研究人员开展玉米叶绿素含量测定方法的优劣比较，以期为玉米田间大样本叶绿素含量测定提供依据。...

研究人员开展玉米叶绿素含量测定方法的优劣比较，以期为玉米田间大样本叶绿素含量测定提供依据。下面是主要实验步骤和部分结果。试回答有关问题:

（叶绿素提取液配制）　80%丙酮，95%乙醇，丙酮乙醇(1∶1)，丙酮乙醇水(4.5∶4.5∶1)，丙酮甲醇(1∶1)，丙酮甲醇水(4.5∶4.5∶1)

（主要试验步骤）　待玉米幼苗生长至2~3叶期，剪取叶片并剪成2 mm碎条。用研磨法(80%丙酮、95%乙醇)和直接浸提法(6种提取液)提取叶绿素，每种设3个重复。研磨法用滤纸过滤、洗涤，定容25 mL，立即测定色素液的吸光值。浸提在黑暗中进行，并不时摇动约14 h后，定容，测定吸光值，在放置4 h后再测定一次吸光值。计算叶绿素a(chl a)和叶绿素b(chl b)的相对含量，结果如下表。

(1)实验选择长2~3叶期的幼苗叶片，其原因是____。

(2)“研磨”时除需要加入相应溶剂外，还要加入的试剂有____。“浸提”在黑暗中进行的目的是____。

(3)结果表明，叶绿素在丙酮中的溶解度比在乙醇中____，单独使用丙酮或乙醇浸提速度比两种溶剂混合液提取效果____。浸提时间延长主要影响____的含量，该种色素的提取速度及其稳定性是叶绿素提取的关键。

(4)混合液浸提时，含有甲醇的混合液浸提速度快，但这种混合液浸提的不足之处是____。综合本研究，叶绿素提取的最佳浸提试剂是____。

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玉米矮化病毒能显著抑制玉米的生长，感染这种病毒的玉米植株会非常矮小。研究发现该病毒能抑制玉米赤霉素的合成，请你设计实验验证此结论。实验中不能用化学方法测定植株中赤霉素的含量。

请补充完善实验步骤：

第一步：选取长势基本相同的_________玉米幼苗若干株，将其平均分成甲、乙两组。

第二步：对甲组幼苗___________________；乙组幼苗_________________，并在相同且适宜的条件下培养。

第三步：一段时间后___________________________________。

预期实验结果及结论：_______________________________，说明该病毒能抑制玉米赤霉素的合成。

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丛枝菌根是一种真菌，某实验小组为了研究丛枝菌根感染对玉米光合速率的影响，在不同温度下比较了丛枝菌根感染对玉米的叶绿素含量、气孔导度和胞间CO2浓度的影响结果如下表。请回答下列问题：

(1)植物细胞中的叶绿素分布在___________，根据表格中数据可知低温会导致叶绿素的含量降低，原因是_________________________________。

(2)比较表格中的气孔导度和胞间CO2浓度的相关数据，可知丛枝菌根能___________(填“提高”或“降低”)玉米的净光合速率原因是_________________________________。

(3)根据表格中数据可推测，在弱光照条件下适应能力更强的是_____________________(填“被丛枝菌根感染的玉米”或“未被丛枝菌根感染的玉米”)。

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南通某中学生物兴趣小组进行了阳生植物和阴生植物叶片中叶绿素含量比较的实验，主要过程及结果如下。请回答：

（实验材料）阳生植物：美洲合欢、月季；阴生植物：喜荫花、沿阶草。

（叶绿素含量测定原理）叶绿素a、叶绿素b的吸收光谱不同（如图1),叶绿素a、叶绿素b在红光区最大吸收峰的波长分别是665nm、649nm。

（主要实验步骤及结果）

步骤1取四种材料的新鲜叶片、剪碎（避开主叶脉），各取O.lg碎叶片分别置于4支20mL的比色管中，加入15mL萃取液（丙酮酒精=1:1)，避光浸泡24h，获得色素提取液。

步骤2用分光光度计在665nm和649nm波长下分别测定色素提取液的吸光值，并根据吸光值计算叶绿素含量，结果如图2。

(1)步骤1中，萃取液的作用是____；“避光”的原因是____;浸泡足够长时间（24h)的目的是____。

(2)据图1可知，叶绿素a、叶绿素b在蓝紫光区的最大吸收峰值比红光区高，但不选择蓝紫光区最大吸收峰的波长测定色素吸光值.其原因是____。

(3)据实验结果可知，与阳生植物相比，阴生植物叶片中叶绿素a与叶绿素b的比值较____，结合图1从生物适应环境的角度分析.其意义是____。

(4)若对月季进行适当遮光处理，其叶片中叶绿素含量会____，以适应弱光环境。

(5)测定叶片中叶绿素含量时，采用“剪碎→研磨→过滤”的方法获取色素提取液，会导致色素提取不充分，其原因是____。

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现有研究者设计了一个简单有效地测定植物细胞细胞液浓度的实验方法。实验步骤及结果如下表，请依据资料回答:

说明：1." +" 表示添加,"-”表不添加。2.加入的亚甲基蓝结晶极小，溶解后会使溶液呈蓝色，对溶液浓度影响忽略不计3.如果a管溶液浓度上升，蓝色小滴在b管的无色溶液中将下沉；如果a管溶液浓度下降，b中蓝色小滴将上浮；如果a管溶液浓度不变，b中蓝色小滴将均匀扩散。

（1）本实验的实验原理___________________________________________。

（2）该实验的自变量是________________，观察指标是___________，实验结论是_________________________________________________。

（3）用某组溶液操作到第3步时，通过显微现察该组叶片细胞发现有_______________________现象，即可预测b中的蓝色小滴会上浮。若发现这5组的实验结果是蓝色小滴均上浮，实验应如何改进？ __________________________

（4）该实验操作应控制在15min内完成，否则________。

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研究表明，叶绿素有助于人类多种疾病的治疗，人类获得叶绿素的主要途径是从蔬菜中获得，为了生产蔬莱提供相应参数，科研人员以绿色生菜为实验材料进行了相关实验，结果见下表：

回答下列问题：

（1）请为该实验拟定一个研究课题________________________________。该实验中白光处理组起________________________作用。

（2）该实验中要提取色素以测定色素含量，在提取色素时要在剪碎的新鲜叶片中加入____、______和丙酮，其中丙酮的作用是______________。

（3）根据实验结果要保证绿色生菜的品质和产量，最佳的处理条件是___________，判断的依据是_________________________________________________________。

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研究人员发现一株淡绿叶色水稻突变体，测定并比较突变体与野生型的一些指标，得到下图和表中结果。据此作出的推测不合理的是（　　 ）

A.叶绿素和类胡萝卜素含量降低可能导致突变体叶色淡绿

B.突变体光合速率较高的原因是色素中叶绿素所占比例升高

C.气孔开放程度增加导致突变体的暗反应速率高于野生型

D.在相同光强下突变体的光反应速率可能高于野生型

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研究人员发现一种水稻突变体，通过相同且适宜的条件下测定并比较突变体与相应野生型水稻的一些指标，结果如下图和表所示。请回答问题：

（1）图中测定的光合速率为单位时间、单位叶面积植物对CO2的_______速率。正常情况下，CO2是通过________________循环逐步形成三碳糖的，该过程对温度的变化比光反应敏感的主要原因是参与该过程有关酶的________________更多。

（2）要测定两种植株叶片中的色素含量，可将经烘干处理的叶片剪碎、加入相应的物质研磨、___得到色素提取液，此后经_______处理再定量测出各类色素的含量。

（3）从图表分析可知，突变体和野生型的_______和呼吸速率相近；在相同光强度下，突变体的光反应速率___________（填“大于”、“等于”或“小于）野生型，出现上述结果的主要原因是_________。

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研究人员发现一种水稻突变体，通过相同且适宜的条件下测定并比较突变体与相应野生型水稻的一些指标，结果如下图和表所示。请回答问题：

（1）图中测定的光合速率为单位时间、单位叶面积植物对CO2的_______速率。正常情况下，CO2是通过________________循环逐步形成三碳糖的，该过程对温度的变化比光反应敏感的主要原因是参与该过程有关酶的________________更多。

（2）要测定两种植株叶片中的色素含量，可将经烘干处理的叶片剪碎、加入相应的物质研磨、___得到色素提取液，此后经_______处理再定量测出各类色素的含量。

（3）从图表分析可知，突变体和野生型的_______和呼吸速率相近；在相同光强度下，突变体的光反应速率___________（填“大于”、“等于”或“小于）野生型，出现上述结果的主要原因是_________。

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科研人员运用两种方法分离杜氏盐藻、球等鞭金藻细胞的叶绿体，并提取叶绿体DNA，主要实验步骤和结果如下，其中SDS能瓦解生物膜，氯仿异戊醇不溶于水且密度均大于水，DNA不溶于氯仿异戊醇。请回答：

步骤①收集藻细胞：将两种藻细胞培养液进行预处理后，离心取沉淀物。

步骤②获取叶绿体粗：提物4℃下分别破碎两种藻细胞后，再分别用差速离心法和密度梯度离心法分离获取叶绿体粗提物(原理示意图如下)。

步骤③去除杂质DNA：向步骤②的叶绿体粗提物中加入DNA酶、缓冲液，37℃静置15min后，离心取沉淀物。

步骤④粗提叶绿体DNA：向步骤③获得的叶绿体中加入缓冲液、SDS、蛋白酶K，60℃水浴2h，离心取上清液。再向上清液中加入氯仿异戊醇，在4℃下离心取　？　。

步骤⑤纯化叶绿体DNA：向粗提溶液中加入3mol·L－1醋酸钠及预冷的95%酒精，低温静置1h后，离心弃上清液。加预冷的95%酒精、离心洗涤1～2次，取沉淀物用超纯水溶解。

步骤⑥DNA纯度和浓度：测定利用分光光度法测量并计算叶绿体DNA的纯度及浓度，结果如上右表(表中OD260/OD280值越接近1.8说明DNA越纯)。

(1)步骤①中预处理时应将藻液置于____处24h，以降低叶绿体中淀粉粒的含量，有利于分离得到完整叶绿体。步骤②在利用差速离心法分离获得叶绿体前，需要先在____(填“低于”“等于”或“高于”)4 000r·min－1下离心去除细胞壁、核物质等。

(2)步骤③依据的主要原理是____，去除的“杂质DNA”来源于____。

(3)步骤④中离心后应取____。步骤⑤中用95%的冷酒精离心洗涤过程要注意动作轻缓，其目的是____________________________________________________________。

(4)根据实验结果分析，____法较适于分离提取叶绿体DNA，原因是_________________________________________。

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