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现代生物技术在医药、农业等领域都有广泛应用。回答下列问题：
（1）将人体中B蛋白基因导入大肠杆菌，以生产药物B蛋白。
①由于人体基因的转录初始产物需切除部分序列，才能加工成为成熟的mRNA，因此直接将从人类基因文库中获取的B蛋白基因导入大肠杆菌无法正常表达。可采用________的方法合成B蛋白基因，以解决这一问题。
②导入过程所用载体pUC19质粒如图所示，LacZ基因表达产物能水解X-gal，使菌落呈蓝色，不能水解X-gal的菌落呈白色。已知三种限制性核酸内切酶X、Y、Z所识别的序列分别是C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC（↓表示剪切点）。为便于筛选导入重组质粒的大肠杆菌，应选用的限制性核酸内切酶是__________，并且在培养基中加入________，接种培养后选择________色菌落。
③筛选得到成功导入B蛋白基因的大肠杆菌菌株，为检验B蛋白基因是否表达，可以用含放射性标记的B蛋白基因单链作为探针，检测受体菌有无__________。
（2）现代生物技术应用于农作物育种，也取得可喜成绩。利用基因工程育种技术可培育转基因农作物。在此过程中，为成功获得新植株，应选择性状优良、________作为受体材料。除此之外，影响受体材料能否成功再生出新植株的因素还有光温条件、植物生长调节剂及__________的配比。利用多倍体育种技术或者__________技术则可培育异源多倍体。
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目前现代生物技术迅速发展井被广泛应用于医疗卫生领域，如生物制药、器官移植、基因治疗等。请回答下列问题：
⑴研究发现，人体缺乏α-抗胰蛋白酶易患肺气肿，科研人员将α-抗胰蛋白酶基因与___________等调控组件重组构建基因表达载体，然后通过___________技术，导入羊的受精卵中，成功培育出了转基因羊，其乳汁中含有人类的α-抗胰蛋白酶，可用于治疗肺气肿。
⑵机体对移植的异体细胞、组织或器官会产生免疫排斥反应，通过对患者的ES细胞进行___________，培育出人遣组织器官，进而解决免疫摔斥问題。ES细胞主要来源于早期胚胎的___________细胞或原始性腺。
⑶P53基因是人体内的一种抑癌基因，将P53基因与腺病毒拼装而成的重组病毒导入人体可用于治疗肿瘤。拼装该重组病毒所需的工具酶有_________。用上述重组病毒治疗肿瘤，二次治疗时，该重组病毒常常无法或很少能进入靶细胞，从而影响治疗效果，原因是________。
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伴随着生命科学的新突破，现代生物技术已经广泛地应用于工业、农牧业、医药、环保等众多领域，产生了巨大的经济和社会效益。请回答下列生物技术方面的问题：
（1）工业生产上通常采用微生物发酵技术获得果胶酶，选用的微生物通常是________，在提取细胞内的酶时，先将组织细胞________制取粗酶液，再进一步获得相应的酶。
（2）微生物一般来自土壤，在乎板培养基上分离纯化细菌常用的接种方法是、
____和____________等。
（3）微生物在果酒、果醋、腐乳、泡菜等食品加工方面应用广泛，其中与果醋、泡菜制作密切相关的微生物分别是________。
（4）下图为提取胡萝卜素的粗品通过纸层析鉴定的结果示意图，请据图回答问题：
①该图所示的鉴定方法的基线一般距底边________cm。
②A、B、C、D四点中，属于标准样品的样点是________。点样的要求是____________。在图中的层析谱中，图中②代表的物质是________。
③该层析的目的是________，而“叶绿体中色素的提取和分离”的实验中层析的目的是________。
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[生物——选修3：现代生物科技专题]
动植物细胞工程在农业生产、医药卫生等领域有着广泛的用途。回答下列问题。
（1）在将两种植物细胞进行杂交之前，需要用__________酶进行处理，若将处理后的细胞放入较高浓度的蔗糖溶液中，会发生__________。诱导两种植物细胞融合可以采用物理或化学的方法进行，常用的物理方法有__________________（写2种即可）。
（2）融合的细胞形成愈伤组织，在愈伤组织的培养过程中，当生长素和细胞分裂素的比值___________（填“高”或“低”）时，有利于丛芽的分化；通过上述过程获得杂种植株依据的原理是___________。
（3）在制备单克隆抗体的过程中，若融合的结果随机出现多种不同的杂交细胞，就需要在特定的培养基上进行筛选，从而得到___________细胞。单克隆抗体与传统方法获得的抗体相比，具有___________的特点，因此广泛用于疾病的诊断等方面。
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回答下列有关微生物和酶工程的问题。（10分）
枯草芽孢杆菌盛产蛋白酶，后者在生物医药和日用化工等生产领域具有重要的经济价值，且已大规模产业化应用。
（1）在培养包括枯草芽孢杆菌在内的异养型微生物时，培养基营养成分应包括水和_______________（用序号组合回答）。
①淀粉 ②蛋白质 ③生长因子 ④葡萄糖 ⑤无机盐
为筛选枯草芽孢杆菌的蛋白酶高产株，将分别浸过不同菌株(a~e)的分泌物提取液及无菌水（f） 的无菌圆纸片置于含某种高浓度蛋白质的平板培养基表面；在37℃恒温箱中放置2~3天，结果如图17.
（2）大规模产业化首选的菌株是_______________；菌株b提取物周围没有形成明显清晰区的原因是_______________。
图18 显示枯草芽孢杆菌的蛋白酶和其它酶的热稳定性数据，即酶在不同温度下保温足够长的时间，再在酶活性最高的温度下测其酶活性。在该蛋白酶的工业化生产过程中，通常需对发酵液在60~70℃保温一定时间，再制备酶制剂。
（3）在60~70℃保温一定时间的作用是__。
A.诱导蛋白酶的热稳定性 B.有利于发挥蛋白酶的最佳活性
C.裂解枯草芽孢杆菌细胞 D.大幅度降低发酵液中其他酶的活性
（4）枯草芽孢杆菌蛋白酶制备的合理工艺步骤应为_____(选择正确的序号并排序)。
①过滤 ②干燥 ③破碎 ④浓缩
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回答下列有关微生物和酶工程的问题。
枯草芽孢杆菌盛产蛋白酶，后者在生物医药和日用化工等生产领域具有重要的经济价值，且已大规模产业化应用。
（1）在培养包括枯草芽孢杆菌在内的异养型微生物时，培养基营养成分应包括水和_______________（用序号组合回答）。
①淀粉 ②蛋白质 ③生长因子 ④葡萄糖 ⑤无机盐
为筛选枯草芽孢杆菌的蛋白酶高产株，将分别浸过不同菌株(a~e)的分泌物提取液及无菌水（f） 的无菌圆纸片置于含某种高浓度蛋白质的平板培养基表面；在37℃恒温箱中放置2~3天，结果如图17。
（2）大规模产业化首选的菌株是_______________；菌株b提取物周围没有形成明显清晰区的原因是_______________。
图18 显示枯草芽孢杆菌的蛋白酶和其它酶的热稳定性数据，即酶在不同温度下保温足够长的时间，再在酶活性最高的温度下测其酶活性。在该蛋白酶的工业化生产过程中，通常需对发酵液在60~70℃保温一定时间，再制备酶制剂。
（3）在60~70℃保温一定时间的作用是__。
A.诱导蛋白酶的热稳定性 B.有利于发挥蛋白酶的最佳活性
C.裂解枯草芽孢杆菌细胞 D.大幅度降低发酵液中其他酶的活性
（4）枯草芽孢杆菌蛋白酶制备的合理工艺步骤应为_____(选择正确的序号并排序)。
①过滤 ②干燥 ③破碎 ④浓缩
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谷氨酸在食品、医药和农业生产上有广泛的应用，现常用野生型诱变得到的生物素营养缺陷型谷氨酸棒状杆菌（自身不能合成生物素，在缺乏生物素的培养基上不能生长繁殖）发酵的方法生产谷氨酸。回答下列问题：
（1）为筛选出生物素营养缺陷型谷氨酸棒状杆菌进行了如下实验：①将紫外线处理的野生型谷氨酸棒状杆菌接种到CM培养基（满足野生型和营养缺陷型营养需求的培养基）上；②待长出菌落后把每个菌落的菌体分别用接种针接种到CM培养基和MM培养基（仅满足野生型营养需求的培养基）的相应位置进行培养。结果如下图：
CM 培养基和MM培养基比较，相同的营养成分除了水和无机盐外还包括_________________，特有的成分是_________；①中使用的接种方法是____________；②中使用接种针接种要注意的问题是________（答出一点即可）；图中CM培养基上有_______个菌落中的细菌属于生物素营养缺陷型谷氨酸棒状杆菌，判读的依据是__________________。
（2）在利用生物素营养缺陷型谷氨酸棒状杆菌发酵生产谷氨酸时，需要不断向液体培养基通入无菌空气和进行搅拌，搅拌的目的是__________________。
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谷氨酸在食品、医药和农业生产上有广泛的应用，现常用野生型诱变得到的生物素营养缺陷型谷氨酸棒状杆菌（自身不能合成生物素，在缺乏生物素的培养基上不能生长繁殖）发酵的方法生产谷氨酸。回答下列问题：
（1）为筛选出生物素营养缺陷型谷氨酸棒状杆菌进行了如下实验：①将紫外线处理的野生型谷氨酸棒状杆菌接种到CM培养基（满足野生型和营养缺陷型营养需求的培养基）上；②待长出菌落后把每个菌落的菌体分别用接种针接种到CM培养基和MM培养基（仅满足野生型营养需求的培养基）的相应位置进行培养。结果如下图：
CM 培养基和MM培养基比较，相同的营养成分除了水和无机盐外还包括_________________，特有的成分是_________；①中使用的接种方法是____________；②中使用接种针接种要注意的问题是________（答出一点即可）；图中CM培养基上有_______个菌落中的细菌属于生物素营养缺陷型谷氨酸棒状杆菌，判读的依据是__________________。
（2）在利用生物素营养缺陷型谷氨酸棒状杆菌发酵生产谷氨酸时，需要不断向液体培养基通入无菌空气和进行搅拌，搅拌的目的是__________________。
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目前全世界生物技术药物中，使用生物工程生产的已超过80%，如蛋白质、单克隆抗体、疫苗等，动物细胞工程、基因工程涉及的领域非常广泛。请回答下列问题：
（1）用于动物细胞培养的培养基中通常需要加入____________等天然成分，但由于其含有许多未知成分，对研究结果有所影响，因此，可以采取添加一些已知的促进____________的物质代替其作用。
（2）细胞培养时还需气体环境，其中CO2的作用是____________。培养基中添加一定量的__________以防止培养过程中微生物的污染。
（3）单克隆抗体制备过程中，融合、筛选出杂交细胞后需要经过____________和____________才能得到符合要求的杂交瘤细胞。
（4）应用于核移植的供体细胞一般选用传代10代以内的细胞，原因是____________。
（5）基因工程为一般药物很难治疗的遗传病提供了最有效的治疗手段：基因治疗。基因治疗的思路是________________________。
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目前全世界生物技术药物中，使用生物工程生产的已超过80%，如蛋白质、单克隆抗体、疫苗等，动物细胞工程、基因工程涉及的领域非常广泛。请回答下列问题：
（1）用于动物细胞培养的培养基中通常需要加入____________等天然成分，但由于其含有许多未知成分，对研究结果有所影响，因此，可以采取添加一些已知的促进____________的物质代替其作用。
（2）细胞培养时还需气体环境，其中CO2的作用是____________。培养基中添加一定量的__________以防止培养过程中微生物的污染。
（3）单克隆抗体制备过程中，融合、筛选出杂交细胞后需要经过____________和____________才能得到符合要求的杂交瘤细胞。
（4）应用于核移植的供体细胞一般选用传代10代以内的细胞，原因是____________。
（5）基因工程为一般药物很难治疗的遗传病提供了最有效的治疗手段：基因治疗。基因治疗的思路是________________________。