流行性乙型脑炎（乙脑）是由乙脑病毒引起的一种中枢神经系统受损的传染病。接种乙脑疫苗是防治乙...

流行性乙型脑炎（乙脑）是由乙脑病毒引起的一种中枢神经系统受损的传染病。接种乙脑疫苗是防治乙脑的重要措施之一。科研人员对乙脑减毒活疫苗和乙脑灭活疫苗在机体内的免疫应答机制进行了研究。

（1）乙脑疫苗进入小鼠体内，作为　　　　 　　 刺激B细胞增殖、分化。大部分B细胞分化为　　　　 ，产生抗体。

（2）取健康小鼠分为六组，每组20只，以原液、103、104和105倍稀释的乙脑减毒活疫苗和乙脑灭活疫苗原液对小鼠进行皮下注射获得免疫小鼠，几天后，每组选取10只小鼠抽取血清进行稀释，测量达到标准抗原抗体反应效果的血清稀释倍数，所得平均值见表，以此反映小鼠的抗体水平。实验中自变量为　　　　 　 。分析可知，两种疫苗都能诱导　　　　 免疫机制的发生，且随着减毒活疫苗稀释倍数的增加抗体水平　　　　 。

（3）研究人员取每组其余10只免疫小鼠进行实际免疫效果的测定。测定时，将　　　　 　　　　　　　　 注射入小鼠体内，观察14天，记录小鼠的存活数量，结果如图。结合（2）中实验结果分析，A组和E组相比较，　　　　 ，据此推测与灭活疫苗相比，减毒活疫苗可能还存在较强的细胞免疫机制。实验中　　　　 　　　　 两组的比较也可以支持上述推测。

（4）为证明（3）的推测，科研人员选取（2）中　　　　 和A三组免疫小鼠，从三组小鼠的脾脏中提取效应T细胞，把靶细胞混合培养，4小时后测定靶细胞的　　　　 。若　　　　 　　　　　　　　　　　 ，则说明上述推测正确。

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流行性乙型脑炎（乙脑）是由乙脑病毒引起的一种中枢神经系统受损的传染病。接种乙脑疫苗是防治乙脑的重要措施之一。科研人员对乙脑减毒活疫苗和乙脑灭活疫苗在机体内的免疫应答机制进行了研究。

（1）乙脑疫苗进入小鼠体内，作为　　　　 刺激B细胞增殖、分化。大部分B细胞分化为　　　　　　 细胞。（2）取健康小鼠分为六组，每组20只，以原液、103、104和105倍稀释的乙脑减毒活疫苗和乙脑灭活疫苗原液对小鼠进行皮下注射获得免疫小鼠，几天后，每组选取10只小鼠抽取血清进行稀释，测量达到标准抗原抗体反应效果的血清稀释倍数，所得平均值见表，以此反映小鼠的抗体水平。实验中自变量为　　　　 。分析可知，两种疫苗都能诱导免疫机制的发生，且随着减毒活疫苗稀释倍数的增加抗体水平　　　　　　 。

（3）研究人员取每组其余10只免疫小鼠进行实际免疫效果的测定。测定时，将注射入小鼠体内，观察14天，记录小鼠的存活数量，结果如图。根据　　　　　　 两组的比较可以推测与灭活疫苗相比，减毒活疫苗可能还存在较强的细胞免疫机制。

（4）为证明（3）的推测，科研人员选取（2）中　　　　　　　　 三组免疫小鼠，从三组小鼠的脾脏中提取效应T细胞，把靶细胞混合培养，4小时后测定靶细胞的　　　　 。若　　　 　　　　 ，则说明上述推测正确。

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回答有关现代生物技术的问题

乙肝是由乙型肝炎病毒（HBV）引起的一种慢性传染病，主要采用基因工程乙肝疫苗进行防治。科研人员采用转基因技术将乙肝病毒表面抗原（HBsAg）基因片段导入酵母细胞或中国仓鼠卵巢细胞（CHO），让重组后的酵母或CHO细胞在体外培养过程中产生HBsAg，将其分离、提纯之后制成乙肝疫苗，部分生产过程如图。

（1）下列①～④表示获得重组CHO细胞的步骤，其中步骤④是______；①-④步骤的正确排序是______。

①重组DNA分子导入CHO细胞

②筛选成功导入HBsAg基因的CHO细胞

③人工合成HBsAg基因

④______

（2）大量培养重组酵母和重组CHO细胞生产乙肝疫苗过程中，需将培养液中HBsAg与其他杂质分离，可采用的方法是______（多选）。

A．破碎细胞 B．加入硫酸铵 C．改变pH D．冷冻干燥

（3）利用重组酵母和重组CHO细胞生产乙肝疫苗，分别属于生物工程中的______、______领域。

（4）利用重组CHO细胞和重组酵母生产基因工程乙肝疫苗，目前都在进行规模化生产，但两种方法各有不足和优势。请在下列选项中选择合适的编号填入表对应的空格中，以表示你对此问题的分析（编号可重复选用）：

①结构简单、遗传操作较为容易

②表达的HBsAg更接近天然形式，疫苗稳定性好

③表达的HBsAg与天然形式存在差异

④培养条件要求高，生产成本较高

⑤可将HBsAg分泌到胞外，易于分离提纯

⑥易于培养、繁殖迅速，生产成本较低

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乙型脑炎是由乙型脑炎病毒（JEV）引起的神经系统疾病。乙型脑炎病毒是一种RNA病毒，E蛋白参与病毒复制过程。市售灭活疫苗缺乏长效免疫，必须多次加强接种。研究人员利用基因重组的方法构建了三种新型JEV疫苗：E蛋白疫苗（A 疫苗）、重组病毒疫苗（B疫苗）和DNA疫苗（C疫苗），实验主要流程如下图所示。请回答下列问题：

（1）请填写图中①②的名称：①__________；②__________。

（2）利用小鼠模型评价以上三种疫苗的保护效果。将成年和幼年小鼠分组，每组10 只，分别注射不同的疫苗或试剂，检测小鼠体内效应T细胞的杀伤活性和对病毒攻击的免疫保护，结果如下表。

三种疫苗注射到小鼠体内后，均能检测到乙型脑炎病毒的E蛋白，E蛋白作为________________激发小鼠的

__________免疫。为检验三种疫苗的免疫效果是否达标，还应给小鼠注射__________作为对照。

（3）进一步测量小鼠的血清抗体水平，部分结果如下图所示，第一次免疫后三种疫苗诱发的抗体水平无明显差异，但第2次免疫后，__________。研究者还发现，注射C疫苗后，幼年小鼠产生抗体明显高于成年小鼠，推测原因可能是由于DNA 疫苗注射到肌肉后，幼鼠肌细胞代谢旺盛，摄取__________的能力较强。

（4）综上所述，三种疫苗都能诱发小鼠产生__________，实现抗乙型脑炎病毒的保护作用。科研人员对DNA疫苗的使用持谨慎态度，请简要评述DNA疫苗的利弊：____________________。

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接种疫苗是预防传染病的有效措施之一。如图为科研人员研发某种病毒疫苗的几种技术思路。

1.接种疫苗能使人体获得对某种传染病的免疫力。以下对疫苗的描述正确的是_____。

A.是一种抗体 B.是一种抗原

C.与病原微生物部分结构相同 D.化学本质都为蛋白质

2.途径I和II都需要通过动物细胞培养获得足够数量的病毒株。在动物细胞培养中，除了适宜的营养物质、氧气、温度等条件外，还需要控制的条件有_____等（写出2点）。途径I与途径II相比，生产的疫苗安全性更高的是途径_____。

3.途径Ⅲ中，过程①的操作属于_____。

A.RNA复制 B.逆转录

C.翻译 D.转录

4.途径III中需要限制酶处理的是过程_____；完成过程⑤的工程菌需要进行筛选，其目的是_____。

5.途径III过程③中，若质粒被酶切后末端的碱基序列为，则能与之连接的DNA片段末端的碱基序列应是_____。

A. B.

C. D.

6.图中，步骤⑥⑦涉及到的生物工程技术是_____。

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天花是由天花病毒感染人引起的一种传染性强、死亡率高的烈性传染病。我国早期推广新生儿接种牛痘疫苗（由取自牛痘的一种天然轻型病毒制成）措施，终止了天花在我国的传播。下列叙述正确的是（　　 ）

A.天花病毒和牛痘中的轻型病毒的蛋白质外壳相同

B.人体第一道防线对牛痘中的轻型病毒没有防卫能力

C.研制疫苗是终止新型冠状病毒在我国传播的重要措施

D.接种的牛痘疫苗刺激机体产生的抗体可终生保留

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手足口病是由多种肠道病毒引起的一种传染病，EV71是导致重症手足口病的重要病原体之一，接种EV71型手足口病疫苗可有效预防该病。图为该病毒在人体肠道细胞内增殖的示意图。

(1)EV71的遗传物质的中文名称是_____，物质甲是_________。

(2)据图可知，以亲代RNA为模板，至少需复制______次才能获得与亲代病毒序列相同的核酸。EV71在宿主细胞内增殖的过程中，遗传信息的流动方向是________(用文字和箭头表示）。

(3)疫苗在免疫学上属于_______，两次接种EV71型手足口病疫苗需间隔1个月，和第一次注射相比，第二次注射疫苗时抗体产生的特点是___________。

(4)机体再次感染EV71时，引发的特异性免疫有________，该过程中能特异性识別抗原的免疫细胞有____________。　　　　　

(5)接种EV71疫苗的人，仍可能患手足口病，可能的原因有：①因疫苗特性或受种者个体差异等因素，接种人群不一定产生100%的保护效果；②　　　　　 _________；③________。

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乙型肝炎是由乙肝病毒（一种DNA病毒）引起的一种慢性传染病。临床上用于预防乙肝的疫苗大多数为基因工程疫苗，其有效成分是乙肝病毒表面的抗原蛋白（简称乙肝表面抗原）。如图为乙肝疫苗的生产过程示意图，回答下列问题：

（1）在疫苗生产过程中，需要从乙肝患者的肝细胞中提取乙肝表面抗原的mRNA，原因是_______________然后利用乙肝表面抗原的mRNA在_______________催化作用下合成乙肝表面抗原基因。

（2）图中①过程为_______________，为使乙肝表面抗原基因正常表达，基因表达载体的首端需要添加启动子，作用是___________________。

（3）图中三种方法均可获得相同的乙肝疫苗，其理论依据是_______________。为提高重组DNA导入酵母菌的转化效率，常用_______________溶液处理酵母菌细胞。从微生物的特点角度分析，用发酵工程的方法生产乙肝疫苗的优点是_______________。

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狂犬病是由狂犬病毒引起的一种人畜共患传染病，狂犬病毒是一种嗜神经病毒，它能通过神经纤维迅速侵染到中枢神经系统大量繁殖，人患病后会出现恐水、痉挛、吞咽困难等症状，最终会因呼吸肌麻痹而死亡，目前接种狂犬疫苗是预防狂犬病的有效手段。

（1）狂犬病患者出现以上症状，推测狂犬病毒主要破坏_________。

（2）被狗咬过的人，再次看到流浪狗会迅速的避开，该行为的完成___________（“有”或“无”）大脑皮层参与。狂犬病毒进入人体可与乙酰胆碱受体结合，使突触后神经元兴奋性降低，原因是_______________。

（3）被狗咬伤后须多次接种狂犬病疫苗，目的是_________。

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天花是由天花病毒引起的一种烈性传染病，对未免疫人群感染后15～20天内致死率高达30%，接种天花疫苗是预防天花的最有效办法，以下有关叙述正确的是

A．初次接种天花疫苗后，机体可能会产生相应的过敏反应

B．再次接种天花疫苗后，机体中至少有3种细胞具有分化能力

C．天花疫苗在人体内诱发产生的抗体和记忆细胞存在的时间是很长的

D．天花疫苗可以与侵入的天花病毒结合，从而抑制天花病毒的繁殖或对人体细胞的黏附

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