乙型脑炎是由乙型脑炎病毒（JEV）引起的神经系统疾病。乙型脑炎病毒是一种RNA病毒，E蛋白...

乙型脑炎是由乙型脑炎病毒（JEV）引起的神经系统疾病。乙型脑炎病毒是一种RNA病毒，E蛋白参与病毒复制过程。市售灭活疫苗缺乏长效免疫，必须多次加强接种。研究人员利用基因重组的方法构建了三种新型JEV疫苗：E蛋白疫苗（A 疫苗）、重组病毒疫苗（B疫苗）和DNA疫苗（C疫苗），实验主要流程如下图所示。请回答下列问题：

（1）请填写图中①②的名称：①__________；②__________。

（2）利用小鼠模型评价以上三种疫苗的保护效果。将成年和幼年小鼠分组，每组10 只，分别注射不同的疫苗或试剂，检测小鼠体内效应T细胞的杀伤活性和对病毒攻击的免疫保护，结果如下表。

三种疫苗注射到小鼠体内后，均能检测到乙型脑炎病毒的E蛋白，E蛋白作为________________激发小鼠的

__________免疫。为检验三种疫苗的免疫效果是否达标，还应给小鼠注射__________作为对照。

（3）进一步测量小鼠的血清抗体水平，部分结果如下图所示，第一次免疫后三种疫苗诱发的抗体水平无明显差异，但第2次免疫后，__________。研究者还发现，注射C疫苗后，幼年小鼠产生抗体明显高于成年小鼠，推测原因可能是由于DNA 疫苗注射到肌肉后，幼鼠肌细胞代谢旺盛，摄取__________的能力较强。

（4）综上所述，三种疫苗都能诱发小鼠产生__________，实现抗乙型脑炎病毒的保护作用。科研人员对DNA疫苗的使用持谨慎态度，请简要评述DNA疫苗的利弊：____________________。

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乙型脑炎病毒（JEV）是一种 RNA 病毒，病毒的 E 蛋白参与病毒复制过程。研究人员利用基因重组的方法构建了二种新型 JEV 疫苗：DNA 疫苗和 E 蛋白疫苗。图示主要流程。

1.过程①为_____；过程②所需要的酶是_____。

2.研究发现：受体细胞为大肠杆菌或酵母菌时，所形成的 E 蛋白结构不完全相同。原因是 　　 。

A.大肠杆菌无细胞核，酵母菌有细胞核可进行基因转录

B.大肠杆菌无膜结构的细胞器，无法对蛋白质进一步加工

C.两种受体细胞在基因表达时所使用的密码子不同

D.两种受体细胞在基因表达时所遵循的碱基互补配对原则不同

3.关于 DNA 疫苗的叙述，正确的是　　

A.分子较小，结构较稳定 B.能通过 PCR 技术增加生产量

C.能激活机体产生特异性免疫 D.DNA 疫苗已广泛用于人工免疫

如图表示N 质粒和成功导入 E 蛋白基因的质粒 EN。为筛选含 EN 的菌落，可用含不同抗生素： 氨苄青霉素和四环素的平板培养基进行筛选，现得到 A、B、C 三类菌落，生长情况如表 。（‘+’代表生长，‘-’代表不生长）

4.表 中无抗生素平板培养基的作用是_____。另三种培养基属于下列选项中的_____。

A．固体培养基　　　 通用培养基　　　　　　 B．固体培养基　　　 选择培养基

C．液体培养基 通用培养基　　　　　　 D．液体培养基 选择培养基

5.据图 和表判断， 　　 。

A.A 菌落细胞被导入了N 质粒 B.B 菌落细胞被导入 EN 质粒

C.C 菌落细胞未被导入任何质粒 D.两种抗生素均能抑制 E 蛋白表达

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阅读以下材料回答下列小题

乙型脑炎病毒（JEV）是一种RNA病毒，病毒的E蛋白参与病毒复制过程。研究人员利用 基因重组的方法构建了二种新型JEV疫苗：DNA疫苗和E蛋白疫苗。图示主要流程。

1.研究发现：受体细胞为大肠杆菌或酵母菌时，所形成的E蛋白结构不完全相同，最可能的原因是：（　　 ）

A.两种受体细胞在基因表达时所使用的密码子不同

B.大肠杆菌无细胞核，酵母菌有细胞核可进行基因转录

C.大肠杆菌无膜结构的细胞器，无法对蛋白质进一步加工

D.两种受体细胞在基因表达时所遵循的碱基互补配对原则不同

2.①代表什么过程，②所需要的酶是 （　　 ）

A.转录　　 DNA聚合酶与DNA连接酶

B.逆转录　　 逆转录酶与RNA聚合酶

C.翻译　　 DNA聚合酶与RNA聚合酶

D.逆转录　　 限制酶与DNA连接酶

3.如图表示N质粒和成功导入E蛋白基因的质粒EN。为筛选含EN的菌落，可用含不同抗生素：氨苄青霉素和四环素的平板培养基进行筛选，现得到A、B、C三类菌落，生长情况如表。（“+”代表生长，“-”代表不生长）据图和表分析，不能得出的结论是（　　 ）

A.A菌落细胞被导入了N质粒 B.两种抗生素均能抑制E蛋白表达

C.C菌落细胞未被导入任何质粒 D.B菌落细胞被导入EN质粒

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阅读以下材料回答下列小题

乙型脑炎病毒（JEV）是一种RNA病毒，病毒的E蛋白参与病毒复制过程。研究人员利用 基因重组的方法构建了二种新型JEV疫苗：DNA疫苗和E蛋白疫苗。图示主要流程。

1.研究发现：受体细胞为大肠杆菌或酵母菌时，所形成的E蛋白结构不完全相同，最可能的原因是：（　　 ）

A.两种受体细胞在基因表达时所使用的密码子不同

B.大肠杆菌无细胞核，酵母菌有细胞核可进行基因转录

C.大肠杆菌无膜结构的细胞器，无法对蛋白质进一步加工

D.两种受体细胞在基因表达时所遵循的碱基互补配对原则不同

2.①代表什么过程，②所需要的酶是 （　　 ）

A.转录　　 DNA聚合酶与DNA连接酶

B.逆转录　　 逆转录酶与RNA聚合酶

C.翻译　　 DNA聚合酶与RNA聚合酶

D.逆转录　　 限制酶与DNA连接酶

3.如图表示N质粒和成功导入E蛋白基因的质粒EN。为筛选含EN的菌落，可用含不同抗生素：氨苄青霉素和四环素的平板培养基进行筛选，现得到A、B、C三类菌落，生长情况如表。（“+”代表生长，“-”代表不生长）据图和表分析，不能得出的结论是（　　 ）

A.A菌落细胞被导入了N质粒 B.两种抗生素均能抑制E蛋白表达

C.C菌落细胞未被导入任何质粒 D.B菌落细胞被导入EN质粒

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乙型肝炎是由乙肝病毒（一种DNA病毒）引起的一种慢性传染病。临床上用于预防乙肝的疫苗大多数为基因工程疫苗，其有效成分是乙肝病毒表面的抗原蛋白（简称乙肝表面抗原）。如图为乙肝疫苗的生产过程示意图，回答下列问题：

（1）在疫苗生产过程中，需要从乙肝患者的肝细胞中提取乙肝表面抗原的mRNA，原因是_______________然后利用乙肝表面抗原的mRNA在_______________催化作用下合成乙肝表面抗原基因。

（2）图中①过程为_______________，为使乙肝表面抗原基因正常表达，基因表达载体的首端需要添加启动子，作用是___________________。

（3）图中三种方法均可获得相同的乙肝疫苗，其理论依据是_______________。为提高重组DNA导入酵母菌的转化效率，常用_______________溶液处理酵母菌细胞。从微生物的特点角度分析，用发酵工程的方法生产乙肝疫苗的优点是_______________。

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已知SARS是由一种RNA病毒感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S 蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康复后的血清中有抗S蛋白的特异性抗体。某研究小组为了研制预防SARS病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下：

(1)实验步骤①所代表的反应过程是________。

(2)步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用限制性内切酶和 酶，后者的作用是将用限制性内切酶切割的 和________连接起来。

(3)如果省略步骤②而将大量扩增的S基因直接导入大肠杆菌，一般情况下，不能得到表达的S蛋白，其原因是S基因在大肠杆菌中不能________，也不能________。

(4)为了检验步骤④所表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性，可用________与________进行抗原—抗体特异性反应实验，从而得出结论。

(5)步骤④和⑥的结果相比，原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白氨基酸序列________（相同，不同），根本原因是________。

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已知SARS是由一种RNA病毒感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康复后的血清中有抗S蛋白的特异性抗体。某研究小组为了研制预防SARS病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下：

（1）实验步骤①所代表的反应过程是__________________________________。

（2）步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用限制鞋内切酶和酶，后者的作用出是将限制性内切酶切割的_________和___________连接起来。

（3）如果省略步骤③而将大量扩增的S基因直接导入大肠杆菌，一般情况下，不能得到表达的S蛋白，其原因是S基因在大肠杆菌中不能_____________，也不能_________________________。

（4）为了检验步骤④所表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性，可用_________与___________进行抗原一抗体特异性反应实验，从而得出结论。

（5）步骤④和⑥的结果相比，原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白的氨基序列_____________（相同、不同），根本原因是____________________________________。

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已知SARS是由一种RNA病毒感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康复后的血清中有抗S蛋白的特异性抗体。某研究小组为了研制预防SARS病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下

（1）该实验的目的基因是_______________.实验步骤①所代表的反应过程是____________________。

（2）步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用___________酶和_____酶。

（3）如果省略步骤②而将大量扩增的S基因直接导入大肠杆菌，一般情况下，不能得到表达的S蛋白，其原因是S基因在大肠杆菌中不能________，也不能___________。

（4）为了检验步骤④所表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性，可用____________与_________进行抗原——抗体特异性反应实验，从而得出结论。

（5）步骤④和⑥的结果相比，原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白的氨基酸序列_______（相同、不同），根本原因是_____________________________________________________________。

(6)该实验的原理是___________.⑤常用的方法是______________,导入的细胞常用______________.

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已知SARS是由一种RNA病毒感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康复后的血清中有抗S蛋白的特异性抗体。某研究小组为了研制预防SARS病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下：

（1）实验步骤①所代表的反应过程是　　　　　 　　　　　　　 。

（2）步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用限制性内切酶和　 　　 酶，后者的作用是将限制性内切酶切割的　　　 　　 和　　　 　　 连接起来。

（3）如果省略步骤②而将大量扩增的S基因直接导入大肠杆菌，一般情况下，不能得到表达的S蛋白，其原因是S基因在大肠杆菌中不能　 　　　 ，也不能　　　 　　　　 。

（4）为了检验步骤④所表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性，可用　　　 　　 与　　　 　　 进行抗原——抗体特异性反应实验，从而得出结论。

（5）步骤④和⑥的结果相比，原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白的氨基酸序列　　 　　 （相同、不同），根本原因是　　　　　　　　 　　　　　　　　 。

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流行性乙型脑炎（乙脑）是由乙脑病毒引起的一种中枢神经系统受损的传染病。接种乙脑疫苗是防治乙脑的重要措施之一。科研人员对乙脑减毒活疫苗和乙脑灭活疫苗在机体内的免疫应答机制进行了研究。

（1）乙脑疫苗进入小鼠体内，作为　　　　 刺激B细胞增殖、分化。大部分B细胞分化为　　　　　　 细胞。（2）取健康小鼠分为六组，每组20只，以原液、103、104和105倍稀释的乙脑减毒活疫苗和乙脑灭活疫苗原液对小鼠进行皮下注射获得免疫小鼠，几天后，每组选取10只小鼠抽取血清进行稀释，测量达到标准抗原抗体反应效果的血清稀释倍数，所得平均值见表，以此反映小鼠的抗体水平。实验中自变量为　　　　 。分析可知，两种疫苗都能诱导免疫机制的发生，且随着减毒活疫苗稀释倍数的增加抗体水平　　　　　　 。

（3）研究人员取每组其余10只免疫小鼠进行实际免疫效果的测定。测定时，将注射入小鼠体内，观察14天，记录小鼠的存活数量，结果如图。根据　　　　　　 两组的比较可以推测与灭活疫苗相比，减毒活疫苗可能还存在较强的细胞免疫机制。

（4）为证明（3）的推测，科研人员选取（2）中　　　　　　　　 三组免疫小鼠，从三组小鼠的脾脏中提取效应T细胞，把靶细胞混合培养，4小时后测定靶细胞的　　　　 。若　　　 　　　　 ，则说明上述推测正确。

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