科研人员为了分离、筛选蓝莓果酒专用酵母来改善蓝莓果酒的品质，进行了如下实验：① 取不同品种...

科研人员为了分离、筛选蓝莓果酒专用酵母来改善蓝莓果酒的品质，进行了如下实验：

① 取不同品种成熟蓝莓制果浆，置于恒温培养箱中自然发酵至产生大量气泡和明显酒味；

② 将蓝莓发酵液梯度稀释后，进行涂布平板操作，每个浓度梯度3个平板，并在恒温下培养2d，根据酵母菌菌落特征挑取单菌落；

③ 将挑取的单菌落扩大培养后，通过平板划线法分离纯化并保存；

④ 检测筛选菌株的发酵性能，得到如下实验结果。

注：“-”表示不产气；“+”表示产气，“+”越多产气越多。

请分析回答：

（1）步骤①恒温培养箱的温度控制在20℃左右，其主要目的是________________________。

（2）步骤②中，发酵液应使用无菌水进行梯度稀释。稀释涂布平板法依据的原理是____________。

（3）配制培养某的主要步骤是：计算→称量→溶化→ ______→倒平板。在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是________________________。

（4）步骤③平板划线时，常用的工具是接种环，对接种环的处理要求是__________________。

（5）固体培养基常用琼脂作凝固剂，理想的凝固剂应具有的特点是____________（多选）。

A．含有某些特殊的营养物质　　　　　　　 B．消毒灭菌不会改变其特性　　

C．能被微生物分解和利用　　　　　　　　 D．微生物生长温度范围内保持固体状态　

E．配制方便且有良好的透明性

（6）根据实验结果推知，____________（品种）是较理想的酿酒菌种。

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科研人员为了分离、筛选蓝莓果酒专用酵母来改善蓝莓果酒的品质，进行了如下实验：

① 取不同品种成熟蓝莓制果浆，置于恒温培养箱中自然发酵至产生大量气泡和明显酒味；

② 将蓝莓发酵液梯度稀释后，进行涂布平板操作，每个浓度梯度3个平板，并在恒温下培养2d，根据酵母菌菌落特征挑取单菌落；

③ 将挑取的单菌落扩大培养后，通过平板划线法分离纯化并保存；

④ 检测筛选菌株的发酵性能，得到如下实验结果。

注：“-”表示不产气；“+”表示产气，“+”越多产气越多。

请分析回答：

（1）步骤①恒温培养箱的温度控制在______左右，其主要目的是________________________。

（2）步骤②中，发酵液应使用______进行梯度稀释。稀释涂布平板法依据的原理是____________。

（3）配制培养某的主要步骤是：计算→称量→溶化→ ______→倒平板。在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是________________________。

（4）步骤③平板划线时，常用的工具是接种环，对接种环的处理要求是__________________。

（5）固体培养基常用琼脂作凝固剂，理想的凝固剂应具有的特点是____________（多选）。

A．含有某些特殊的营养物质　　　　　　　 B．消毒灭菌不会改变其特性　　

C．能被微生物分解和利用　　　　　　　　 D．微生物生长温度范围内保持固体状态　

E．配制方便且有良好的透明性

（6）根据实验结果推知，____________（品种）是较理想的酿酒菌种。

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酵母菌作为一种常见的微生物，在传统和现代生物技术中得到了广泛的应用。请回答下列问题：

（1）酵母菌广泛分布在自然界中，科研人员为了分离、筛选蓝莓果酒专用酵母来改善蓝霉果酒的品质，进行了如下实验：

①　 取不同品种的成熟蓝莓制果浆，置于适宜温度的恒温培养箱中自然发酵，直至产生大量气泡和明显酒味。取不同品种成熟蓝莓的原因是　　 。

②将蓝莓发酵液用　　 进行梯度稀释后，进行涂布平板操作（每个梯度3个平板），恒温培养2d，根据酵母菌菌落特征挑取单菌落。

③将挑取的单菌落扩大培养后，通过　　 法分离纯化，然后保存菌种。

④检测筛选菌株的发酵性能，根据实验结果推知，　　 （品种）对乙醇和酸的耐受性最强，是较理想的酿酒菌种。

（注：+数量表示菌落数量的多少，-表示没有菌落生长）

（2）下图是固定化酵母发酵与游离酵母制作蓝莓果酒发酵的对比结果，从图中可以看出，两者发酵速率相近，但发酵前期游离发酵比固定发酵产生的酒精量多，主要原因是　　 ；后期游离酵母发酵速度减慢，除了底物浓度降低外，还可能是因为　　 。相较于固定化酶技术，固定化酵母细胞常用的方法是　　 ，固定化酵母发酵的主要优点是　　 。

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磷是植物生长的重要营养元素之一，为了从土壤中筛选出能够将难溶性磷酸盐转化为植物能吸收的可溶性磷的优良解磷菌株，科研人员进行了实验，实验结果如下，图表示在固体培养基中筛选出来的菌株，表表示所筛选的三种菌株相关数值，下列相关分析错误的是（　　 ）

A. 此培养基中唯一的磷源应该是难溶性磷酸盐

B. 根据实验结果可以确定溶解磷能力最强的菌株是甲

C. 培养基上出现的单一菌落可以看做一个种群

D. 土壤中的磷被植物细胞吸收可用于合成ATP、核酸、NADPH等化合物

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磷是植物生长的重要营养元素之一，为了从土壤中筛选出能够将难溶性磷酸盐转化为植物能吸收的可溶性磷的优良解磷菌株，科研人员进行了实验，实验结果如下，图表示在固体培养基中筛选出来的菌株，表表示所筛选的三种菌株相关数值，下列相关分析错误的是（　　 ）

A. 此培养基中唯一的磷源应该是难溶性磷酸盐

B. 根据实验结果可以确定溶解磷能力最强的菌株是甲

C. 培养基上出现的单一菌落可以看做一个种群

D. 土壤中的磷被植物细胞吸收可用于合成ATP、核酸、NADPH等化合物

【答案】B

【解析】筛选能够将难溶性磷酸盐转化为植物能吸收的可溶性磷的优良解磷菌株，培养基中唯一的磷源应该是难溶性磷酸盐，A项正确；D/d的比值可以代表溶解磷能力，表中菌株乙该比值最大，B项错误；培养基上出现的单一菌落一般由同种菌株组成，可以看做一个种群，C项正确；ATP、核酸、NADPH等化合物均含有磷元素，土壤中的磷被植物细胞吸收可用于合成ATP、核酸、NADPH等化合物，D项正确。

【题型】单选题
【结束】
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果汁生产中果胶酶能提高果汁出汁率和澄清度。为了节约成本，某工程人员在适宜的温度和pH下，利用苹果汁和一定浓度的果胶酶溶液探究果胶酶的最适用量，实验结果如图。对实验失误可能的原因分析及改进方法都合理的是（　　 ）

A．酶促反应时间不合理；延长反应时间

B．苹果汁的用量不合理；减少用量

C．果胶酶用量不合理；减少用量

D．果胶酶体积梯度不合理；增大体积梯度

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土壤中含有大量的难溶性磷酸盐，为了从土壤中筛选出能够将难溶性磷酸盐转化为植物能吸收的可溶性磷的优良解磷菌株，以便将其添加到有机肥中，改善植物磷元素供应。科研人员进行如下实验：

实验原理：固体培养基中难溶性磷酸盐在微生物的作用下溶解，会在菌落周围形成透明圈（如下图），透明圈直径（D）与菌落直径（d）的比值（D/d）代表微生物溶解磷的能力大小。

实验步骤：

步骤1　 取某地区土样5g制得土壤溶液后稀释，取稀释液1mL接种到基础培养基A上，在适宜温度下培养72h。

步骤2　 在基础培养基A上用接种环挑取代表性菌落再次接种，培养3～4d后观察菌落特征和透明圈的大小，初步筛选出三种优良解磷菌株（如下表）。

分析回答：

（1）从物理形态看，培养基A属于______培养基。培养基中磷源应该是______。

（2）根据实验结果可以确定溶解磷能力最强的菌株是______。

（3）为进一步测定初步筛选的三种菌株实际溶解磷的能力，研究人员将它们接种到基础培养基B中，并在37℃、200 r·min-1 摇床培养，定期取上清液，测定溶液中可溶性磷含量，得到下图所示曲线。

①用摇床进行培养的好处是增加培养液中的______；使菌株与______充分接触，有利于物质的交换。

②结果表明最优良的解磷菌株是______。

（4）在纯化菌种时接种了5个平板，每个平板均接种了0．l mL样品并培养。其中平板的菌落分布如图：

推测出现该平板可能的操作失误是_____。其余的甲、丙、丁、戊平板操作正常，其菌落数分别是210、230、470、190，则样品中菌种的数量为_____个／mL。

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土壤中含有大量的难溶性磷酸盐，为了从土壤中筛选出能够将难溶性磷酸盐转化为植物能吸收的可溶性磷的优良解磷菌株，以便将其添加到有机肥中，改善植物磷元素供应。科研人员进行如下实验：

实验原理：固体培养基中难溶性磷酸盐在微生物的作用下溶解，会在菌落周围形成透明圈（如图），透明圈直径（D）与菌落直径（d）的比值（D/d）代表微生物溶解磷的能力大小。

实验步骤：

步骤1　 取某地区土样5g制得土壤溶液后稀释，取稀

释液1mL接种到基础培养基A上，在适宜温度下培养72h。

步骤2　 在基础培养基A上用接种环挑取代表性菌落再次接种，培养3～4d后观察菌落特征和透明圈的大小，初步筛选出三种优良解磷菌株（如表）。

分析回答：

（1）从物理形态看，培养基A属于_______培养基。培养基中磷源应该是______________。

（2）步骤1中接种方法是__________________，步骤2中接种环的灭菌方法是________。

（3）根据实验结果可以确定溶解磷能力最强的菌株是_____________。

（4）为进一步测定初步筛选的三种菌株实际溶解磷的能力，研究人员将它们接种到基础培养基B中，并在37℃、200 r·min-1 摇床培养，定期取上清液，测定溶液中可溶性磷含量，得到图所示曲线。

①用摇床进行培养的好处是__________________________

②结果表明最优良的解磷菌株是_______________。

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土壤中含有大量的难溶性磷酸盐，为了从土壤中筛选出能够将难溶性磷酸盐转化为植物能吸收的可溶性磷的优良解磷菌株，以便将其添加到有机肥中，改善植物磷元素供应，科研人员进行如下实验：

实验原理：固体培养基中难溶性磷酸盐在微生物的作用下溶解，会在菌落周围形成透明圈（如图1），透明圈直径（D）与菌落直径（d）的比值（D/d）代表微生物溶解磷的能力大小。

实验步骤:

步骤1 取某地区土样5g制得土壤溶液后稀释，取稀释液lmL接种到基础培养基A上，在适宜温度下培养72h。

步骤2 在基础培养基A上用接种环挑取代表性菌落再次接种，培养3〜4d后观察菌落特征和透明圈的大小，初步筛选出三种优良解磷菌株（如表）。

请据以上资料，回答下列问题：

（1）从物理形态上看，培养基A属于_________培养基，为了筛选出优良解磷菌株，培养基中加入的磷源是_________。

（2）步骤1中的接种方法是_________，应该在_________旁完成操作。步骤2中对接种环采用的灭菌方法是_________灭菌。

（3）根据表中的实验结果可以确定溶解磷能力最强的菌株是_________。

（4）为进一步测定初步筛选的三种菌株实际溶解磷的能力，研究人员将它们接种到基础培养基B中，并在37℃、200r·min-l摇床培养，定期取上清液，测定溶液中可溶性磷含量，得到如图2所示曲线。

①用摇床进行振荡培养的好处之一是增加培养液中的_________。

②图2所示曲线结果表明最优良的解磷菌株是_________。

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为了培育高效利用木糖发酵产乳酸的菌株，科研人员将能利用木糖产乳酸的菌种搭载于中国“实践八号”育种卫星，卫星返回后进行筛选，其主要流程如下图，其中乳酸能溶解培养基中的碳酸钙形成透明圈。请回答：

（1）与步骤②相比，步骤③的培养基成分还含有_______、______。两培养基均以木糖作为唯一碳源的目的是________。

（2）步骤③中，应在________附近倒平板，不采用涂布接种的原因是_________。平板在适宜条件下培养一段时间后，筛选有透明圈的菌落作为候选菌。

（3）科研人员从候选菌中初步筛选出产乳酸能力较强的四种菌株，再通过连续转接和液体发酵进行遗传稳定性检测，得到下表所示结果（单位：g·L-1），最终确定卫10为最优菌株，依据是________。

（4）若要进一步探究卫10发酵的最适木糖浓度，试写出实验思路：________。

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为了培育高效利用木糖发酵产乳酸的菌株，科研人员将能利用木糖产乳酸的菌种搭载于中国“实践八号”育种卫星，卫星返回后进行筛选，其主要流程如下图，其中乳酸能溶解培养基中的碳酸钙形成透明圈。请回答：

（1）与步骤②相比，步骤③的培养基成分还含有__________、___________。两培养基均以木糖作为唯一碳源的目的是___________。

（2）步骤③中，应在_____________附近倒平板，不采用涂布平板接种的原因是___________________________________________________________。平板在适宜条件下培养一段时间后，筛选有透明圈的菌落作为候选菌，这里的准确筛选的主要依据是_______________________________________。

（3）按功能分，步骤③中培养基属于______________________培养基。

（4）科研人员从候选菌中初步筛选出产乳酸能力较强的四种菌株，再通过连续转接和液体发酵进行遗传稳定性检测，得到下表所示结果（单位：g/L），最终确定卫10为最优菌株，依据是___________。

（5）若要进一步探究卫10发酵的最适木糖浓度，试写出实验思路___________________________。

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