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纤维素酶已被广泛应用于多个领域，如何从生物体内获取纤维素酶已成为一个重要的研究方向。请回答：
（1）目前用于生产纤维素酶的微生物较多的是丝状真菌，尤其是木霉菌。它所含的纤维素酶分解纤维素效果较好，但是提取出来的纤素酶中的__________________活性较低，会导致分解时产生的纤维二糖积累，直接影响分解效率，因此需要不断改进提取工艺。木霉菌分泌的纤维素酶能降解其体外的纤维素，但是不能降解其自身细胞壁，原因是其细胞壁的成分______________。
（2）若要从羊的胃中分离出能分解纤维素的微生物，除了需要准备相应的培养基外，在培养时还要提供________（“有氧/无氧”）条件。从羊胃中筛选出的菌株，对其中所产生纤维素酶的测定方法，一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后产生的____________进行定量测定。
（3）常用___________染色法来判断微生物分解纤维素的情况。染色的方法有两种：第一种是先培养微生物，再加入染色剂进行颜色反应； 第二种是在__________时就加入染色剂。第一种方法的优点是显示出的颜色反应可直接体现纤维素分解菌的作用，但是操作繁杂，加入的染色剂溶液还会使___________________。
（4）到富含纤维素的环境中去寻找分解纤维素的微生物，说明了在自然界寻找各种目的菌株时，遵循的共同原则是根据目的菌株__________________________________。
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脂肪酶在洗涤剂、食品、造纸、油脂、化妆品、制药、生物柴油等多个工业领域中有广泛应用，人们应用生物技术可以对脂肪酶进行改造和生产。回答下列问题。
(1)科学家将脂肪酶位于蛋白质表面的一个异亮氨酸替换为苏氨酸，使脂肪酶的半衰期提高2倍，大大提高其稳定性，在改造过程中需要对_____________ (填“脂肪酶”、“脂肪酶mRNA”或“脂肪酶基因”)进行定向改造，和传统的基因工程相比，该技术的突出优点是_____________。
(2)制备酵母菌作为工程菌生产脂肪酶时，需构建基因表达载体，并使脂肪酶基因插入到基因表达载体的____________________之间，欲检测目的基因是否在受体细胞中转录，应采用的方法是____________ ，和大肠杆菌相比，利用酵母菌作为工程菌生产的脂肪酶一般可以直接投入使用，其原因是________________________________ 。
(3)脂肪酶还可以借助动物细胞的大规模培养来生产，培养动物细胞时所用的合成培养基，通常还需要加入一些_____________等天然成分，培养细胞时需要加入一定量的CO2，其作用是______________。
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（2015秋•广东月考）在荧光素酶中加入正确的荧光素底物就可以发荧光．荧光素酶及其合成基因在生物研究巾有着广泛的应用．请回答下列问题：
（1）荧光素酶基因可以人工合成，也可以从 中获取．利用PCR技术扩增荧光素酶基因是利用 的原理．
（2）限制酶是切割DNA的工具酶，主要从 中分离纯化出来．下表为4种限制酶的识别序列和酶切位点，下图为含有荧光素酶基因的DNA片段及其具有的限制酶切点．若需利用酶切法（只用一种酶）获得荧光素酶基因，最应选择的限制酶是
（3）荧光素酶基因常被作为基因工程中的标记基因，其作用是将 筛选出来．荧光素酶基因也可以作为目的基因转入某些动植物细胞中表达产生荧光素酶．将目的基因导入动物细胞的技术中，应用最多的是 ．
（4）将目的基因导入植物细胞，目前常用的目的基因载体是Ti质粒，目的基因需插入到该基因载体的 上．将导人荧光素酶基因的植物细胞，可经过 技术获得转基因植株．
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在荧光素酶中加入正确的荧光素底物就可以发荧光。荧光素酶及其合成基因在生物研究巾有着广泛的应用。请回答下列问题：
（1）荧光素酶基因可以人工合成，也可以从 中获取。利用PCR技术扩增荧光素酶基因是利用___ _的原理。
（2）限制酶是切割DNA的工具酶，主要从 中分离纯化出来。下表为4种限制酶的识别序列和酶切
位点，下图为含有荧光素酶基因的DNA片段及其具有的限制酶切点。若需利用酶切法（只用一种酶）获得荧光素酶基因，最应选择的限制酶是
（3）荧光素酶基因常被作为基因工程中的标记基因，其作用是将 筛选出来。荧光素酶基因也可以作为目的基因转入某些动植物细胞中表达产生荧光素酶。将目的基因导入动物细胞的技术中，应用最多的是____。
（4）将目的基因导入植物细胞，目前常用的目的基因载体是Ti质粒，目的基因需插入到该基因载体的 上。将导人荧光素酶基因的植物细胞，可经过 技术获得转基因植株。
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在荧光素酶中加入正确的荧光素底物就可以发荧光。荧光素酶及其合成基因在生物研究巾有着广泛的应用。请回答下列问题：
（1）荧光素酶基因可以人工合成，也可以从 中获取。利用PCR技术扩增荧光素酶基因是利用＿＿＿的原理。
（2）限制酶是切割DNA的工具酶，主要从＿＿＿＿中分离纯化出来。下表为4种限制酶的识别序列和酶切位点，下图为含有荧光素酶基因的DNA片段及其具有的限制酶切点。若需利用酶切法（只用一种酶）获得荧光素酶基因，最应选择的限制酶是＿＿＿＿＿ 。
（3）荧光素酶基因常被作为基因工程中的标记基因，其作用是将 筛选出来。荧光素酶基因也可以作为目的基因转入某些动植物细胞中表达产生荧光素酶。将目的基因导入动物细胞的技术中，应用最多的是＿＿＿＿＿＿。
（4）将导入荧光素酶基因的植物细胞经过 技术获得转基因植株。
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在荧光素酶中加入正确的荧光素底物就可以放出荧光。荧光素酶及其合成基因在生物研究中有着广泛的应用。请回答下列问题：
（1）荧光素酶基因可以从基因文库中获取，也可以通过________方法得到，再利用 PCR 技术扩增即可，扩增荧光素酶基因利用的原理是__________________。
（2）在基因工程操作过程中，需要用________酶和________酶构建基因表达载体，基因表达载体要有________，以便筛选出含有目的基因的受体细胞。
（3）荧光素酶基因也可以作为目的基因转入某些动植物细胞中表达产生荧光素酶。将目的基因导入植物细胞，目前常用的目的基因载体是农杆菌的 Ti 质粒，目的基因需插入到该基因载体的________上，然后再转移至受体细胞中。将目的基因导入动物细胞的技术中，应用最多的是_______。
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目前全世界生物技术药物中，使用生物工程生产的已超过80%，如蛋白质、单克隆抗体、疫苗等，动物细胞工程、基因工程涉及的领域非常广泛。请回答下列问题：
（1）用于动物细胞培养的培养基中通常需要加入____________等天然成分，但由于其含有许多未知成分，对研究结果有所影响，因此，可以采取添加一些已知的促进____________的物质代替其作用。
（2）细胞培养时还需气体环境，其中CO2的作用是____________。培养基中添加一定量的__________以防止培养过程中微生物的污染。
（3）单克隆抗体制备过程中，融合、筛选出杂交细胞后需要经过____________和____________才能得到符合要求的杂交瘤细胞。
（4）应用于核移植的供体细胞一般选用传代10代以内的细胞，原因是____________。
（5）基因工程为一般药物很难治疗的遗传病提供了最有效的治疗手段：基因治疗。基因治疗的思路是________________________。
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目前全世界生物技术药物中，使用生物工程生产的已超过80%，如蛋白质、单克隆抗体、疫苗等，动物细胞工程、基因工程涉及的领域非常广泛。请回答下列问题：
（1）用于动物细胞培养的培养基中通常需要加入____________等天然成分，但由于其含有许多未知成分，对研究结果有所影响，因此，可以采取添加一些已知的促进____________的物质代替其作用。
（2）细胞培养时还需气体环境，其中CO2的作用是____________。培养基中添加一定量的__________以防止培养过程中微生物的污染。
（3）单克隆抗体制备过程中，融合、筛选出杂交细胞后需要经过____________和____________才能得到符合要求的杂交瘤细胞。
（4）应用于核移植的供体细胞一般选用传代10代以内的细胞，原因是____________。
（5）基因工程为一般药物很难治疗的遗传病提供了最有效的治疗手段：基因治疗。基因治疗的思路是________________________。
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现代生物技术在医药、农业等领域都有广泛应用。回答下列问题：
（1）将人体中B蛋白基因导入大肠杆菌，以生产药物B蛋白。
①由于人体基因的转录初始产物需切除部分序列，才能加工成为成熟的mRNA，因此直接将从人类基因文库中获取的B蛋白基因导入大肠杆菌无法正常表达。可采用________的方法合成B蛋白基因，以解决这一问题。
②导入过程所用载体pUC19质粒如图所示，LacZ基因表达产物能水解X-gal，使菌落呈蓝色，不能水解X-gal的菌落呈白色。已知三种限制性核酸内切酶X、Y、Z所识别的序列分别是C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC（↓表示剪切点）。为便于筛选导入重组质粒的大肠杆菌，应选用的限制性核酸内切酶是__________，并且在培养基中加入________，接种培养后选择________色菌落。
③筛选得到成功导入B蛋白基因的大肠杆菌菌株，为检验B蛋白基因是否表达，可以用含放射性标记的B蛋白基因单链作为探针，检测受体菌有无__________。
（2）现代生物技术应用于农作物育种，也取得可喜成绩。利用基因工程育种技术可培育转基因农作物。在此过程中，为成功获得新植株，应选择性状优良、________作为受体材料。除此之外，影响受体材料能否成功再生出新植株的因素还有光温条件、植物生长调节剂及__________的配比。利用多倍体育种技术或者__________技术则可培育异源多倍体。
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玉米是重要的粮食作物，是很好的生物学实验材料，在副食品生产上有广泛的应用，经深加工后可生产酒精、玉米胚芽油、葡萄糖等产品（流程如下）。请回答相关问题：
（1）玉米秸秆富含纤维素，水解用的纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和______________________。纤维素分解菌可以产生纤维素酶，可用__________________法，通过是否产生_____________来筛选纤维素分解菌。
（2）玉米胚芽油不易挥发，可选用萃取法提取，萃取的效率主要取决于___________________________；萃取过程中应采用水浴加热，这是因为________________________________________________。
（3）分析下图，提高萃取效果的方法是________________、________________。
（4）为避免浪费，需对催化玉米淀粉分解成葡萄糖的酶最适用量进行探究，此时需要保持________________（写出两种即可）等无关变量相同且适宜。
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