(14分)胰岛素 A、B 链分别表达法是生产胰岛素的方法之一。 图 1 是该方法所用的基因表达载体,图2 表示利用大肠杆菌作为工程菌生产人胰岛素的基本流程(融合蛋白A、B 分别表示-半乳糖苷酶与胰岛素 A、B链融合的蛋白)。 请回答下列问题:
(1)图1 基因表达载体中没有标注出来的基本结构是 。
(2)图1 中启动子是 酶识别和结合的部位,有了它才能启动目的基因的表达;氨苄青霉素抗性基因的作用是 。
(3)构建基因表达载体时必需的工具酶有 。
(4) β-半乳糖苷酶与胰岛素A 链或B 链融合表达,可将胰岛素肽链上蛋白酶的切割位点隐藏在内部,其意义在于 。
(5)溴化氰能切断肽链中甲硫氨酸羧基端的肽键,用溴化氰处理相应的融合蛋白能获得完整的 A 链或 B 链,且β-半乳糖苷酶被切成多个肽段,这是因为 。
(6)根据图2 中胰岛素的结构,请推测每个胰岛素分子中所含游离氨基的数量。 你的推测结果是 ,理由是 。
高二生物综合题困难题
(14分)胰岛素 A、B 链分别表达法是生产胰岛素的方法之一。 图 1 是该方法所用的基因表达载体,图2 表示利用大肠杆菌作为工程菌生产人胰岛素的基本流程(融合蛋白A、B 分别表示-半乳糖苷酶与胰岛素 A、B链融合的蛋白)。 请回答下列问题:
(1)图1 基因表达载体中没有标注出来的基本结构是 。
(2)图1 中启动子是 酶识别和结合的部位,有了它才能启动目的基因的表达;氨苄青霉素抗性基因的作用是 。
(3)构建基因表达载体时必需的工具酶有 。
(4) β-半乳糖苷酶与胰岛素A 链或B 链融合表达,可将胰岛素肽链上蛋白酶的切割位点隐藏在内部,其意义在于 。
(5)溴化氰能切断肽链中甲硫氨酸羧基端的肽键,用溴化氰处理相应的融合蛋白能获得完整的 A 链或 B 链,且β-半乳糖苷酶被切成多个肽段,这是因为 。
(6)根据图2 中胰岛素的结构,请推测每个胰岛素分子中所含游离氨基的数量。 你的推测结果是 ,理由是 。
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“胰岛素 A、B 链分别表达法”是生产胰岛素的方法之一。图1是该方法所用的基因表达载体,图2表示利用大肠杆菌作为工程菌生产人胰岛素的基本流程(融合蛋白A、B 分别表示β-半乳糖苷酶与胰岛素 A、B链融合的蛋白)。请回答下列问题:
(1)图1基因表达载体中没有标注出来的基本结构是 。
(2)图1中启动子是 酶识别和结合的部位,有了它才能启动目的基因的表达;氨苄青霉素抗性基因的作用是 。
(3)构建基因表达载体时必需的工具酶有 。
(4)β-半乳糖苷酶与胰岛素A链或B链融合表达,可将胰岛素肽链上蛋白酶的切割位点隐藏在内部,推测其意义在于 。
(5)溴化氰能切断肽链中甲硫氨酸羧基端的肽键,用溴化氰处理相应的融合蛋白能获得完整的A 链或 B 链,且β-半乳糖苷酶被切成多个肽段,推测这是因为 。
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“胰岛素 A、B 链分别表达法”是生产胰岛素的方法之一。图1是该方法所用的基因表达载体,图2表示利用大肠杆菌作为工程菌生产人胰岛素的基本流程(融合蛋白A、B 分别表示β-半乳糖苷酶与胰岛素 A、B链融合的蛋白)。请回答下列问题:
(1)图1基因表达载体中没有标注出来的基本结构是 。
(2)图1中启动子是 酶识别和结合的部位,有了它才能启动目的基因的表达;氨苄青霉素抗性基因的作用是 。
(3)构建基因表达载体时必需的工具酶有 。
(4)β-半乳糖苷酶与胰岛素A链或B链融合表达,可将胰岛素肽链上蛋白酶的切割位点隐藏在内部,推测其意义在于 。
(5)溴化氰能切断肽链中甲硫氨酸羧基端的肽键,用溴化氰处理相应的融合蛋白能获得完整的A 链或 B 链,且β-半乳糖苷酶被切成多个肽段,推测这是因为 。
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糖尿病目前的治疗途径之一是注射胰岛素,胰岛素A、B链分别表达法是生产胰岛素的方法之一。图1是该方法所用的基因表达载体,图2表示利用大肠杆菌作为工程菌生产人胰岛素的基本流程(融合蛋白A、B分别表示β-半乳糖苷酶与胰岛素 A、B链融合的蛋白)。请回答下列问题:
(1)根据图1,基因表达载体中没有标注出来的基本结构是____________________。
(2)图1中启动子是________________酶识别和结合的部位,有了它才能启动目的基因的表达,氨苄青霉素抗性基因的作用是________________。
(3)人胰岛素由A、B两条肽链组成,可裉据组成肽链的氨基酸序列,确定编码胰岛素基因的碱基序列,再通过________________方法获得目的基因。
(4)β-半乳糖苷酶与胰岛素A链或B链融合表达,可将胰岛素肱链上蛋白酶的切割位点隐藏在内部,其意义在于________________。
(5)β-半乳糖苷酶中含多个甲硫氨酸,而胰岛素A、B链中不含甲硫氨酸,溴化氰能切断肽链中甲硫氨酸羧基端的肽键,用溴化氰处理相应的融合蛋白的目的是____________。
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胰岛素A、B链分别表达法是生产胰岛素的方法之一。 图1是该方法所用的基因表达载体,图2表示利用大肠杆菌作为工程菌生产人胰岛素的基本流程(融合蛋白A、B分别表示β-半乳糖苷酶与胰岛素A、B链融合的蛋白)。请回答下列问题:
(1)图1基因表达载体中没有标注出来的基本结构是 _________ 。
(2)图1中启动子是 _________ 酶识别和结合的部位,有了它才能启动目的基因的表达;氨苄青霉素抗性基因的作用是 __________________ 。
(3)β-半乳糖苷酶与胰岛素A链或B链融合表达,可将胰岛素肽链上蛋白酶的切割位点隐藏在内部,其意义在于 __________________ 。
(4)溴化氰能切断肽链中甲硫氨酸羧基端的肽键,用溴化氰处理相应的融合蛋白能获得完整的A链或B链,且β-半乳糖苷酶被切成多个肽段,这是因为 __________________ 。
(5)根据图2中胰岛素的结构,请推测每个胰岛素分子中所含游离氨基的数量。你的推测结果是 _________ ,理由是 __________________ 。
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胰岛素A、B链分别表达法是生产胰岛素的方法之一。图1是该方法所用的基因表达载体,图2表示利用大肠杆菌作为工程菌生产人胰岛素的基本流程(融合蛋白A表示β-半乳糖苷酶与胰岛素A链融合的蛋白,融合蛋白B表示β-半乳糖苷酶与胰岛素B链融合的蛋白)。请回答下列问题:
(1)图1基因表达载体中没有标注出来的基本结构是________________________。
(2)图1中启动子是_________酶识别和结合的部位,有了它才能启动目的基因的表达;氨苄青霉素抗性基因的作用是_____________________________________。
(3)构建基因表达载体时必需的工具酶有限制酶和_________________________。
(4)β-半乳糖苷酶与胰岛素A链或B链融合表达,可将胰岛素肽链上蛋白酶的切割位点隐藏在内部,其意义在于_____________________________________。
(5)溴化氰能切断肽链中甲硫氨酸羧基端的肽键,用溴化氰处理相应的融合蛋白能获得完整的A链或B链,且β-半乳糖苷酶被切成多个肽段,这是因为_____________。
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基因工程自20世纪70年代兴起后,发展迅猛,成果显著。
Ⅰ利用大肠杆菌生产人胰岛素时,构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等,其中启动子的作用是______。在用表达载体转化大肠杆菌时,常用________处理大肠杆菌,以利于表达载体进入;为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA,可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交,该杂交技术称为__________。为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成蛋白质,常用______________________技术。
Ⅱ近10年来,PCR技术(多聚酶链式反应)成为分子生物学实验室的一种常规手段,下图为PCR原理示意图,据图回答问题。
(1)基因工程中,利用PCR技术来________________,PCR技术依据的原理是DNA的半保留复制,生物体内也能完成DNA的复制,但有所不同,图中A过程称为____________,在生物体内需要____________才能完成。图中B 过程的完成需要_________等条件(3分)。
(2)若DNA样品的长度为100个碱基对,且A占15%,则完成三次循环,共需要提供的胞嘧啶脱氧核苷酸___________个。
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(10分)回答有关基因工程的问题:
(1)构建基因工程表达载体时,用不同类型的限制酶切割DNA后,可能产生________末端,
也可能产生______末端。
(2)利用大肠杆菌生产人胰岛素时,构建的表达载体含有人胰岛素基因、启动子、________、
和________。其中启动子的作用是________识别和结合的部位,驱动基因转录。
(3)在用表达载体转化大肠杆菌时,常用________处理大肠杆菌,以利于表达载体进入;(4)为了检测胰岛素基因是否导入受体细胞,检测方法是采用技术。为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成胰岛素,常用________技术。
(5)如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞,先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的 中,然后用该农杆菌感染植物细胞,通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的________ 上。
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请根据人们利用转基因生产多种药物的技术,回答下列回题:
(1)利用大肠杆菌生产人胰岛素时,构建基因表达载体中,含有人的胰岛素基因及启动子、___________、 ___________、复制原点等,其中启动子是___________识别和结合的部位,在转化大肠杆菌时,常用_____处理以使大肠杆菌成为__________细胞,以利于表达载体进入。为了检测胰岛素基因是否转录,可用标记的________作探针与mRNA杂交,该杂交技术称为___________技术。常用____________技术检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译。
(2)利用烟草生产人的干扰素时,可以采用农杆菌转化法、__________法或_________法将目的基因导入受体细胞。当采用农杆菌转化法时,所选用的载体一般是________。转化成功后,还需利用_________技术将之培养成完整植株,该项技术的理论基础是_____________,关键步骤是____________________。
(3)利用转基因羊生产人凝血因子时,常用________技术将目的基因导入羊的____________,而后经过一段时间的体外培养再利用_________技术移入母体。若欲同时获得多头基因相同的转基因羊,可以采用___________技术。
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利用外源基因在受体细胞中表达,可生产人类所需的产品。下列选项中能说明目的基因完成表达的是( )
A.棉花细胞中检测到载体上的标记基因
B.山羊乳腺细胞中检测到人生长激素的基因
C.大肠杆菌中检测到人胰岛素基因的mRNA
D.酵母菌细胞中提取到人的干扰素
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