图为培育转基因山羊生产人β-酪蛋白的流程图下列叙述正确的是A.过程①所用的人β-酪蛋白基因...

图为培育转基因山羊生产人β-酪蛋白的流程图

下列叙述正确的是（ ）

A.过程①所用的人β-酪蛋白基因可从人cDNA文库中获得

B.过程②可选用囊胚期或原肠胚期的胚胎进行移植

C.过程③可使用胚胎分割技术扩大转基因山羊群体

D.过程④人β-酪蛋白基因在细胞质内进行转录、翻译

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下图为培育转基因山羊生产人β-酪蛋白的流程图。请回答下列问题：

（1）过程①为基因工程中的　　　　　　　　　 ，人β-酪蛋白基因为　　　　　　　　 ，可从基因文库中获取，基因文库包括　　　　　　　　　 。

（2）过程②指的是胚胎移植过程，一般选取　　 的胚胎进行胚胎移植，不选用原肠胚时期。

（3）过程③为加速转基因动物的繁育，可以采用　　　　　　　　 、 　　　　　　　 等方法。

（4）过程④指的是目的基因的表达，包括　　　　　　　　　　　　 两个阶段，在分子水平上检测目的基因是否在转基因山羊体内成功表达的方法是　　　　　　　　　　　　 。

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乳铁蛋白是一种糖蛋白，其具有广谱抗菌、抗病毒感染的作用。科研人员将人乳铁蛋白基因通过载体转入山羊ES细胞，最终成功培育出能产生人乳铁蛋白的转基因山羊。回答下列问题：

（1）利用PCR技术从cDNA文库中获取乳铁蛋白基因（基因序列未知），需根据乳铁蛋白氨基酸序列设计引物，引物的序列可以有多种，原因是__________________。在PCR体系中需加入其中的_________（填“全部”、“任意1种”或“其中2种”）引物。

（2）山羊ES细胞可从囊胚的____________分离获得。从功能上看，该细胞具有____________。

（3）将人乳铁蛋白基因导入山羊ES细胞常用____________法。转化成功的ES细胞，体外培养过程中，通入CO2气体的目的是________________________。

（4）经鉴定，某转基因山羊产生的配子中有一半带有外源基因，请写出利用该山羊培育纯合转基因山羊的思路______________________________________________________。

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干扰素是一种重要的免疫活性物质，具有抗病毒、调节免疫等功效。研究人员利用基因工程通过培育山羊乳腺生物反应器大量生产干扰素。请回答下列问题：

（1）基因工程获取的人干扰素基因一般来自cDNA文库，cDNA中______________（填“有”或没有”）启动子。获取的目的基因可通过______________大量扩增，扩增需要的条件有_______________。（至少答出3项）

（2）重组人干扰素基因表达载体由山羊酪蛋白基因启动子，人干扰素基因，标记基因和终止等组成，其中______________决定了人干扰素基因只能在山羊乳腺细胞中特异性表达，将该重组表达载体导入受体细胞一般采用____________________________。

（3）一般需要将重组人干扰素基因表达载体导入______________（填“雄性”或“雌性”）胚胎细胞中。在转基因羊发育成熟时，为了检测羊奶中是否有人干扰素，可用______________方法。

（4）如果我们采用蛋白质工程来合成人干扰素，可以通过______________，对现有蛋白质进改造，或制造新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需要。

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【生物——选修3　 现代生物科技专题】下图为培育转基因山羊生产人β-酪蛋白的流程图。请回答下列问题。

（1）获取过程①所用的人β-酪蛋白基因时，可先提取人体细胞中的____________，以其作为模板在________________作用下合成______________。

（2）重组人β-酪蛋白基因表达载体中必须有启动子，其是______________识别和结合的部位。

（3）过程②可选用_______________阶段的胚胎进行移植。

（4）过程③可使用___________技术扩大转基因山羊群体。

（5）过程④中的β-酪蛋白基因在细胞内表达的场所为_______________，在分子水平上可通过______________技术检测转基因山羊中是否成功表达出人β-酪蛋白。

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用基因工程技术生产羧酸酯酶(CarE)制剂的流程如图所示。回答下列问题:

(1)①过程所需的酶是_____。从cDNA文库中获取的目的基因______(填“有”或“无”)启动子。实现②过程常用_____技术,该技术的前提是要有_______,以便合成引物。

(2)过程⑧将重组表达载体导入大肠杆菌时,首先用Ca2+处理大肠杆菌,目的是_____。然后将______溶于缓冲液中与该大肠杆菌混合,在一定温度下完成转化。

(3)过程④可利用________技术鉴定CarE基因是否已导入大肠杆菌。

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下图是通过基因工程方法将人表皮细胞生长因子基因（EGF）和TCS基因连接起来，利用小鼠生产人表皮生长因子——天花粉蛋白融合蛋白的过程示意图。请回答：

（1）为了建立含有EGF的cDNA文库，应从健康人体的______细胞中提取总mRNA合成cDNA。从cDNA文库中提取的EGF的长度比从基因组文库中提取的EGF______。

（2）在①过程中，应使用的限制酶是_________，在融合蛋白基因的首端还应插入_____。

（3）将重组质粒导入大肠杆菌前，需先用_________处理大肠杆菌。为了筛选含重组质粒的大肠杆菌，首先置于含有_________的培养基进行培养，获得大量重组质粒后，将其再移到小鼠体内。

（4）乙图表示培育具有人表皮细胞生长因子基因（EGF）和TCS基因融合基因的小鼠的基本过程示意图。①过程涉及细胞间的_________和融合过程，将重组质粒转入到受精卵中采用_________方法，经过②_________和③过程，可获得转基因小鼠。小鼠出生后可以从其尾巴细胞中提取_________分子进行分析，通过_________方法，检测小鼠细胞是否含有人融合基因。

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利用人胰岛B细胞构建cDNA文库，然后通过核酸分子杂交技术从中筛选目的基因，筛选过程如下图所示。下列说法错误的是

A. cDNA文库的构建需要用到逆转录酶

B. 图中的菌落是通过稀释涂布法获得的

C. 核酸分子杂交的原理是碱基互补配对

D. 从该文库中可筛选到胰高血糖素基因

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培育转基因奶牛生产人血清白蛋白的主要步骤如下：

（1）提取目的基因：人血清白蛋白基因可以从基因文库中提取，含有人所有基因的文库称为___________,获得人血清白蛋白基因后可利用__________技术进行扩增。

（2）构建基因表达栽体：构建人血清白蛋白基因表达栽体时，质粒和目的基因分别用__________处理后，其重组类型有三种，可根据重组DNA分子的___________________不同，筛选出含目的基因的重组质粒。

（3）把目的基因导入受体细胞：利用__________________技术将基因表达载体导入牛的____________并进行早期培养。

（4）早期胚胎培养和胚胎移植：早期胚胎培养到桑椹胚或囊胚时，可通过___________技术增加胚胎的数量，移植前需要取胚胎的______________细胞进行性别鉴定，移植后需要对受体母牛进行妊娠检査。

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【生物——选修3：现代生物科技专题】

屠呦呦获得诺贝尔生理学奖后，最新研究表明，青蒿素还可用于糖尿病的治疗。研究人员利用基因工程培育出高产的转基因青蒿。

（1）青蒿的cDNA文库，是以从青蒿细胞中提取的_____________为模板，通过_____________（方法）建立，该文库中的基因_____________（填“含有”或“不含有”）启动子。

（2）基因工程操作的核心步骤是__________。若选择的限制酶切出的DNA片段是平末端，应选择__________进行连接。

（3）目的基因的大量扩增可以采用____________技术，该技术的原理是____________，该技术中需使用一种特殊的酶是____________。

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