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尼古丁是一种化学物质，该物质对人类有致畸、致癌等毒副作用。下图是从工业废水中筛选出能降解尼古丁的假单胞杆菌的操作流程图。请回答下列相关问题：
（1）培养基中要有满足微生物生长繁殖所需要的___________等营养物质。制备平板培养基与稀释用的培养基主要的区别在于制备平板培养基时，其中需要添加___________。
（2）选择培养时应使用选择培养基，目的是使该培养基利于__________________的生长繁殖。对选择培养后得到的样液进行稀释操作的具体过程是：①将分别盛有9mL水的5支试管苗菌，并按101—105的顺序编号；②______________________。③重复第②步的混匀操作，依次类推，直到完成最后一支试管的稀释。
（3）取105倍的稀释样液0.1mL均匀涂布到平板上，然后在适宜条件下进行培养，在培养时需要将培养皿倒置，原因是____________________；经过一段时间培养，3个平板上的菌落数分别为42、52和68，则每升样液中所含有的假单孢杆菌活菌数量为__________个，这一统计结果一般比实际活菌数__________（填“偏小”“偏大”或“相等”）。
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甲醛是一种来源广泛的挥发性有机污染物，具有强烈的致癌和致畸作用，可利用微生物降解甲醛来治理甲醛污染，具有高效、环保、无二次污染等优点。如图甲是采集活性污泥作为优良菌源，通过筛选分离出能以甲醛为唯一碳源的高效降解菌的实验过程。分析回答下列问题：
（1）上述实验材料中，不需要进行灭菌处理的是___________，培养基灭菌的常用方法是____________。该实验③过程所用的选择培养基只能以甲醛作为唯一的碳源，其原因是____________________。
（2）由③→④的分离活性污泥中的细菌的接种方法（如图乙）为______________法，接种时，对接种环应采用______________方法进行灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次划线的末端开始，这样做的原因是_____________________________________________________________________。
（3）为研究甲醛初始浓度对菌株降解能力的影响，进行了相应实验。当甲醛的初始浓度小于1200mg/L时，菌株可以完全降解甲醛：当甲醛的初始浓度增高至1600mg/L时，48小时后菌株对甲醛的降解能力很弱，甚至失去降解能力，其原因可能是___________________________________。
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(7分)现有甲、乙两种可能有一定致畸、致癌作用的化学物质，利用动物细胞培养的方法能够鉴定它们是否有毒性，并比较二者毒性的强弱。请完成下列实验报告：
Ⅰ.实验材料：小白鼠胚胎。
Ⅱ.药品用具：胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、细胞培养箱、载玻片、盖玻片、光学显微镜、小白鼠正常体细胞有丝分裂高倍显微镜照片。
Ⅲ.实验原理： 。
根据这些变异细胞占全部培养细胞的百分数(以下称Q值)，可判断该化学物质的毒性。
Ⅳ.实验步骤：
(1)制备细胞悬浮液：
把小白鼠胚胎进行处理离散成单个细胞后，加入动物细胞培养液，制成细胞悬浮液。
（2）进行细胞培养：
①取A、B、C三个洁净的培养瓶，分别加入等量的细胞悬浮液。
② ________。
③C瓶不作处理，作为对照。
把三个培养瓶放在37℃(或适宜温度)的细胞培养箱中培养
（3）制作临时装片：
①当细胞繁殖到大约第8代左右时，同时取出三个培养瓶，用胰蛋白酶液处理，使细胞从瓶壁上脱落，加入动物细胞固定液杀死细胞并固定其分裂相。
②静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的悬浮液。滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央，加1～2滴适宜浓度的 ________染色，3～5min后，盖上盖玻片，制成临时装片。
（4）镜检和统计：把临时装片放在显微镜下，按照 ________的顺序观察，寻找处于有丝分裂 ________期的细胞，观察其染色体，并与小白鼠正常体细胞有丝分裂高倍显微镜照片对比以确认发生上述变异的细胞，同时统计该期变异的细胞占该细胞总数的百分数(Q值)。
V.实验结果：
| 培养瓶 | A | B | C |
| Q值 | 1.3％ | 12.5％ | 0.1％ |
VI.实验结论： ________（2分）。
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现有甲、乙两种可能有一定致畸、致癌作用的化学物质，利用动物细胞培养的方法能够鉴定它们是否有毒性，并比较二者毒性的强弱：请完成下列实验报告。
I．实验材料：小白鼠胚胎。
Ⅱ．药品用具：胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、细胞培养箱、载玻片、盖玻片、光学显微镜、小白鼠正常体细胞有丝分裂高倍显微镜照片。
Ⅲ．实验原理：________，根据这些变异细胞占全部培养细胞的百分数（以下称Q值），可判断该化学物质的毒性。
Ⅳ．实验步骤：
（1）制备细胞悬液：把小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎，转入锥形瓶中，加人胰蛋白酶液处理，使胚胎组织离散成单个细胞，再加入动物细胞培养液，制成细胞悬液。
（2）进行细胞培养：
①取A、B、C三个洁净的培养瓶，________。
②________。
③。
（3）制作临时装片：
①当细胞繁殖到大约第8代左右时，同时从细胞培养箱中取出三个培养瓶，用胰蛋白酶液处理，使培养的细胞从瓶壁上脱落，再加入动物细胞固定液迅速杀死细胞，将细胞固定在不同的分裂时期。
②静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬液。滴在与培养瓶有相同编号的载玻片中央，加1—2滴一定浓度的________染色，3—5 min后，盖上盖玻片，制成临时装片。
（4）镜检和统计：把临时装片放在显微镜下，寻找处于有丝分裂中期的细胞，并与________对比以确认发生上述变异的细胞，同时统计该期变异的细胞占细胞总数的百分数（Q值）。
V．实验结果：
| 培养瓶 | A | B | C |
| Q值 | 1.3% | 12.5% | 0.1% |
Ⅵ．实验结论：________。
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（14分）现有甲乙两种可能有一定致畸、致癌作用的化学物质，实验室研究人员欲通过动物细胞培养的方法来鉴定它们是否有毒性，并比较二者毒性的强弱。请你以一个研究人员的身份参与此项研究，完成下列实验报告，并回答有关问题。
Ⅰ.实验材料：活的小白鼠胚胎。
Ⅱ.药品用具：胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、光学显微镜、小白鼠正常体细胞有丝分裂高倍显微镜照片。
Ⅲ.实验原理： ___________，根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数（以下称Q值），可判断该化学物质的毒性。
Ⅳ.实验步骤：
（1）制备细胞悬浮液：
把活的小白鼠胚胎放入在培养皿中剪碎，转入锥形瓶中，加入胰蛋白酶液处理，使胚胎组织离散成单个细胞，再加入动物细胞培养液，制成细胞悬浮液。
（2）进行细胞培养：
①取A、B、C三个洁净的培养瓶，__________ ___________。
②向A、B两培养瓶中分别加入等量的化学物质甲、乙，并将培养瓶摇匀。C瓶不作处理，作为对照。
③_________________ 。
（3）制作临时装片：
①当细胞繁殖到大约第8代左右时，同时从恒温箱中取出三个培养瓶，用胰蛋白酶液处理， 使培养的细胞从瓶壁上脱落，再加入动物细胞固定液以迅速杀死细胞并固定细胞分裂相。
②静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的悬浮液。滴在与培养瓶有相同编号的 载玻片的中央，___________ __，3～5min后，盖上盖玻片，制成临时装片。
（4）镜检和统计：
把临时装片放在显微镜下，先用低倍镜后用高倍镜，寻找处于_________ 期的细胞，并与______________ __对比以确认发生上述变异的细胞，同时统计该期变异的细胞占该细胞总数的百分数（Q值）。
V.结果与结论：
经研究人员实验得知，A、B、C三个培养瓶的Q值依次为：QA=1.3％、QB=12.5％、QC=0.1％，由此可知该实验的结论是____________________________________________。
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甲醛是一种来源广泛的挥发性有机污染物，具有强烈的致癌和促癌作用，利用微生物降解甲醛来治理甲醛污染，具有高效、环保、无二次污染等优点。下图甲为采集活性污泥作为优良菌源。通过驯化分离筛选出能以甲醛为唯一碳源和能源的高效降解菌的实验过程。请分析回答：
(1)实验中震荡的目的是________，③过程获得了以甲醛为唯一碳源的细菌，所加的甲醛的作用是 和 。上述实验材料中，不需要进行灭菌处理的是 ，培养基灭菌的常用方法为 。
(2)由③→④的接种方法为平板划线法如图乙所示，此处通过接种环在无机固体培养基表面连续划线，操作的目的是将聚集的菌种逐步_________到培养基的表面，通过培养能获得单个菌落。图乙表示在平板培养基上的第一次和第二次划线，请在图丙中画出第三次划线；划线后在恒温培养箱中培养时，培养皿倒置的原因是 。
(3)为研究甲醛初始浓度对菌株降解甲醛能力的影响，进行了相应实验。当甲醛的初始浓度小于1200 mg／L时，菌株可以完全降解甲醛；当甲醛的初始浓度增高至1600 mg／L时，48小时后菌株对甲醛的降解能力很弱，甚至失去降解能力，其原因可能是 。为了使该实验所得结果准确可靠，还应该设置 的对照实验，以排除甲醛自然挥发对实验结果的干扰。
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“苏丹红I号”事件再次引起人类思考食品的安全性问题，苏丹红染色剂的降解产物可使人体致癌，从变异的来源看这属于（ ）
A.化学致癌因子 B．生物致癌因子 C．基因突变 D.基因重组
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回答下列（一）、（二）小题
（一）自生固氮菌是一类能独立固定氮气的细菌，其中有些好氧种类能产生 PHB（一种生物可降解的热塑性塑料）。现欲从活性污泥中分离、纯化、筛选出高产 PHB 的固氮菌，操作流程如下：采集土样→富集培养→分离、纯化培养→初步筛选 PHB 固氮菌→筛选高产 PHB 固氮菌→保存备用。请回答：
（1）富集培养时，为达到筛选自生固氮菌的目的，在配制培养液时不应添加________ 。培养时要将装有培养液的锥形瓶放置在__________上振荡培养，主要目的是为细菌的生长提供 ____________。
（2）用于筛选高表达量菌株的方法之一是经涂布分离获得______。涂布分离时用_______ 将菌液均匀涂布在培养基上，此时所使用的培养基与富集培养时有所不同，添加了一定量的_____________。
（3）在纯化过程中，在固体培养基上划线时，下列操作正确的是__________。
A．接种环采用 70%酒精灭菌
B．接种时应在酒精灯火焰附近进行
C．划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连
D．划线分离时，需要把接种环深入到培养基中进行接种
（二）毛角蛋白11型中间丝（KIF II）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关，获得转KIF II基因的高绒质绒山羊的简单流程如图：
（1）转基因过程用到的工具酶有_______________和____________。
（2）在过程②中，用________处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。由于人们对动物细胞所猫营养物质还没有完全搞清楚，因此在培养细胞时需在培养液中加入一定量的_________，在培养过程中，应将培养瓶宜于__________中培养。
（3）若要获得多只相同的转基因山羊，可对图中早期胚胎进行_________后进行胚胎移植。
（4）下列有关墓因工程的叙述，正确的是___________。
A．切割目的基因和载体DNA时为获得相同的枯性末端，必须用相同的限制性核酸内切酶
B．基因工程的原理是基因重组，其核心是上图中的过程④
C．图示过程获得的转基因绒山羊并不是克隆动物
D．重组表达载体上含有RNA聚合的的识别结合位点
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下列关于泡菜制作的有关叙述，正确的是
A. 泡菜制作需要配制盐水，其中盐与清水的质量比为4：1
B. 泡菜中的亚硝酸盐具有致癌作用，对动物具有致畸和致突变作用
C. 泡菜制作时可以加入少许“陈泡菜水”，目的是加入乳酸菌菌种
D. 泡菜腌制时间长短会影响亚硝酸盐含量，但温度和食盐的用量不影响
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下列关于生物工程的叙述中，不正确的是（ ）
A.动物细胞培养可用于检测污水中致癌或致畸物质的毒性
B.标记基因可用于检测目的基因是否已导入受体细胞
C.选择培养基可用于筛选单克隆杂交瘤细胞
D.DNA探针可用于检测白化病和女性性腺发育不良