利用某高致病性病毒特异性的VP40抗原蛋白来制备单克隆抗体的流程图如下,请回答:
(1)过程①利用质粒构建表达载体,质粒的来源主要是___________,质粒能够在受体细胞中________,是其作为运载体的原因之一。
(2)过程②用Ca2+处理大肠杆菌,使其处于___________。在培养基中加入四环素,能获得含有目的基因的受体菌,原因是___________。可以利用___________检测VP40基因是否进入大肠杆菌。
(3)用特定的选择性培养基筛选出杂交瘤细胞,杂交瘤细胞的特点是___________;对杂交瘤细胞还需进行___________培养和抗体检测,最终获得单克隆抗体。
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利用某高致病性病毒特异性的VP40抗原蛋白来制备单克隆抗体的流程图如下,请回答:
(1)过程①利用质粒构建表达载体,质粒的来源主要是___________,质粒能够在受体细胞中________,是其作为运载体的原因之一。
(2)过程②用Ca2+处理大肠杆菌,使其处于___________。在培养基中加入四环素,能获得含有目的基因的受体菌,原因是___________。可以利用___________检测VP40基因是否进入大肠杆菌。
(3)用特定的选择性培养基筛选出杂交瘤细胞,杂交瘤细胞的特点是___________;对杂交瘤细胞还需进行___________培养和抗体检测,最终获得单克隆抗体。
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疫苗和抗体已被广泛应用于预防与诊疗传染性疾病的过程,已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒,该病毒表面的A蛋白为主要抗原。疫苗的生产和抗体的制备流程如下图所示,请回答下列问题:
(1)③构建A基因重组载体时,启动子是重新构建的,它应该能被受体细胞的________所识别,以便于其催化转录过程。
(2)下图为A基因的结构示意图,已知Ⅱ区的碱基数是2000个,其中阴影区域碱基数是800个,空白区域中G和C的总数共有400个,则由该区域转录产生的能指导蛋白质合成的mRNA中A和U的总数是_______个。
(3)在给小鼠皮下注射A蛋白质时,要重复注射几次的目的是通过二次免疫,增加小鼠体内的_______数目。过程⑥的实质为_______。
(4)在将X进行扩大培养前,至少需要经过_______次筛选,其中包括_______和_______,扩大培养的原理是_______。
(5)对健康人进行该传染病免疫预防时,可选用图中基因工程生产的_______来制备疫苗。对该传染病疑似患者确诊时,可以从疑似患者体内分离出病毒与已知病毒进行核酸序列比较,或用图中的_______与分离中的病毒进行特异性检测。
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已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒,该病毒表面的A蛋白为主要抗原。疫苗的生产和抗体的制备流程如下图所示。请回答下列问题:
(1)过程①代表的是____________,过程③构建A基因重组载体时,启动子和终止子是重新构建的,它们应该能被受体细胞的__________所识别,以便于其催化转录过程。
(2)上图为A基因的结构示意图,已知Ⅱ区的碱基数是2 000个,其中阴影区域碱基数是800个,空白区域中G和C的总数共有400个,则由该区域能指导蛋白质合成的片段转录产生的mRNA中A和U总数是________个。
(3)在给小鼠皮下注射A蛋白时,要重复注射几次的目的是通过二次免疫,增加小鼠体内的______________数目。
(4)在将X进行扩大培养前,至少需要经过2次筛选,第一次是将____________________筛选出来,第二次是将____________________________筛选出来。
(5)对健康人进行该传染病免疫预防时,可选用图中基因工程生产的__________来制备疫苗。对该传染病疑似患者确诊时,可以从疑似患者体内分离出病毒与已知病毒进行核酸序列比较,或用图中的__________________与分离出的病毒进行特异性检测。
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利用单克隆抗体特异的作用于埃博拉病毒侵染蛋白(VP40蛋白)是一种战胜埃博拉病毒的有效途径。请据图回答:
(1)过程①中选用两种限制酶切割,使目的基因的两端产生不同的黏性末端,这样处理的目的是___________。
(2)图中过程②需要用___________处理大肠杆菌,原因是_____________________。
(3)在基因表达载体中,VP40蛋白基因的首端必须含有___________,其作用是能够被___________识别和结合,从而保证③顺利完成。
(4)为检测VP40基因是否成功表达,可以采用___________技术。VP40蛋白抗体能够战胜埃博拉病毒的原因是______________________。
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利用单克隆抗体特异的作用于埃博拉病毒侵染蛋白(VP40蛋白)是一种战胜埃博拉病毒的有效途径。请据图回答:
(1)过程①中选用两种限制酶切割,使目的基因的两端产生不同的黏性末端,这样处理的目的是___________。
(2)图中过程②需要用___________处理大肠杆菌,原因是_____________________。
(3)在基因表达载体中,VP40蛋白基因的首端必须含有___________,其作用是能够被___________识别和结合,从而保证③顺利完成。
(4)为检测VP40基因是否成功表达,可以采用___________技术。VP40蛋白抗体能够战胜埃博拉病毒的原因是______________________。
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利用单克隆抗体特异的作用于埃博拉病毒侵染蛋白(VP40蛋白)是一种战胜埃博拉病毒的有效途径。请据图回答:
(1)过程①中选用两种限制酶切割,使目的基因的两端产生不同的黏性末端,这样处理的目的是___________。
(2)图中过程②需要用___________处理大肠杆菌,原因是_____________________。
(3)在基因表达载体中,VP40蛋白基因的首端必须含有___________,其作用是能够被___________识别和结合,从而保证③顺利完成。
(4)为检测VP40基因是否成功表达,可以采用___________技术。VP40蛋白抗体能够战胜埃博拉病毒的原因是______________________。
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利用单克隆抗体特异的作用于埃博拉病毒侵染蛋白(VP40蛋白)是一种战胜埃博拉病毒的有效途径。请据图回答:
(1)过程①中选用两种限制酶切割,使目的基因的两端产生不同的黏性末端,这样处理的目的是___________。
(2)图中过程②需要用___________处理大肠杆菌,原因是_____________________。
(3)在基因表达载体中,VP40蛋白基因的首端必须含有___________,其作用是能够被___________识别和结合,从而保证③顺利完成。
(4)为检测VP40基因是否成功表达,可以采用___________技术。VP40蛋白抗体能够战胜埃博拉病毒的原因是______________________。
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利用单克隆抗体特异的作用于埃博拉病毒侵染蛋白(VP40蛋白)是一种战胜埃博拉病毒的有效途径。请据图回答:
(1)过程①中选用两种限制酶切割,使目的基因的两端产生不同的黏性末端,这样处理的目的是___________。
(2)图中过程②需要用___________处理大肠杆菌,原因是_____________________。
(3)在基因表达载体中,VP40蛋白基因的首端必须含有___________,其作用是能够被___________识别和结合,从而保证③顺利完成。
(4)为检测VP40基因是否成功表达,可以采用___________技术。VP40蛋白抗体能够战胜埃博拉病毒的原因是______________________。
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下图是制备抗埃博拉病毒(EBoV)VP40蛋白单克隆抗体的过程。请据图回答:
(1)埃博拉病毒(EBOV)的遗传物质是RNA,EBOV病毒容易变异的原因是____________。
(2)科研人员利用小鼠的B淋巴细胞与鼠的瘤细胞进行杂交,获得纯净的单一品种抗体,其特点是_________________,可以用此抗体与放射性同位素、化学药物或细胞毒素相结合,制成“_______________ ”,抗击埃博拉病毒(EBOV)。
(3)利用PCR获取目的基因的过程中,反应体系内要加入含有VP40基因的DNA、dNTP、Taq酶和根据________________________合成的引物。
(4)选用EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切的优点是 ___________________________ ;VP40基因进入大肠杆菌细胞,并在大肠杆菌内维持稳定和表达,该过程可称为_____________。
(5)过程⑥常用的不同于植物原生质体融合的促融方法是用_________________处理。
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已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒,该病毒表面的A蛋白为主要抗原,制备抗A蛋白抗体的部分流程如下图。
请回答:
(1)①代表的是______________过程。为获得A基因表达载体,需用__________酶对A基因和运载体进行切割。将A基因表达载体导入动物细胞常用的方法是___________________________。
(2)利用PCR技术扩增A基因时,设计引物序列的主要依据是___________,加入引物的作用是________。
(3)与体内DNA复制相比较,PCR反应要在一定的缓冲溶液中才能进行,并且要严格控制____________等条件。
(4)过程③采用的技术是________________。
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