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预防乙肝最有效的途径是接种疫苗。将乙肝表面抗原基因转移到植物细胞内可生产乙肝疫苗。回答下列问题。
（1）欲在短时间内大量扩增乙肝表面抗原基因。通过______（填写中文名称）技术，其原理是_______，利用该技术扩增乙肝表面抗原基因的前提是________。
（2）将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法，此外采用_____法十分简便经济。用抗原——抗体杂交技术检测植物细胞是否成功合成乙肝表面抗原蛋白，若有_______出现，表明目的基因已形成蛋白质产品。
（3）将乙肝表面抗原基因导入植物细胞后，采用_______技术获得愈伤组织，该技术需在_______条件下进行。
（4）乙肝疫苗在2～8℃条件下保存，其不宜在常温下保存最可能的原因______。
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[生物——选修3：现代生物科技专题]（15分）
将乙肝病毒表面抗原基因导入草莓细胞中，由此可获得用来预防乙肝的一种新型疫苗，为预防乙肝开辟了一条新途径。请回答下列问题：
（1）获得乙肝病毒表面抗原基因后，常利用_________________技术进行扩增。把基因转入农杆菌内时常用_________________处理农杆菌，使之成为感受态细胞。
（2）使用农杆菌将乙肝病毒表面抗原基因导入草莓细胞中，农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可将乙肝病毒表面抗原基因转移至草莓细胞中的_________________上。目的基因进入草莓细胞内并在草莓细胞内维持稳定和表达，这个过程称为_________________。
（3）在基因工程操作过程中，需要用_________________酶和_________________酶构建基因表达载体，基因表达载体要有_________________，以便筛选出含有目的基因的受体细胞。
（4）在分子水平上，可采用_______________的方法来检测转基因草莓果实提取液中有无相应的抗原。
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将乙肝病毒表面抗原基因导入草莓细胞中，由此可获得用来预防乙肝的一种新型疫苗，为预防乙肝开辟了一条新途径。请回答下列问题：
（1）获得乙肝病毒表面抗原基因后，常利用______技术进行扩增。构建的基因表达载体要有________，以便筛选出含有目的基因的受体细胞。把基因转人农杆菌内时常用________处理农杆菌。
（2）使用农杆菌将乙肝病毒表面抗原基因导入草莓细胞中后，还需要采用__________技术培育成植株。培育过程中器官发生和形态建成，主要通过平衡的_________进行调控。从变异角度看，转基因育种的原理是_______________。
（3）在分子水平上，可采用____________的方法来检测转基因草莓果实提取液中有无相应的抗原。
（4）假定抗虫基因插入宿主染色体的部位是随机的。且整合到染色体上的抗虫基因均正常表达。对这些转基因草莓进一步研究发现，其中一些植株体细胞中含两个抗虫基因。让这些转基因草莓植株自交，发现大约有1/16的子代果实中未提取到相应的抗原，可能的原因是______________________________。
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(12分)【生物——现代生物科技专题】我国目前临床使用的乙肝疫苗大多为基因工程疫苗，其有效成分是乙肝表面抗原蛋白。下图是将乙肝表面抗原基因转移到烟草细胞内生产乙肝疫苗的示意图，请据图回答：
(1)过程①表示_________。为了使目的基因正常表达，其首端必须有______识别和结合的部位。若限制酶切出了平末端，要选择___________进行连接。
(2)目的基因通过过程②进入农杆菌细胞内，并在农杆菌细胞内维持稳定和表达的过程称为___________。
(3)将乙肝表面抗原基因导入烟草细胞的方法称为________________。
(4)将乙肝表面抗原基因导入烟草细胞后，需要进行基因的检测与鉴定：首先检测____是否插入了乙肝表面抗原基因；其次检测_____是否转录出相应的mRNA；最后检测乙肝表面抗原基因是否翻译出乙肝表面抗原蛋白，检测的方法是____________。
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乙肝病毒表面有T1蛋白和T2蛋白，免疫接种实验表明这两种蛋白质都可引起实验动物的免疫反应。科研人员用农杆菌转化法培育出转基因番茄，用于生产可口服的乙肝病毒疫苗，为预防乙肝开辟了一条新途径。回答下列问题：
（1）T1蛋白和T2蛋白进入实验动物的肠道后，会被实验动物小肠黏膜上的一种M细胞当做_________处理，进而引发一系列的免疫反应，最终产生相应的___________，使实验动物获得了对乙肝病毒的免疫能力。
（2）构建基因表达载体是基因工程的核心，其目的是___________；构建表达载体时，需要选择果实特异性启动子，其目的是_________________________________。
（3）用转基因番茄生产可口服的乙肝病毒疫苗（含T1蛋白），若要检测目的基因是否翻译出T1蛋白，可用的检测物质是___________（填“乃蛋白的基因”或“T1蛋白的抗体”），该检测方法称为_________。
（4）获得转基因番茄植株后，已确定该植株所结番茄中含有T2蛋白，此后还要对T2蛋白的功能进行个体水平的鉴定，方法是_______________________________________________________。
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将乙肝病毒表面抗原基因导入草莓细胞中,由此可获得用来预防乙肝的一种新型疫苗,为预防乙肝开辟了一条新途径。请问答下列问题:
（1）获得乙肝病毒表面抗原基因后,常利用__________技术进行扩增。把基因转入农杆菌内时常用__________处理农杆菌,使之成为感受态细胞。
（2）使用农杆菌将乙肝病毒表面抗原基因导入草莓细胞中,农杆菌中的Ti质粒上的T—DNA可将乙肝病毒表面抗原基因转移至草莓细胞中的__________上。目的基因进入草莓细胞内并在草莓细胞内维持稳定和表达,这个过程称为__________。
（3）在基因工程操作过程中,需要用__________酶和__________酶构建基因表达载体,基因表达载体要有__________,以便筛选出含有目的基因的受体细胞。
（4）在分子水平上,可采用__________的方法来检测转基因草莓果实提取液中有无相应的抗原。
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将乙肝病毒表面抗原基因导入草莓细胞中，由此可获得用来预防乙肝的一种新型疫苗，为预防乙肝开辟了一条新途径。请问答下列问题：
（1）获得乙肝病毒表面抗原基因后，常利用_________________技术进行扩增。把基因转入农杆菌内时常用_________________处理农杆菌，使之成为感受态细胞。
（2）使用农杆菌将乙肝病毒表面抗原基因导入草莓细胞中，农杆菌中的Ti质粒上的T—DNA可将乙肝病毒表面抗原基因转移至草莓细胞中的_________________上。目的基因进入草莓细胞内并在草莓细胞内维持稳定和表达，这个过程称为_________________。
（3）在基因工程操作过程中，需要用_________________酶和_________________酶构建基因表达载体，基因表达载体要有_________________，以便筛选出含有目的基因的受体细胞。
（4）在分子水平上，可采用_______________的方法来检测转基因草莓果实提取液中有无相应的抗原。
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乙型肝炎是由乙肝病毒（一种DNA病毒）引起的一种慢性传染病。临床上用于预防乙肝的疫苗大多数为基因工程疫苗，其有效成分是乙肝病毒表面的抗原蛋白（简称乙肝表面抗原）。如图为乙肝疫苗的生产过程示意图，回答下列问题：
（1）在疫苗生产过程中，需要从乙肝患者的肝细胞中提取乙肝表面抗原的mRNA，原因是_______________然后利用乙肝表面抗原的mRNA在_______________催化作用下合成乙肝表面抗原基因。
（2）图中①过程为_______________，为使乙肝表面抗原基因正常表达，基因表达载体的首端需要添加启动子，作用是___________________。
（3）图中三种方法均可获得相同的乙肝疫苗，其理论依据是_______________。为提高重组DNA导入酵母菌的转化效率，常用_______________溶液处理酵母菌细胞。从微生物的特点角度分析，用发酵工程的方法生产乙肝疫苗的优点是_______________。
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下图是将乙肝表面抗原基因转移到烟草细胞内生产乙肝疫苗的示意图，请据图回答下列问题。
（1）过程①表示_________。为了使目的基因正常表达，其首端必须有启动子，它是___________的部位。若限制酶切出了平末端，要选择___________进行连接。（填“E·coliDNA连接酶”或“T4DNA连接酶”）
（2）图中将乙肝表面抗原基因导入烟草细胞的方法称为____________________。它是利用运载体Ti质粒中含有___________序列，可以将目的基因整合到宿主细胞的染色体上。
（3）图中将乙肝表面抗原基因导入烟草细胞后，长芽、生根的过程中采用了细胞工程的___________技术，该技术的原理是______________________。
（4）检测烟草植株细胞中乙肝表面抗原基因是否合成出乙肝表面抗原蛋白，采用的方法是_____________。
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现有的肝硬化、肝癌多从乙肝发展而来，接种乙肝疫苗是预防乙肝病毒感染的最有效方法。现在乙型肝炎疫苗的研制已经到了基因工程疫苗阶段。
图为“乙肝基因工程疫苗”的生产和使用过程，将乙肝病毒表面蛋白(HBsAg)基因片段导入大肠杆菌，让重组后的大肠杆菌在培养过程中产生HBsAg。其中选用的质粒lacZ基因可使细菌利用加入培养基的物质X-gal，从而使菌落显现出蓝色，若无该基因，菌落则成白色。
1.下列①～④表示基因工程疫苗研制的步骤，其中步骤①是___________；①-④步骤的正确排序是________________。
① ？ ②重组DNA分子导入大肠杆菌
③获取HBsAg基因 ④HBsAg基因与运载体的连接
2.据图可知获取HBsAg基因选用的限制酶方案是 。
A.EcoRV和BamHI B.只用EcoRV C.只用EcoRI D.只用BamHI
3.图中所示抗原蛋白HBsAg和相应抗体的基因表达过程中，不同的是 。
A.基因所来源的物种 B.转录出的mRNA碱基序列
C.氨基酸对应遗传密码子表 D.翻译出的氨基酸序列
4.为了获得产生HBsAg的大肠杆菌，培养一段时间挑选出_____（蓝色/白色）的菌落进一步培养，分子HBsAg属于免疫反应中的_____________。
5.接种基因工程疫苗比接种灭活获减毒的病毒疫苗更安全，试从疫苗的结构特点解释原因：___________________________________________________。
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