 进行检测。
高三生物综合题困难题
(10分)大豆花叶病毒(RNA病毒)是世界性大豆病害,是造成大豆减产的重要原因。某科研小组制备了大豆花叶病毒的空衣壳蛋白(CP蛋白),生产过程大致如下,请回答问题:
(1)图中的①是指 。
(2)过程II中应用的酶是 。此过程中,先要在大豆花叶病毒的基文库查找 的核苷酸序列,以便合成特异性引物。
(3)在上述生产流程中, (填序号)是基因工程生产CP衣壳蛋白的核心步骤。为检测样液中是否含有有效成分,在VII可使用 进行检测。
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大豆花叶病毒(RNA病毒)是世界性大豆病害,是造成大豆减产的重要原因。某科研小组制备了大豆花叶病毒的空衣壳蛋白(CP蛋白),生产过程大致如下,请回答问题:
(1)图中的①是指_______________。
(2)过程II中应用的酶是__________________。此过程中,先要在大豆花叶病毒的基文库查找__的核苷酸序列,以便合成特异性引物。
(3)在上述生产流程中,_________(填序号)是基因工程生产CP衣壳蛋白的核心步骤。为检测样液中是否含有有效成分,在VII可使用_______________进行检测。
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西瓜花叶病毒(WMV)主要侵害西瓜、甜瓜等各种瓜类作物,造成瓜类发病或减产。科研人员利用单克隆技术制备出抗WMV的特异性单抗,并以其为核心建立能快速有效地检测WMV的方法,可用于田间西瓜花叶病毒病的诊断和检测。回答下列问题。
(1)以提纯的WMV病毒作为抗原,对小鼠进行免疫,常用化学诱导剂__________将小鼠的__________和骨髓瘤细胞进行细胞融合。
(2)可利用选择培养基对融合细胞进行初步筛选,需要淘汰的融合细胞为__________。随后将选出的细胞多倍稀释,接种在特定细胞培养板上,使这些单细胞克隆生长,最终选出能稳定分泌__________的杂交瘤细胞。
(3)将选出的杂交瘤细胞注入小鼠腹腔制备单抗腹水,一段时间后收集并纯化腹水,进行抗体效价和类型的测定。也可对克隆的杂交瘤细胞进行____________,更能持久地得到单一的抗体。单抗比一般抗血清优越得多,原因是____________。
(4)抗WMV的单克隆抗体还可作为特异性探针,利用__________方法找出能与探针特异性结合的基因表达产物,进而实现从抗病性强的西瓜植株中获取抗病目的基因,该目的基因能否在其他植物体内稳定存在并遗传的关键是___________。
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黄瓜花叶病毒(CMV)是能侵染多种植物的RNA病毒,可危害番茄的正常生长并造成减产。研究人员通过农杆菌介导将该病毒外壳蛋白的cDNA导入番茄植株中,成功获得抗CMV的番茄植株。
(1)获得CMV的RNA后,需在__________酶的催化下才能合成CMV外壳蛋白的cDNA。
(2)获得cDNA后,需先通过一定方法将其插入到农杆菌Ti质粒的__________片段中,然后将番茄子叶切段与该农杆菌共同培养,以实现对番茄细胞的转化。
(3)将经共同培养后的番茄外植体接种于含有卡那霉素和青霉素的选择培养基上培养一段时间,只有部分外植体生出愈伤组织。研究人员据此确定这些生出愈伤组织的外植体都已成功导入了cDNA,你认为他们做出以上判断的理由是____________________。愈伤组织经__________长出小芽后还需要转入__________诱导生根。
(4)要想确定转基因番茄已经成功表达出CMV外壳蛋白,需要进行__________实验。
(5)研究人员用强致病力的CMV分别感染转基因番茄与__________,通过对照发现转基因番茄具有较好的抗CMV能力。转基因番茄自交,子代中抗性植株与敏感植株数量之比接近3 :1,由此可以得出的结论是____________________;___________________(答出两点)。
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黄瓜花叶病毒(CMV)是能侵染多种植物的RNA病毒,可危害番茄的正常生长并造成减产。研究人员通过农杆菌介导将该病毒外壳蛋白的cDNA导入番茄植株中,成功获得抗CMV的番茄植株。
(1)获得CMV的RNA后,需在___________酶的催化下才能合成CMV外壳蛋白的cDNA。
(2)获得cDNA后,需先通过一定方法将其插入到农杆菌Ti质粒的 ___________片段中,然后将番茄子叶切段与该农杆菌共同培养,以实现对番茄细胞的转化。
(3)将经共同培养后的番茄外植体接种于含有卡那霉素和青霉素的选择培养基上培养一段时间,只有部分外植体生出愈伤组织。研究人员确定这些生出愈伤组织的外植体都已成功导入了cDNA,愈伤组织经___________长出小芽后还需要转入生根培养基诱导生根。
(4)要想确定转基因番茄已经成功表达出CMV外壳蛋白,需要进行___________实验。
(5)研究人员用强致病力的CMV分别感染转基因番茄与___________,通过对照发现转基因番茄具有较好的抗CMV能力。转基因番茄自交,子代中抗性植株与敏感植株数量之比接近3∶1,由此可以得出的结论是___________;(答出两点)。
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黄瓜花叶病毒(CMV)是能侵染多种植物的RNA病毒,可危害番茄的正常生长并造成减产。研究人员通过农杆菌介导将该病毒外壳蛋白的cDNA导入番茄植株中,成功获得抗CMV的番茄植株。
(1)获得CMV的RNA后,在__________的催化下才能合成CMV外壳蛋白的cDNA。
(2)获得cDNA后,需先通过一定方法将其插入到农杆菌的__________片段中,然后将番茄子叶切段与该农杆菌共同培养,以实现对番茄细胞的转化。
(3)将经共同培养后的番茄外植体接种于含有卡那霉素和青霉素的选择培养基上培养一段时间,只有部分外植体生出愈伤组织。研究人员据此确定这些生出愈伤组织的外植体都已成功导入了cDNA,你认为他们做出以上判断的理由是_________________。
(4)要想确定转基因番茄已经成功表达出CMV外壳蛋白,需要进行____________实验。
(5)若要验证转基因番茄具有较好的抗CMV能力,请写出实验设计思路__________。转基因番茄自交,子代中抗性植株与敏感植株数量之比接近3 :1,由此可以得出的结论是_________(答出两点)。
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绞股蓝叶片对TMV (烟草花叶病毒)具有抗感染能力,原因是其细胞中含有抗TMV 基因,可以合成一种抗TMV蛋白.烟草是有重要经济价值的双子叶植物,由于TMV的感染会导致大幅度减产。研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV的烟草,主要流程如图所示。
(1)理论上,基因组文库含有该生物的_____基因。
(2)科学家从绞股蓝细胞中提取抗TMV 基因转录的RNA,然后合成目的基因。图中①过程表示_____,获得的目的基因必须在两侧添加____和_____。
(3)④过程将重组Ti 质粒导入烟草体细胞的常用方法是_________。
(4)由图分析,在过程③构建的重组Ti 质粒上应该含有的标记基因是_____基因。
(5)过程⑥可采取________的方法来检测植株是否合成了抗TMV蛋白。在个体水平的鉴定过程中,可通过________的方法来确定植株是否具有抗性。
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绞股蓝叶片对TMV (烟草花叶病毒)具有抗感染能力,原因是其细胞中含有抗TMV 基因,可以合成一种抗TMV蛋白。烟草是有重要经济价值的双子叶植物,由于TMV的感染会导致大幅度减产。研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV的烟草,主要流程如下图所示。
(1)理论上,基因组文库含有生物的________________基因;而cDNA 文库中含有生物的___________基因。
(2)科学家从绞股蓝细胞中提取抗TMV 基因转录的RNA,然后合成目的基因。图中①过程表示___,获得的目的基因必须在两侧添加__________和__________。
(3)④过程将重组Ti 质粒导入烟草体细胞的常用方法是________________。
(4)由图分析,在过程③构建的重组Ti 质粒上应该含有的标记基因是__________基因。
(5)在过程⑤培养基中除含有卡那霉素及植物必需的各种营养成分外,还必须添加__________以保证受体细胞能培养成再生植株。
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大豆疫霉根腐病和大豆灰斑病也是一种世界性病害,病原菌侵染大豆的叶和茎,形成蛙眼状病斑,影响光合作用,产量降低。我国科研工作者釆用多基因联合导入策略,将抗真菌病基因几丁质酶(chi)基因和核糖体失活蛋白(rip)基因导入到大豆细胞中培育出抗病大豆。据此回答下列问题:
(1)培育抗病大豆第一步是获取目的基因(chi基因和rip基因)。科研工作者常从___________中获取了chi基因和rip基因。获取目的基因后,常用PCR技术扩增,其原理是___________。
(2)构建表达载体时需用到限制酶,酶切后可能产生粘性末端和平末端,而平末端的连接效率比较低,其原因除了平末端连接过程中只有连接酶的作用外还缺乏___________。
(3)培育抗病大豆第三步将表达载体导入大豆(双子叶植物)细胞,该过程常用的方法是___________。检验目的基因导入成功与否的指标之一:是否翻译出蛋白质,其检测方法是___________。
(4)常规转化筛选方法得到的植株多为植株嵌合体(既有转基因细胞又有常规细胞的植株)较多,为得到纯合的转基因植株,科研工作者将植株嵌合体的根尖或者芽尖剪碎,用___________去掉细胞壁,分散成单个原生质体,显微镜下取去壁单个原生质体进行组织培养,得到组培苗,移栽后再筛选得到的抗病大豆植株即为纯合的转基因植株。
(5)基因工程除了在植物培育、药物开发等方面具有广阔的前景,动物基因工程在___________等方面也具有广阔的前景。
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下图是制备抗埃博拉病毒(EBoV)VP40蛋白单克隆抗体的过程。请据图回答:
(1)埃博拉病毒(EBOV)的遗传物质是RNA,EBOV病毒容易变异的原因是____________。
(2)科研人员利用小鼠的B淋巴细胞与鼠的瘤细胞进行杂交,获得纯净的单一品种抗体,其特点是_________________,可以用此抗体与放射性同位素、化学药物或细胞毒素相结合,制成“_______________ ”,抗击埃博拉病毒(EBOV)。
(3)利用PCR获取目的基因的过程中,反应体系内要加入含有VP40基因的DNA、dNTP、Taq酶和根据________________________合成的引物。
(4)选用EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切的优点是 ___________________________ ;VP40基因进入大肠杆菌细胞,并在大肠杆菌内维持稳定和表达,该过程可称为_____________。
(5)过程⑥常用的不同于植物原生质体融合的促融方法是用_________________处理。
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