甲、乙图为两种常见的平板划线法:连续划线法和四区划线法,前者适用于纯化菌较少的样品,后者适宜于纯化菌较多的样品。据图回答:
(1)土壤是微生物生活大本营,某兴趣小组欲从土壤中分离枯草芽孢杆菌以制备某碱性蛋白酶，宜选择图____所示方法划线培养。若要分离和统计枯草芽孢杆菌,则应采用____法。
(2)图乙中依次进行四区划线,四区的面积要求为C<D<E<F,F区面积最大有利于获得____。注意F区的划线不要与____(填字母)区相连。
(3)在制备甲所需培养基时,当温度降至大约为____时适合倒平板；乙培养基在划线时接种环至少要灼烧____次。
(4)若应用固定化技术提高上述碱性蛋白酶的利用率,且减少产物中的杂质,则通常采用____法。
(5)在最适温度下,一定时间内,分解1 mL10%脱脂奶粉的酶量为一个酶活力单位(U)。科研小组将不同来源的碱性蛋白酶分成七组进行活力检测,结果如上图丙所示。据图分析,酶催化能力最强的是____组。
高三生物非选择题中等难度题
甲、乙图为两种常见的平板划线法:连续划线法和四区划线法,前者适用于纯化菌较少的样品,后者适宜于纯化菌较多的样品。据图回答:
(1)土壤是微生物生活大本营,某兴趣小组欲从土壤中分离枯草芽孢杆菌以制备某碱性蛋白酶，宜选择图____所示方法划线培养。若要分离和统计枯草芽孢杆菌,则应采用____法。
(2)图乙中依次进行四区划线,四区的面积要求为C<D<E<F,F区面积最大有利于获得____。注意F区的划线不要与____(填字母)区相连。
(3)在制备甲所需培养基时,当温度降至大约为____时适合倒平板；乙培养基在划线时接种环至少要灼烧____次。
(4)若应用固定化技术提高上述碱性蛋白酶的利用率,且减少产物中的杂质,则通常采用____法。
(5)在最适温度下,一定时间内,分解1 mL10%脱脂奶粉的酶量为一个酶活力单位(U)。科研小组将不同来源的碱性蛋白酶分成七组进行活力检测,结果如上图丙所示。据图分析,酶催化能力最强的是____组。
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甲、乙图为两种常见的平板划线法:连续划线法和四区划线法,前者适用于纯化菌较少的样品,后者适宜于纯化菌较多的样品。据图回答:
(1)土壤是微生物生活大本营,某兴趣小组欲从土壤中分离枯草芽孢杆菌以制备某碱性蛋白酶，宜选择图____所示方法划线培养。若要分离和统计枯草芽孢杆菌,则应采用____法。
(2)图乙中依次进行四区划线,四区的面积要求为C<D<E<F,F区面积最大有利于获得____。注意F区的划线不要与____(填字母)区相连。
(3)在制备甲所需培养基时,当温度降至大约为____时适合倒平板；乙培养基在划线时接种环至少要灼烧____次。
(4)若应用固定化技术提高上述碱性蛋白酶的利用率,且减少产物中的杂质,则通常采用____法。
(5)在最适温度下,一定时间内,分解1 mL10%脱脂奶粉的酶量为一个酶活力单位(U)。科研小组将不同来源的碱性蛋白酶分成七组进行活力检测,结果如上图丙所示。据图分析,酶催化能力最强的是____组。
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某碱性蛋白酶一般利用枯草芽孢杆菌生产。某科研小组对碱性蛋白酶相关性质进行测试，结果如下图甲、乙所示。图丙、丁为两种常见的平板划线法:连续划线法和四区划线法，前者适用于纯化菌较少的样品，后者适用于纯化菌较多的样品。请据图回答：
（1）由图甲、乙可知，碱性蛋白酶发挥作用的适宜条件为__________________。
（2）图丁中依次进行四区划线，四区的面积要求为C＜D＜E＜F，F区面积最大有利于获得_________。注意F区划线不要与_________（填字母）区相连。
（3）土壤是微生物生活的大本营，某兴趣小组欲从土壤中分离枯草芽孢杆菌，宜选择图_________所示的方法划线培养。若要分离和统计枯草芽孢杆菌，则应采用______________方法培养。
（4）在制备丙培养基时，当温度大约为__________时适合倒平板。丁培养基在划线时接种环至少要灼烧________次。
（5）若应用固定化技术提高该酶的利用率，减少产物中的杂质，则应采用________法。
（6）在一定温度下（35℃），一定时间内，分解1mL10%脱脂奶粉的酶量为一个酶活力单位（U）。科研小组将不同来源的碱性蛋白酶分成七组进行活力检测，结果如图戊所示。 据图分析，酶催化能力最强的是________组。
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平板划线法和稀释涂布平板法是纯化微生物的两种常用方法，下列描述正确的是
A．都要将菌液进行一系列的梯度稀释
B．平板划线法是将不同稀释度的菌液通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作
C．稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基进行培养
D．都会在培养基表面形成单个的菌落
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平板划线法是通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。如图是平板划线在牛肉膏蛋白胨固体培养基上纯化大肠杆菌示意图，划线的顺序为1→2→3→4→5，下列叙述正确的是（ ）
A.划线操作须在火焰上进行
B.只能在5区域中才可以得到所需菌落
C.在5区域划线后，要对接种环进行灭菌
D.操作完后，将培养皿倒置于25℃恒温箱中培养
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用平板划线法或稀涂布平板法都可以纯化大肠杆菌,二者的共同点是
A. 都可以用固体培养基或液体培养基
B. 都需要使用接种环进行接种
C. 接种时都需要在酒精灯的火焰旁进行
D. 都可以用来统计样品中的活菌数
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运用所学知识回答下列与生物技术实践相关的问题。
（1）某科普实验小组欲从石油污染的水域中筛选出能高效降解石油的微生物。请回答：
①从水体中分享纯化菌种时，若要获得纯净的菌株，常采用平板划线的方法进行接种，此过程所用的接种工具是＿＿＿，操作时采用＿＿＿灭菌的方法。
②在筛选过程中，应将稀释接种于以石油为唯一碳源的固体培养基上，在微生物培养前，需对培养基进行＿＿＿，该培养基从功能上看属于＿＿＿＿
（2）进行月季花药离体培养时，选择合适发育时期的花粉能提高诱导成功率，确定花粉发育时期最常用的染色方法是＿＿＿＿＿。花药经脱分化产生胚状体还是愈伤组织主要取决于培养基中＿＿＿＿
（3）葡萄皮、籽中含有原花青素、葡萄皮红素和大量葡萄风味物质等，这些物质易溶于乙醇、乙酸乙酯中，因此常采用＿＿＿＿法来分离提取，还可以用＿＿＿＿和蒸馏等提取什物芳香油的方法。
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回答下列（一）、（二）小题：
（一）平板浇注法是常用的菌种分离纯化方法，是将待分离的样品用无菌水作梯度系列稀释后，取合适稀释度的少量菌悬液加至无菌培养皿中，立即倒入融化的固体培养基，经充分混匀后，置室温下培养。下图是研究人员用平板浇注法从土壤样品中分离以工业废甲醇为碳源的酵母菌，并进行大量培养的操作流程，请回答下列问题：
（1）为分离培养该酵母菌，配制培养基时应以___________为唯一碳源，按照培养基配方准确称量各组分，将其溶解、定容后，调节培养基的pH，及时对培养基进行分装，并进行_____________灭菌。
（2）取步骤②中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中，在步骤③中将温度约__________（在25℃、50℃或80℃（3个中选择）的培养基倒入培养皿混匀，冷凝后倒置培养。经培养，可在培养基的 _____________部位出现许多单菌落。
（3）挑取平板中长出的单菌落，按步骤④所示进行划线分离。下列叙述不合理的是_______。
A．为保证无菌操作，接种环使用前必须进行灼烧灭菌
B．划线时应避免划破培养基表面，以免不能形成正常菌落
C．挑取菌落时，应挑取多个菌落，分别测定酵母细胞中甲醇的含量
D．可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度，获得甲醇高耐受株
（4）步骤⑤中，为使酵母数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和____________供应。为监测酵母的细胞密度，将发酵液稀释1000倍后，用25×16（2mm×2mm×0．lmm）型血细胞计数板计数5个中格中的细胞数，细胞的个数应不少于_____________，才能达到每毫升至少含2×109个细胞的预期密度。
（二）回答与基因工程及其应用有关的问题：
（1）博耶（H．Boyer）和科恩（S．Coben）将非洲爪蟾核糖体蛋白基因与质粒重组后导入大肠杆菌细胞中进行了表达，该研究除证明了质粒可以作为载体外，还证明了_____________________（答出两点即可）。
（2）体外重组的质粒可通过Ca2+参与的方法导入大肠杆菌细胞；而体外重组的噬菌体DNA通常需与_________组装成完整噬菌体后，才能通过侵染的方法将重组的噬菌体DNA导入宿主细胞，在细菌、心肌细胞、叶肉细胞中，可作为重组噬菌体宿主细胞的是___________。
（3）真核生物基因（目的基因）在大肠杆菌细胞内表达时，产生出的蛋白质可能会被降解。为防止大肠杆菌内的蛋白质被降解，在实验中应选用___________的大肠杆菌作为受体细胞。在提取纯化蛋白质的过程中应添加________，防止目的蛋白质被降解。
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1963年诺和诺德公司向洗涤剂中加入碱性蛋白酶，推出了第一款加酶洗衣粉。碱性蛋白酶一般利用枯草芽孢杆菌生产。图甲、乙为某科研小组对碱性蛋白酶相关性质进行测试的结果。图丙、丁为两种常见的平板划线法；连续划线法和四区划线法，前者适用于纯化菌种较少的样品，后者适用于纯化菌种较多的样品。请回答下列问题：
（1） 由图甲、乙可知，碱性蛋白
酶发挥作用的适宜条件为____________。
（2） 图丁中依次进行四区划线，四区的面积要求为C＜D＜E＜F，F区面积最大的原因是___________。每次划线后都要________接种环，注意F区划线不要与________（填字母）区相连。
（3） 某兴趣小组欲从土壤中分离枯草芽孢杆菌，宜选择图________所示的方法划线培养，分离得到的纯化单菌落属于________（填“种群”或“群落”）。
（4） 碱性蛋白酶是枯草芽孢杆菌生长后期向细胞外分泌的一种酶，与该酶合成有关的细胞器是______。若欲应用固定化技术提高该酶的利用率，减少产物中的杂质，则应采用___________方法。
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若长期使用某种除草剂（有机物），会对土壤造成严重污染。如图是从土壤中分离出能降解该除草剂菌株的实验过程。请回答下列问题：
选择土壤→土壤样品
选择培养
划线纯化
获得菌种
（1）为了获取能降解该除草剂的菌株，选择的土壤样品应来自____________。
（2）图中A过程所用的培养基中不能添加其他有机物，理由是____________。若图中B过程在一个平板的5个区域内划线，则划线工具需灼烧灭菌____________次。
（3）图中A、B、C过程所用培养基中应含有四类营养成分，即_______________________。
（4）若要推算该土壤样品中的细菌含量，应采用____________法进行接种。先将1 mL 土壤溶液稀释100倍，然后随机选取6个灭菌处理的平板，其中4个平板上分别接入 0.1 mL稀释液，2个平板未接入稀释液，经适当培养后，6个平板上的菌落数分别为52、49、51、48、0和0。
①由未接入稀释液的平板所长菌落情况，可得出的结论是________________________。
②经计算可得出每毫升土壤溶液中的活菌数为____________个，该结果往往偏小，原因是____________。
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