大量的科学研究已经证明,VP40蛋白基因的基因突变或者VP40蛋白的缺失会终止埃博拉病毒的侵染行为,因此制备针对VP40蛋白的抗体可能是战胜埃博拉病毒的新途径。请据图回答:
(1)过程①中选用两种限制酶切割,使目的基因的两端获得不同的黏性末端,这样处理的目的是_______。
(2)图中过程②需要用_________处理大肠杆菌。在基因表达载体中,VP40蛋白基因的首端必须含有______,其作用是能够被__________识别和结合,从而保证③顺利完成。
(3)为检测VP40基因是否成功表达,可以采用________技术。VP40蛋白抗体能够战胜埃博拉病毒的原因是____________________。
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大量的科学研究已经证明,VP40蛋白基因的基因突变或者VP40蛋白的缺失会终止埃博拉病毒的侵染行为,因此制备针对VP40蛋白的抗体可能是战胜埃博拉病毒的新途径。请据图回答:
(1)过程①中选用两种限制酶切割,使目的基因的两端获得不同的黏性末端,这样处理的目的是_______。
(2)图中过程②需要用_________处理大肠杆菌。在基因表达载体中,VP40蛋白基因的首端必须含有______,其作用是能够被__________识别和结合,从而保证③顺利完成。
(3)为检测VP40基因是否成功表达,可以采用________技术。VP40蛋白抗体能够战胜埃博拉病毒的原因是____________________。
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下图是制备抗埃博拉病毒VP40蛋白的单克隆抗体的过程:
(1)若要体外获得大量的VP40基因,可采用_______技术进行扩增,若该目的基因循环扩增3次,理论上需要消耗_______个引物。
(2)过程①中选用EcoRⅠ和XhoⅠ两种限制酶切割的优点是____________________,此外还要用到________酶。
(3)过程②中首先需要用Ca2+处理大肠杆菌,使其处于________,VP40基因进入大肠杆菌后维持稳定并表达的过程称为____________。
(4)与植物原生质体融合相比,过程④特有的诱导融合的方法是用____________处理。通常在选择培养基中需加入__________,目的是防止培养过程中的污染。选择培养基上存活的杂交瘤细胞产生的抗体________(填“是”或“不是”)单克隆抗体,对杂交瘤细胞还需要进行_________培养和_______________,最终获得单克隆抗体。
(5)上述克隆技术_________(填“能”或“不能”)体现动物细胞的全能性,_____________技术体现了动物细胞核的全能性。
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下图是制备抗埃博拉病毒VP40蛋白的单克隆抗体的过程:
(1)若要体外获得大量的VP40基因,可采用_______技术进行扩增,若该目的基因循环扩增3次,理论上需要消耗_______个引物。
(2)过程①中除选用EcoRⅠ和XhoⅠ两种限制酶外,还要用到________酶。
(3)过程②中VP40基因进入大肠杆菌后维持稳定并表达的过程称为____________,大肠杆菌等原核生物常作为受体细胞的原因 ______________________________(写出两点)。
(4)与植物原生质体融合相比,过程④特有的诱导融合的方法是用____________处理。通常在选择培养基中需加入__________,目的是防止培养过程中的污染。对杂交瘤细胞还需要进行克隆化培养和_______________,最终获得单克隆抗体。
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利用单克隆抗体特异的作用于埃博拉病毒侵染蛋白(VP40蛋白)是一种战胜埃博拉病毒的有效途径。请据图回答:
(1)过程①中选用两种限制酶切割,使目的基因的两端产生不同的黏性末端,这样处理的目的是___________。
(2)图中过程②需要用___________处理大肠杆菌,原因是_____________________。
(3)在基因表达载体中,VP40蛋白基因的首端必须含有___________,其作用是能够被___________识别和结合,从而保证③顺利完成。
(4)为检测VP40基因是否成功表达,可以采用___________技术。VP40蛋白抗体能够战胜埃博拉病毒的原因是______________________。
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利用单克隆抗体特异的作用于埃博拉病毒侵染蛋白(VP40蛋白)是一种战胜埃博拉病毒的有效途径。请据图回答:
(1)过程①中选用两种限制酶切割,使目的基因的两端产生不同的黏性末端,这样处理的目的是___________。
(2)图中过程②需要用___________处理大肠杆菌,原因是_____________________。
(3)在基因表达载体中,VP40蛋白基因的首端必须含有___________,其作用是能够被___________识别和结合,从而保证③顺利完成。
(4)为检测VP40基因是否成功表达,可以采用___________技术。VP40蛋白抗体能够战胜埃博拉病毒的原因是______________________。
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利用单克隆抗体特异的作用于埃博拉病毒侵染蛋白(VP40蛋白)是一种战胜埃博拉病毒的有效途径。请据图回答:
(1)过程①中选用两种限制酶切割,使目的基因的两端产生不同的黏性末端,这样处理的目的是___________。
(2)图中过程②需要用___________处理大肠杆菌,原因是_____________________。
(3)在基因表达载体中,VP40蛋白基因的首端必须含有___________,其作用是能够被___________识别和结合,从而保证③顺利完成。
(4)为检测VP40基因是否成功表达,可以采用___________技术。VP40蛋白抗体能够战胜埃博拉病毒的原因是______________________。
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利用单克隆抗体特异的作用于埃博拉病毒侵染蛋白(VP40蛋白)是一种战胜埃博拉病毒的有效途径。请据图回答:
(1)过程①中选用两种限制酶切割,使目的基因的两端产生不同的黏性末端,这样处理的目的是___________。
(2)图中过程②需要用___________处理大肠杆菌,原因是_____________________。
(3)在基因表达载体中,VP40蛋白基因的首端必须含有___________,其作用是能够被___________识别和结合,从而保证③顺利完成。
(4)为检测VP40基因是否成功表达,可以采用___________技术。VP40蛋白抗体能够战胜埃博拉病毒的原因是______________________。
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利用单克隆抗体特异的作用于埃博拉病毒侵染蛋白(VP40蛋白)是一种战胜埃博拉病毒的有效途径。请据图回答:
(1)过程①中选用两种限制酶切割,使目的基因的两端产生不同的黏性末端,这样处理的目的是___________。
(2)图中过程②需要用___________处理大肠杆菌,原因是_____________________。
(3)在基因表达载体中,VP40蛋白基因的首端必须含有___________,其作用是能够被___________识别和结合,从而保证③顺利完成。
(4)为检测VP40基因是否成功表达,可以采用___________技术。VP40蛋白抗体能够战胜埃博拉病毒的原因是______________________。
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如图是制备抗埃博拉病毒(EBOV)VP40蛋白单克隆抗体的过程,请据图回答问题:
(1)通过PCR技术获取目的基因的过程中,反应体系中除了加入含有EBOV VP40基因的DNA、dNTP,还应该有___________酶和根据目的基因的核苷酸序列设计的_____________。
(2)选用EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切的优点是____________________________。
(3)大肠杆菌获得重组质粒A,从而发生稳定遗传变化的过程可称为________。该过程首先需要用________处理大肠杆菌,使其更易吸收环境中的DNA分子。
(4)过程⑥常用的不同于诱导植物原生质体融合的方法是用___________处理,该过程能产生的两两融合的细胞有_______种。若把在HAT选择培养基上存活的细胞全部培养在同一培养基中,从中提取出的抗体_________(填“是”或“不是”)单克隆抗体。
(5)体内培养是指把能产生特异性抗体的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内进行培养,一段时间后,从__________中提取单克隆抗体。图示过程应用了哪些生物技术:__________________________。
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(16分)埃博拉病毒(EBO)呈纤维状, EBO衣壳外有包膜,包膜上有5种蛋白棘突(VP系列蛋白和GP蛋白),其中GP蛋白最为关键,能被宿主细胞强烈识别。EBO结构及基因组如下图所示。目前尚无针对该病毒的特效药或疫苗。
(1)埃博拉病毒(EBO)的遗传物质是 ,EBO病毒容易变异的原因是 。
(2)科研人员利用经EBO免疫后小鼠的 细胞与鼠的瘤细胞进行杂交,获得纯净的单一品种抗体,其特点是 ,可以用此抗体与药物制成“生物导弹”,抗击埃博拉病毒(EBO)。
(3)下图表示转基因技术生产埃博拉病毒蛋白疫苗与重组病毒粒子疫苗的基本过程。
①该技术的目的基因最好选择 。
②实验发现,用昆虫细胞替代酵母菌承担辅助重组质粒与重组病毒的共转染,也能收集到目的基因表达的蛋白质,这一现象说明 。
③以EBO病毒包膜蛋白作为疫苗比较安全,其原因是 。
④重组病毒中须除去腺病毒复制激活基因(E),目的是使重组病毒不能在人体内 ,提高了疫苗的安全性。
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