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某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料纯化乳酸菌．分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸菌能溶解培养基中的碳酸钙．回答下列问题：
（1）分离纯化乳酸菌时，首先需要用______对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是______．
（2）推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有______和______．分离纯化时应挑选出______的菌落作为候选菌．
（3）乳酸菌在-20℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的______（填“蒸馏水”、“甘油”或“碳酸钙”）．
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某同学以新鲜的泡菜滤液为实验材料纯化乳酸菌。请回答：
（1）分离纯化乳酸菌时，首先需要用 ___________对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的目的是保证在_________培养基上获得___________。
（2）如果在配制培养基的过程中加入碳酸钙，制出的培养基就显得不透明，用这种培养基来分离纯化乳酸菌，碳酸钙起到的作用有鉴别和____________________。肉眼能明显观察到菌落时应挑选出____________的菌落作为候选菌。
（3）获得的乳酸菌菌种若要采取临时保藏，首先要将菌种接种到试管的________上，并在适宜的温度下培养，当菌落长成后才放入4℃的冰箱保存。
（4）在统计菌落时，发现0.1 mL稀释倍数为105的稀释液在平板上的平均菌落数为40个，则每mL样液中的乳酸菌数大约为________个。用此法测定的乳酸菌数量比实际活菌数量少，原因是________________________________________。
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某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。回答下列问题：
(1)分离纯化乳酸菌时，首先需要用________对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是___________________________。
(2)推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有________和__________。分离纯化时应挑选出________的菌落作为候选菌。
(3)乳酸菌在－20 ℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的________(填“蒸馏水”“甘油”或“碳酸钙”)。
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下列有关泡菜制作的叙述，正确的是
A. 制作泡菜必须要选用新鲜的蔬菜，是因为其不含亚硝酸盐
B. 泡菜腌制的整个过程中，乳酸菌的数量呈先增加后稳定的趋势
C. 测定亚硝酸盐含量需要与标准显色液比较玫瑰红色的深浅来估算
D. 我国卫生标准规定酱腌菜中亚硝酸盐含量不得超过25 mg/kg
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某同学在做色素提取和分离实验时，最终滤纸条上的色素带颜色较浅，效果不明显，你认为最可能的原因是
A.绿叶不新鲜 B.研磨时未加
C.画滤液细线时重复次数少 D.滤液细线浸没到层析液中
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泡菜的制作离不开乳酸菌，但酵母菌对泡菜的风味和品质也有着重要影响，为研究泡菜发酵过程中酵母菌种群数量的动态变化和pH变化，科研人员选用3份泡菜“老盐水”Y1、Y2、Y3和新鲜萝卜进行了以下实验。请完善下列实验过程并分析回答：
(1)制作泡菜
______________________(2)酵母菌的分离、纯化及鉴定
无菌操作下每天取泡菜盐水25mL，加入________mL无菌水中，将样品稀释十倍，再依次稀释成102、103、104、105倍稀释液，分别接种涂布，置于28℃恒温培养箱中培养24h，观察菌落特征，并选取培养基上的________用于DNA分子鉴定。
(3)菌落计数和盐水中的pH值测定
选取便于计数的培养基对不同种酵母菌的菌落分别计数，用此方法计数和直接在显微镜下计数菌体相比，得到的数值往往偏小，原因有________，________。同时，每天用精密pH计测定盐水中的pH值。
(4)结果分析
实验持续15天，部分实验结果如下：
①发酵后期，膜璞毕赤酵母数量减少，甚至消失，从种间竞争的角度分析原因可能是__________________________________________________。
②采用Y1老盐水泡制萝卜10d后，泡菜表面出现白膜(俗称“生花”)，这可能与Y1发酵液中后期________较多有关，其存在时间较长的原因可能是__________________________________________________。
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某班学生以新鲜菠菜叶为材料，进行叶绿体中色素的提取和分离的实验时，由于各组操作不同，出现了下图所示的四种不同层析结果。下列分析不合理的是（ ）
A．甲可能将层析液没及了滤液细线
B．乙可能是因为研磨时未加入SiO2
C．丙是正确操作得到的理想结果
D．丁可能是因为研磨时未加入CaCO3
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下列有关泡菜的制作和亚硝酸盐含量的测定的实验叙述中，正确的是（ ）
A. 将新鲜蔬菜与煮沸冷却的盐水（盐和清水的质量比为4：1）混匀装瓶
B. 发酵初期，泡菜坛口要先敞开一段时间，利于乳酸菌大量繁殖，后期盖好坛盖，并注满水
C. 亚硝酸盐一般不会危害人体健康，但可在特定条件下转变成亚硝胺，亚硝胺具有致癌作用
D. 温度过高、盐用量过低、发酵时间过长，会导致亚硝酸盐含量不断增加
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红茶菌液是一种传统的活菌饮料，能帮助消化，治疗多种胃病，请根据制作流程并结合课本知识回答问题：
（1）红茶菌种是酵母菌、醋酸菌和乳酸菌的共生体，可以用 法分离纯化得到不同的菌种。在接种活菌之前要将红茶糖液先煮沸，目的是 ，然后冷却，以防止高温杀死红茶菌；
（2）温度是酵母菌生长和发酵的重要条件， ℃左右最适宜酵母菌繁殖。酵母菌是兼性微生物，若在培养液中加入酸性的重铬酸钾溶液后，呈现 ，证明已经产生酒精；
（3）酵母细胞中蛋白质的提取和分离一般分为样品处理、粗分离、纯化和
四步，为了准确模拟生物体内的过程，保持细胞内外的pH一致，在样品处理的透析阶段，应将酵母蛋白溶液放人pH较低的 中，在装填凝胶柱时，不得有气泡存在，原因是气泡会搅乱洗脱液中 ，降低分离效果；
（4）当 、糖源都充足时，醋酸菌将培养液中的糖分解为醋酸；在利用乳酸菌制备泡菜时，需要测定亚硝酸盐的含量，在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与 发生重氮化反应后，与N﹣I﹣萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。
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（14分）
红茶菌液是一种传统的活菌饮料，制作流程是：制备红茶糖液→接种红茶菌种→发酵→红茶菌液。据此回答：
（1）红茶菌种是酵母菌、醋酸菌和乳酸菌的共生体，可以用___________法分离纯化得到不同的菌种。
（2）在接种活菌之前，红茶糖液要先煮沸后冷却，这是为了____________________。
（3）马铃薯去皮鲜切后，很容易发生由多酚氧化酶（PPO）催化的酶促褐变，严重影响外观。为了探究红茶菌液对鲜切马铃薯的保鲜作用及机理，某研究小组进行了如下实验。
实验步骤：分三组，其中A组（实验组）处理液是___________，B组是红糖液，C组是___________。用各组处理液浸泡鲜切马铃薯条30min，取出后进行相同的风干、包装和冷藏处理。将马铃薯条保存5天，______________________________，并进行记录。
实验结果：如下图所示。
①补充完成上述实验步骤。
②为保证实验的科学性，还需要控制哪些无关变量？（写出两点）
③根据上图结果分析实验结论，并说明其可能的机理。
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