用 限制酶XbaI和SacI（两种酶切出的粘性末端不同）切割某DNA，获得含目的基因的片段...

用 限制酶XbaI和SacI（两种酶切出的粘性末端不同）切割某DNA，获得含目的基因的片段。若利用该片段构建基因表达载体，应选用下图中的Ti质粒是

注：图中箭头所指的位置是限制酶识别和切割的位点

A.

B.

C.

D.

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（15分）回答有关基因工程的问题：

（1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生粘性末端，也可能产生　　　　 末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生　　　　　　　　 （相同，不同）粘性末端的限制酶。

（2）利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。在用表达载体转化大肠杆菌时，常用　　　　　 处理大肠杆菌，以利于表达载体进入：为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为　　　　　　　　　　　　 。为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成　　　　　　　　　　 _，常用抗原-抗体杂交技术。

（3）如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的　　　　　　 _中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的　　　　　　　　　 _上。

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[生物——选修3：现代生物科技专题]回答下列有关基因工程的问题：

（1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA，可能产生黏性末端，也可能产生_________末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生_________（相同或不同）黏性末端的限制酶。

（2）利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及启动子等，其中启动子的作用是_______________。在用表达载体转化大肠杆菌时，常用_________处理大肠杆菌，以利于表达载体进入。为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为___________。为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成__________，常用抗原-抗体杂交技术。

（3）如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的__________中，然后用该农杆菌感染植物细胞，使目的基因进入插入植物细胞并将其插入到植物细胞中的_______上。

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回答下列有关现代生物科技方面的问题：

（1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生黏性末端，也可能产生________末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，一般选择能使二者产生___________(相同、不同)黏性末端的限制酶。

（2）在精卵结合过程中，防止多精入卵的第二道屏障称做：　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（3）生态经济：使一个系统产出的污染物，能够成为本系统或另一个系统的生产原料，从而实现废弃物的资源化。“无废弃物农业”体现了生态工程　　　　　　　　　　　　　　　　 原理。

（4）若要获取转基因植物人工种子，需培养到_______________阶段，再进行人工种皮的包裹；如用植物细胞实现目的基因所表达的蛋白质类药物的工厂化生产，培养到_______________阶段即可。

（5）动物克隆技术：目前动物的克隆主要采用__________________技术来实现，我国禁止生殖性克隆，但不反对________________的研究。

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（15分）回答下列有关现代生物科技方面的问题：

（1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生黏性末端，也可能产生________末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，一般选择能使二者产生___________(相同、不同)黏性末端的限制酶。

（2）在精卵结合过程中，防止多精入卵的第二道屏障称做：　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（3）生态经济：使一个系统产出的污染物，能够成为本系统或另一个系统的生产原料，从而实现废弃物的资源化。“无废弃物农业”体现了生态工程　　　　　　　　　　　　　　　　　 原理。

（4）若要获取转基因植物人工种子，需培养到_______________阶段，再进行人工种皮的包裹；如用植物细胞实现目的基因所表达的蛋白质类药物的工厂化生产，培养到_______________阶段即可。

（5）动物克隆技术：目前动物的克隆主要采用__________________技术来实现，我国禁止生殖性克隆，但不反对________________的研究。

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回答下列有关现代生物科技方面的问题：

（1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生黏性末端，也可能产生________末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，一般选择能使二者产生___________(相同、不同)黏性末端的限制酶。

（2）在精卵结合过程中，防止多精入卵的第二道屏障称做：　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（3）生态经济：使一个系统产出的污染物，能够成为本系统或另一个系统的生产原料，从而实现废弃物的资源化。“无废弃物农业”体现了生态工程　　　　　　　　　　　　　　　　　 原理。

（4）若要获取转基因植物人工种子，需培养到_______________阶段，再进行人工种皮的包裹；如用植物细胞实现目的基因所表达的蛋白质类药物的工厂化生产，培养到_______________阶段即可。

（5）动物克隆技术：目前动物的克隆主要采用__________________技术来实现，我国禁止生殖性克隆，但不反对________________的研究。

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图是利用正常大鼠制备转基因大鼠的流程示意图，回答下列问题。

（1）质粒是环状DNA分子，没有游离端。当质粒用限制酶切割一次以后，形成　　　　 个黏性末端，若在构建基因表达载体时，选用同种限制酶来切割目的基因和质粒，再用连接酶连接两者之间的黏性末端，则会出现部分转基因大鼠中目的基因不能正确表达的情况，其最可能的原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（2）卵母细胞除从活体　　　　　　　　 中采集外，还可以从处死的雌鼠卵巢中获取，采集到的精子必须经过　　　　　　　　　　　　 处理后，才能与卵母细胞结合，完成受精作用。

（3）在上述转基因大鼠的培育过程中，所用到的主要胚胎工程技术是　　　　　　　 、早期胚胎培养和胚胎移植。

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基因表达载体的构建是基因工程的核心。图1为限制酶EcoRⅠ的识别序列，图2表示目的基因及限制酶切点，图3表示目的基因上的DNA片段，图4表示质粒。回答下列问题：

（1）若用图1所示的限制酶EcoRⅠ切割外源DNA，就其特异性而言，切开的是__________之间相连的键。

（2）图3为目的基因中的某一片段，下列有关叙述正确的是__________。

A.若图中的ACT能决定一个氨基酸，则ACT可称为一个密码子

B.DNA聚合酶和DNA连接酶都可作用于②处，解旋酶作用于①处

C.若只用这个片段中的3个碱基对，排列出的DNA片段有64种

D.就游离的磷酸基而言，该片段与重组质粒相比多了2个游离的磷酸基

（3）若利用PCR技术增加目的基因的数量，由图2可知，A、B、C、D四种单链DNA片段中应选取__________作为引物（DNA复制子链的延伸方向5’→3’）。该DNA分子在PCR仪中经过4次循环后会产生等长的目的基因片段__________个。

（4）为了使目的基因和质粒定向连接并且有利于受体细胞的筛选，提高重组效率，应该选择的限制酶是__________。如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ同时对质粒进行切割，假设同时只有任意两个位点被切断且每次机会相等，则形成含有完整抗四环素基因的DNA片段有__________种。

（5）如果大肠杆菌是受体细胞，则其体内应不含__________基因，以利于筛选出含重组质粒的受体菌。目的基因能在大肠杆菌细胞内表达出相同的蛋白质，其遗传学基础是____________________。

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基因表达载体的构建是基因工程的核心。图1为限制酶EcoRⅠ的识别序列，图2表示目的基因及限制酶切点，图3表示目的基因上的DNA片段，图4表示质粒。回答下列问题：

（1）若用图1所示的限制酶EcoRⅠ切割外源DNA，就其特异性而言，切开的是__________之间相连的键。

（2）图3为目的基因中的某一片段，下列有关叙述正确的是__________。

A.若图中的ACT能决定一个氨基酸，则ACT可称为一个密码子

B.DNA聚合酶和DNA连接酶都可作用于②处，解旋酶作用于①处

C.若只用这个片段中的3个碱基对，排列出的DNA片段有64种

D.就游离的磷酸基而言，该片段与重组质粒相比多了2个游离的磷酸基

（3）若利用PCR技术增加目的基因的数量，由图2可知，A、B、C、D四种单链DNA片段中应选取__________作为引物（DNA复制子链的延伸方向5’→3’）。该DNA分子在PCR仪中经过4次循环后会产生等长的目的基因片段__________个。

（4）为了使目的基因和质粒定向连接并且有利于受体细胞的筛选，提高重组效率，应该选择的限制酶是__________。如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ同时对质粒进行切割，假设同时只有任意两个位点被切断且每次机会相等，则形成含有完整抗四环素基因的DNA片段有__________种。

（5）如果大肠杆菌是受体细胞，则其体内应不含__________基因，以利于筛选出含重组质粒的受体菌。目的基因能在大肠杆菌细胞内表达出相同的蛋白质，其遗传学基础是____________________。

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基因表达载体的构建是基因工程的核心。图1为限制酶EcoRⅠ的识别序列，图2表示目的基因及限制酶切点，图3表示目的基因上的DNA片段，图4表示质粒。请回答下列问题

（1）若用图1所示的限制酶EcoRⅠ切割外源DNA，就其特异性而言，切开的是__________之间相连的化学键。

（2）图3为目的基因中的某一片段，下列有关叙述正确的是__。

A．若图中右侧碱基序列为ACT能决定一个氨基酸，则ACT可称为一个密码子

B．DNA聚合酶和DNA连接酶都可作用于①②处

C．若只用这个片段中的3个碱基对，排列出的DNA片段有64种

D．就游离的磷酸基而言，该片段与重组质粒相比多了2个游离的磷酸基

（3）若利用PCR技术增加目的基因的数量，由图2可知，A、B、C、D四种单链DNA片段中应选取_____作为引物（DNA复制子链的延伸方向5′→3′）。该DNA分子在PCR仪中经过第_______次循环会产生等长的目的基因，该次循环能产生__个这样的片段。

（4）为了使目的基因和质粒定向连接并且有利于受体细胞的筛选，提高重组效率，应该选择的限制酶是__。如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ同时对质粒进行切割，假设同时只有任意两个位点被切断且每次机会相等，则形成含有完整抗四环素基因的DNA片段有__种。

（5）如果大肠杆菌是受体细胞，则其体内应不含____________基因，以利于筛选出含重组质粒的受体菌。目的基因能在大肠杆菌细胞内表达出相同的蛋白质，其遗传学基础是____________________。

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