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大肠埃希菌，俗称大肠杆菌。是人和动物肠道中的正常栖居菌。自来水一旦被它污染，就有可能引发肠道传染病，甚至流行病。因此，必须对自来水进行严格的检测，以确保饮水安全。我国规定1000ml自来水中的大肠杆菌数不得超过3个。某同学欲对家中自来水中大肠杆菌含量是否达标，对饮用水中大肠杆菌进行了培养、计数和鉴定。回答下列问题：
（1）实验前应进行无菌处理。将漏斗、培养皿、三角瓶和镊子等进行_________________灭菌。培养基进行_________________灭菌。对自来水龙头进行___________________灭菌。
（2）为测定大肠杆菌的数目，将已知____________的水过滤后，将滤膜放在培养基上培养，注意滤膜与培养基完全贴紧，不能有_______。可根据培养基上___________________的数目，计算出水样中大肠杆菌的数目。（取三份样品求平均值）
（3）为了鉴定大肠杆菌，在培养基中应加入__________________。在该培养基上，大肠杆菌的菌落呈现________________色。
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大肠埃希菌，俗称大肠杆菌。是人和动物肠道中的正常栖居菌。自来水一旦被它污染，就有可能引发肠道传染病，甚至流行病。因此，必须对自来水进行严格的检测，以确保饮水安全。我国规定1000ml自来水中的大肠杆菌数不得超过3个。某同学欲对家中自来水中大肠杆菌含量是否达标，对饮用水中大肠杆菌进行了培养、计数和鉴定。回答下列问题：
（1）实验前应进行无菌处理。将漏斗、培养皿、三角瓶和镊子等进行_________________灭菌。培养基进行_________________灭菌。对自来水龙头进行___________________灭菌。
（2）为测定大肠杆菌的数目，将已知____________的水过滤后，将滤膜放在培养基上培养，注意滤膜与培养基完全贴紧，不能有_______。可根据培养基上___________________的数目，计算出水样中大肠杆菌的数目。（取三份样品求平均值）
（3）为了鉴定大肠杆菌，在培养基中应加入__________________。在该培养基上，大肠杆菌的菌落呈现________________色。
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大肠杆菌是人和许多动物肠道中最主要且数量最多的一类细菌，含有2000种以上的蛋白质；大肠杆菌的数量是检测自来水是否受粪便污染的最直接的指标。
回答下列问题：
(1)利用凝胶色谱法分离提取到的部分大肠杆菌蛋白质时，等样品完全进入凝胶层后，加入pH为7.0、浓度为20mmOl/L的________到适当高度进行洗脱，结果甲蛋白质先洗脱出来，乙蛋白质后洗脱出来，则相对分子质量较大的是______________蛋白质。
(2)通过滤膜法可以测定自来水中大肠杆菌的数目：一定体积的自来水样过滤后，将滤 膜放在伊红-美蓝培养基（主要成分包括：蛋白胨、NaCl、琼脂、乳糖、伊红和美蓝水溶液）上培养，大肠杆菌的代谢产物能与伊红-美蓝反应，使菌落呈黑色。根据培养基上菌落的数目，计算出大肠杆菌的数量。
①伊红-美蓝培养基属于_____(填“选择”或“鉴别”)培养基，蛋白胨的作用有_____(答出两点即可）。
②培养大肠杆菌时，在接种前通常需要检测固体培养基是否被污染，检测方法是______。
③用滤膜法进行测定时，滤膜的孔径应 _______(填“大于”或“小于”）大肠杆菌。滤膜法是根据培养基上菌落的数目来推测样品中的活菌数，其原理是___。
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大肠杆菌是人和许多动物肠道中最主要且数量最多的一类细菌，含有2000种以上的蛋白质；大肠杆菌的数量是检测自来水是否受粪便污染的最直接的指标。
回答下列问题：
(1)利用凝胶色谱法分离提取到的部分大肠杆菌蛋白质时，等样品完全进入凝胶层后，加入pH为7.0、浓度为20mmol/L的_____到适当高度进行洗脱，结果甲蛋白质先洗脱出来，乙蛋白质后洗脱出来，则相对分子质量较大的是_____。
(2)通过滤膜法可以测定自来水中大肠杆菌的数目：一定体积的自来水样过滤后，将滤膜放在伊红-美蓝培养基（主要成分包括：蛋白胨、NaCl、琼脂、乳糖、伊红-美蓝水溶液）上培养，大肠杆菌的代谢产物能与伊红-美蓝反应，使菌落呈黑色。根据培养基上菌落的数目，计算出大肠杆菌的数量。
①伊红-美蓝培养基属于_____ (填“选择”或“鉴别”)培养基，蛋白胨的作用有_____ (答出两点即可）。
②培养大肠杆菌时，在接种前通常需要检测固体培养基是否被污染，检测方法是_____。
③用滤膜法进行测定时，滤膜的孔径应 _____ (填“大于”或“小于”）大肠杆菌。滤膜法是根据培养基上菌落的数目来推测样品中的活菌数，其原理是________。
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大肠杆菌是人和许多动物肠道中最主要且数量最多的一类细菌，含有2000种以上的蛋白质；大肠杆菌的数量是检测自来水是否受粪便污染的最直接的指标。回答下列问题：
（1）利用凝胶色谱法分离提取到的部分大肠杆菌蛋白质时，等样品完全进入凝胶层后，加入pH为7．0、浓度为20mmol/L的_______________到适当高度进行洗脱，结果甲蛋白质先洗脱出来，乙蛋白质后洗脱出来，则相对分子质量较大的是_______蛋白质。
（2）装填凝胶色谱柱时，色谱柱内不能有气泡存在，原因是____________________________。
（3）通过滤膜法可以测定自来水中大肠杆菌的数目：一定体积的自来水样过滤后，将滤膜放在伊红-美蓝培养基（主要成分包括：蛋白胨、NaCl、琼脂、乳糖、伊红美蓝水溶液）上培养，大肠杆菌的代谢产物能与伊红-美蓝反应，使菌落呈黑色。根据培养基上菌落的数目，计算出大肠杆菌的数量。
①伊红-美蓝培养基属于_____（填“选择”或“鉴别”）培养基，蛋白胨的作用_______________。
②在微生物培养过程中，常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和_____________。
③某研究小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是_____；
④滤膜法是根据培养基上菌落的数目来推测样品中的活菌数，其原理是______。
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大肠杆菌是人和许多动物肠道中最主要且数量最多的一类细菌，含有2000种以上的蛋白质；大肠杆菌的数量是检测自来水是否受粪便污染的最直接的指标。回答下列问题：
（1）利用凝胶色谱法分离提取到的部分大肠杆菌蛋白质时，等样品完全进入凝胶层后，加入pH为7.0、浓度为20mmol/L的___________ 到适当高度进行洗脱，结果甲蛋白质先洗脱出来，乙蛋白质后洗脱出来，则相对分子质量较大的是_____蛋白质。
（2）通过滤膜法可以测定自来水中大肠杆菌的数目：一定体积的自来水样过滤后，将滤膜放在伊红-美蓝培养基（主要成分包括：蛋白胨、NaCl、琼脂、乳糖、伊红和美蓝水溶液）上培养，大肠杆菌的代谢产物能与伊红-美蓝反应，使菌落呈黑色。根据培养基上菌落的数目，计算出大肠杆菌的数量。
①伊红-美蓝培养基属于____（填“选择”或“鉴别”）培养基，蛋白胨的作用有 _________。
②在微生物培养过程中，常用的灭菌方法有灼烧灭菌、________和高压蒸汽灭菌。配制伊红-美蓝培养基时，乳糖需要单独在压力为70kPa，温度为115℃灭菌20min，原因是__________。接种前通常需要检测固体培养基是否灭菌合格，检测方法是___________。
③滤膜法是根据培养基上菌落的数目来推测样品中的活菌数，其原理是_______________。
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大肠杆菌含有 2000 种以上的蛋白质，是人和许多动物肠道中最主要且数量最多的一类细菌，大肠杆菌的数量是检测自来水是否受粪便污染的最直接的指标。回答下列问题：
(1)在微生物培养过程中，常用的灭菌方法有______。
(2)通过滤膜法（自来水过滤后的滤膜置于伊红-美蓝培养基中，再进行计数）可以测定自来水中大肠杆菌的数目，伊红-美蓝培养基的主要成分包括：蛋白胨、NaCl、琼脂、乳糖、伊红和美蓝水溶液，蛋白胨的作用有___________。（写两点），这种测定方法的主要原理是______，在实验接种前通常需要检测固体培养基______ （填是否）灭菌合格。
(3)大肠杆菌在_______中合成蛋白质，利用______分离提取到的部分大肠杆菌蛋白质。
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［生物—选修1：生物技术实践］（15分）大肠杆菌是人和许多动物肠道中的主要细菌，若水中大肠杆菌超标，说明水源可能被粪便污染。伊红美蓝培养基可用于检测水中大肠杆菌的数量。回答下列问题：
（1）伊红美蓝培养基含有大肠杆菌生长繁殖必须的 四类营养物质，大肠杆菌的代谢产物会和伊红、美蓝发生反应，使菌落呈现 色。伊红美蓝培养基属于 （填“选择”或“鉴别”）培养基。
（2）某水样的大肠杆菌严重超标，需采用稀释涂布平板法统计样品中活菌数。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的 。一般选择菌落数在 的平板进行计数，这样统计的菌落数 （填“大于”、“等于”或“小于”）活菌的实际数目。
（3）用大剂量紫外线照射大肠杆菌，获得了变异菌株，这种变异来源于 。利用平板划线法对该变异菌株进行纯化，在第二次以及其后的划线操作时，菌体来自 。
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大肠杆菌是寄生于人和动物肠道中的细菌，其代谢产物能与染料伊红美蓝反应，使菌落呈黑色。某生物科技小组的同学拟对某地严重污染的水体中细菌种类、大肠杆菌数目进行调查，实验及流程如下：
实验一：滤膜法测定大肠杆菌数目：
用滤膜过滤待测水样→水样中的细菌留在滤膜上→将滤膜转移到伊红美蓝培养基（EMB培养基）上培养→统计菌落数目。
实验二：大肠杆菌的培养和分离：
配制培养基→灭菌→扩大培养→划线分离和培养→菌种保存。
回答下列问题：
（1）实验一中，过滤待测水样需要用到滤杯、滤膜和滤瓶，通过________方法进行灭菌处理。统计大肠杆菌菌落时应选择颜色为________的菌落进行计数。
（2）实验二中，“划线分离和培养”前应对样品进行________，这样，“划线分离和培养”过程后，一个菌体便会形成一个________，这种分离方法是纯化菌种的常用方法。
（3）实验一和实验二中均用到固体培养基，配制培养基过程中，除了加入特定的营养物质以外，还要加入一定量的氯化钠，以维持培养基的________。获得纯净培养物的关键是________，所以对所用培养基均需进行灭菌处理，为检测灭菌是否彻底，应进行的操作是________________________；一般对所需菌种长期保存可采用________的方法。
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（12分）大肠杆菌是人和动物肠道中普遍存在的一种兼性厌氧菌，在无氧条件下，大肠杆菌通过发酵能将葡萄糖转变为多种有机酸并产生CO2等气体。某研究机构使用“滤膜法”对受污染的河流水体进行了大肠杆菌活菌数目的测定。请回答：
（1）研究人员向葡萄糖蛋白胨培养液中加入适量的溴麝香草酚蓝水条件下培养一段时间后可观察到溶液颜色的变化为 ，并且在倒置的小管中出现 。
（2）测定大肠杆菌活菌数目时，需制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，该培养基中为细菌提供氮源的物质是 。为了鉴别大肠杆菌菌落，可向培养基中加入 作为指示剂。
（3）为了便于统计污染严重的水体中活菌的数目，需将水样进行适当稀释，例如取水样1mL加入无菌水 mL制备稀释倍数为102的稀释液，并照此依次制备更高倍数的稀释液。每个稀释们数的菌液取10mL进行过滤，然后将滤膜放置在培养基上。为了防止杂菌污染，稀释、过滤和旋转滤膜等操作都应该在 附近进行。
（4）将放有滤膜的平板置于适宜条件下培养，每隔12h统计一次菌落数目，应选取菌落数目 时的记录作为结果。如果经过培养后稀释倍数为102的4个平板上菌落数分别为43、47、42、48，那么每升河水中约含大砀杆菌 个。用这种方法测定的细菌数量比实际活菌数量要少，这是因为 。
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