某研究小组将产纤维素酶的株，通过诱变和高温筛选获得新菌株。为探究新菌株所产纤维素酶能否耐受...

某研究小组将产纤维素酶的株，通过诱变和高温筛选获得新菌株。为探究新菌株所产纤维素酶能否耐受80℃高温，进行了以下实验，有关实验的说法，错误的是

A.试管2中加入的纤维素酶溶液用缓冲液配制

B.应在第二步中加入适量的纤维素溶液，第三步进行80℃水浴保温

C.第五步中应加入等量的斐林试剂甲液和斐林试剂乙液

D.若纤维素酶能耐受80℃高温，则预期实验结果是试管1内呈蓝色，试管2内有砖红色沉淀产生

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乙醇可部分替代石油燃料，利用纤维素酶、酵母菌等可将纤维素转化成乙醇，耐高温纤维素酶可以加速催化纤维素的水解，从而有利于酵母菌发酵产生乙醇．

（1）某研究小组将产纤维素酶的菌株，通过诱变和高温筛选获得新菌株．为探究新菌株所产纤维素酶能否耐受80℃高温，进行了以下实验

试管1　　 试管2

第一步　　 加入适量缓冲液　　 加入等量纤维素酶溶液（缓冲液配制）

第二步　　 80℃水浴保温 30min

第三步　　 加入 适量纤维素液

第四步　　 60℃水浴保温10min

第五步　　 加入 斐林试剂或班氏糖定性试剂

第六步　　 沸水浴中加热2min，观察实验现象

结果与结论：①若 试管1内呈蓝色，试管2内有砖红色沉淀产生 ，则表明该纤维素酶能耐受80℃高温；

②若 试管1和2内均呈蓝色 ，则表明该纤维素酶不能耐受80℃高温．

（2）酵母菌发酵产生的乙醇属于 次级 （填“初级”或“次级”）代谢产物．

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耐高温纤维素酶可以加速催化纤维素水解成还原糖，为探究该纤维素酶能否耐受80℃高温，进行了以下实验：

①在试管1和2中加入等量用缓冲液配制的纤维素酶溶液；在试管3和4中分别加入5ml的纤维素溶液；

②将试管1和3放入60℃水浴，试管2和4放入80℃水浴，分别保温10min后，将试管3内液体倒入试管1中，试管4内液体倒入试管2中，摇匀并在对应温度水浴中保温；

③一段时间后，向试管1和2中加入某试剂，然后在60℃水浴保温2min；

④观察并记录实验现象。

请回答下列问题：

（1）生物体内酶的化学本质是　　　　　　 ，其特性有 　　　　　　　　　　　　 （答出两点即可）。

（2）第③步加入的某试剂是　　　　　　　 ，该试剂与还原性糖发生作用，形成　　　　　　　　 沉淀。

（3）预测实验结果与结论：

①若　　　　　　　　　 ，则表明该纤维素酶能耐受80℃高温；

②若　　　　 　　　　 ，则表明该纤维素酶不能耐受80℃高温。

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（15分）纤维素酶对于能否实现乙醇工业化生产、处理服装面料等具有重要的意义，研究者初步筛选到能合成纤维素酶的菌株MC-1，以下是该菌株的鉴定过程。

（1）为了获得能合成纤维素酶的单菌落，可采用________法将初筛菌液接种在固体培养基上，这种培养基属于________培养基。

（2）关于制备固体培养基的叙述，错误的是________

A．制作固体培养基时可以加入琼脂。

B．操作的顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌。

C．待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板。

D．待平板冷却凝固约5-10min后将平板倒过来放置。

（3）实验过程中如何防止其他微生物的污染？________。

5）分离获得了具有较高纤维素酶活性的菌株MC-1，为了在此基础上获得纤维素酶活性更高的菌株，最可行的做法是________。

（6）某同学在培养过程中发现培养基上感染了几种细菌。若在以尿素为唯一氮源的培养基中加入________指示剂培养几种菌后，指示剂变红就可以鉴定其中含有能够分解尿素的菌；若在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入________染料，培养后，培养基中出现透明圈，就可以鉴定其中含有纤维素分解菌。

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回答有关微生物的问题

纤维素酶对于能否实现乙醇工业化生产、处理服装面料等具有重要的意义，研究者初步筛选到能合成纤维素酶的菌株MC-1，以下是该菌株的鉴定过程。

1.为了获得能合成纤维素酶的单菌落，可采用　　　　　　　 法将初筛菌液接种在固体培养基上，这种培养基属于　　　　 培养基。

2.关于制备固体培养基的叙述，错误的是

A．制作固体培养基时可以加入琼脂。

B．操作的顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌

C．待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板。

D．待平板冷却凝固约5-10min后将平板倒过来放置。

3.实验过程中如何防止其他微生物的污染？ 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

4.下表的培养液pH均为4.8，若对MC-1中纤维素酶的活力进行测定，则不能选择表中的　　　　 的培养液。（多选）

5.分离获得了具有较高纤维素酶活性的菌株MC-1，为了在此基础上获得纤维素酶活性更高的菌株，最可行的做法是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

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纤维素酶对于能否实现乙醇工业化生产、处理服装面料等具有重要的意义，研究者初步筛选到能合成纤维素酶的菌株MC-1，以下是该菌株的鉴定过程。

（1）为了获得能合成纤维素酶的单菌落，可采用　　　　　　　 法将初筛菌液接种在固体培养基上，这种培养基属于　　　　 培养基。

（2）关于制备固体培养基的叙述，错误的是　　　　　　　　　

A．制作固体培养基时可以加入琼脂

B．操作的顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌

C．待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板

D．待平板冷却凝固约5-10min后将平板倒过来放置

（3）实验过程中如何防止其他微生物的污染？　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（4）下表的培养液pH均为4.8，若对MC-1中纤维素酶的活力进行测定，则不能选择表中的　　　　　 的培养液。（多选）

（5）分离获得了具有较高纤维素酶活性的菌株MC-1，为了在此基础上获得纤维素酶活性更高的菌株，最可行的做法是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（6）某同学在培养过程中发现培养基上感染了几种细菌。若在以尿素为唯一氮源的培养基中加入________指示剂培养几种菌后，指示剂变红就可以鉴定其中含有能够分解尿素的菌；若在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入________染料，培养后，培养基中出现透明圈，就可以鉴定其中含有纤维素分解菌。

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研究人员成功地从土壤中筛选到能产生纤维素酶的微生物。请就如何从土壤中获得纤维素分解菌回答以下问题：

（1）纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即 　　　　　　　 。

（2）若获得纯净的菌株，常采用　　　　　　　　 进行接种，此过程所用的接种工具是接种环，操作时采用　　　　　　　　　 灭菌的方法。

（3）刚果红可以与纤维素等多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的　　　　　 和葡萄糖发生这种反应。常用的刚果红染色法有两种：第一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应；第二种是在　　　　　　　　　 时就加入刚果红。　　　　　　　　 （填“第一种”或“第二种”）方法会使菌落之间发生混杂。

（4）如果观察到产生　　　　　　　　　 的菌落，说明可能获得了纤维素分解菌。为了确定是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验。

（5）下图为实验室培养和纯化菌种过程中的部分操作步骤，下列说法错误的是（　 ）

A．①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行

B．步骤③中，每次划线前后都需对接种环进行灼烧处理

C．步骤①中待倒入的培养基冷却后盖上培养皿的皿盖

D．划线接种结束后，将图④平板倒置后放入培养箱中培养

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研究人员从土壤中筛选得到酵母菌纤维素酶高产菌株，并对其降解纤维素的条件进行了研究。据图分析错误的是（　　 ）

A.筛选该高产菌株需要在牛肉膏蛋白胨培养基中添加纤维素

B.探究最适温度时应尽可能将发酵液的pH控制在9左右

C.该酵母菌高产菌株产生纤维素酶的最适温度是35℃

D.利用该高产菌株降解纤维素时需严格保持厌氧环境

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下图是高产糖化酶菌株的育种过程。下列有关叙述错误的是

A. 通过上图筛选过程获得的高产菌株必定能作为生产菌株

B. 每轮诱变相关基因的突变是不定向的

C. 上图筛选高产菌株的过程是定向选择过程

D. X射线处理可能会导致染色体变异

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随着能源和环境问题日益严峻，利用纤维素酶降解秸秆生产燃料乙醇，对缓解全球能源危机有着重大意义。科研人员开展筛选、诱变及选育高产纤维素酶菌株的相关研究，过程如下图。请回答：

（1）从物理状态来看CMC平板属于__________培养基，培养基中应以___________为唯一碳源，常用的灭菌方法是___________。

（2）富集培养后的菌种常采用____________法接种于CMC平板，培养一段时间后，可根据___________初步鉴定并挑取产纤维素酶菌株XZ-33。

（3）诱变选育高产纤维素酶的菌株时，通过向培养基中加入刚果红染液筛选出____________与菌落直径比大的菌落（刚果红能与纤维素形成红色复合物，但不与纤维素水解产物结合）。

（4）如图是筛选获得菌株UV-Col6过程中60Co-γ辐照剂量与致死率和正突变率（符合生产需要的突变菌数占诱变后活菌数的比例）的关系。实验结果表明，用60Co-y射线诱变处理时合适的辐照剂量为__________KGy。从基因突变的特点分析，正突变率低的原因是_________、________________。

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