β-甘露聚糖酶能分解甘露聚糖,在食品、医药等方面有着广泛的应用,从土壤中筛选能产生该酶的枯草芽孢杆菌。请回答下面问题:
(1)用于培养微生物的培养基,除了提供微生物生长必需的营养物质之外,还需要满足微生物对________(至少答两点)的要求。
(2)在污水沟、死树桩旁采集土样,在纯化培养该菌之前,一般会进行选择培养,其目的是__________。
(3)经梯度稀释后获得的菌液一般用______________________法将其接种于选择培养基上,配制该选择培养基的步骤是_________________________________________________。
(4)已知枯草芽孢杆菌在含有甘露聚糖的培养基生长,经染色剂染色后,在平板上会形成无色透明圈。实验人员欲利用选择培养基筛选出高产β-甘露聚糖酶的枯草芽孢杆菌,请写出实验思路_____________________。
高三生物综合题中等难度题
β-甘露聚糖酶能分解甘露聚糖,在食品、医药等方面有着广泛的应用,从土壤中筛选能产生该酶的枯草芽孢杆菌。请回答下面问题:
(1)用于培养微生物的培养基,除了提供微生物生长必需的营养物质之外,还需要满足微生物对________(至少答两点)的要求。
(2)在污水沟、死树桩旁采集土样,在纯化培养该菌之前,一般会进行选择培养,其目的是__________。
(3)经梯度稀释后获得的菌液一般用______________________法将其接种于选择培养基上,配制该选择培养基的步骤是_________________________________________________。
(4)已知枯草芽孢杆菌在含有甘露聚糖的培养基生长,经染色剂染色后,在平板上会形成无色透明圈。实验人员欲利用选择培养基筛选出高产β-甘露聚糖酶的枯草芽孢杆菌,请写出实验思路_____________________。
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木聚糖酶系可以将半纤维素(一种多糖)转化为单细胞蛋白其他有用物质。有些嗜热菌能产生耐热木聚糖酶,在食品工业上具有较高的潜在应用价值。
现欲从温泉中分离能分解半纤维素的嗜热菌,并从中筛选木聚糖酶高产菌株,获得耐热木聚糖酶。回答下列问题:
(1)取适量体积的样品涂布在富含_____的固体培养基上,置于65℃(原因是此温度是______)的培养箱中培养,菌落长出后,挑取单个菌落在培养基上用_____法接种培养,进行菌株的______。将得到的菌株接种到______(固体/液体)培养基中富集。
(2)将富集后的菌株接种于固体培养基上,待菌落长出后用0.1%的_______染色1h,再用lmol/L NaCl脱色。菌落周围会出现______,筛选_____的菌落即为木聚糖酶高产菌株。
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木聚糖酶系可以将半纤维素(一种多糖)转化为单细胞蛋白和其他有用物质。有些嗜热菌能产生耐热木聚糖酶,在食品工业上具有较高的潜在应用价值。现欲从温泉中分离能分解半纤维素的嗜热菌,并从中筛选木聚糖酶高产菌株,获得耐热木聚糖酶。回答下列问题:
(1)实验中,接种环使用前后都在酒精灯上灼烧,其目的是______________________________。
(2)取适量体积的样品涂布在富含__________且其为唯一碳源的固体培养基上,置于恒温培养箱中培养,菌落长出后,挑取单个菌落并进行一系列操作,然后在培养基上用__________法接种培养,进行菌株的__________。最后将得到的菌株接种到__________(填“固体”或“液体”)培养基中富集。
(3)将富集后的菌株接种于固体培养基上,待菌落长出后用0.1%的__________染色1h,再用1mol/LNaCl脱色。菌落周围会出现__________,筛选__________的菌落即为木聚糖酶高产菌株。
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溶菌酶遇碱易被破坏,但在酸性环境下,对热的稳定性很强。它能有效地水解细菌细胞壁的肽聚糖,广泛应用于食品加工、环境工程、医药制作等领域。请回答下列有关问题:
(1)酶所催化的化学反应速度常用____来表示。溶菌酶能杀菌但并不能杀死植物细胞的原因是:植物细胞的细胞壁主要成分不是肽聚糖而是____。
(2)溶菌酶常被用来作为食品防腐剂,食品最好是_____(用“酸/碱/中”作答)性,原因是:_______。
(3)在实际生产中常用固定化酶技术,固定化酶常采用的方法有_______,与直接使用酶相比,其主要优点是_______。
(4)用双层琼脂平板法从土壤样品中初步筛选产溶菌酶菌株。将均匀混有金黄色葡萄球菌的培养基倒入培养皿中形成下层培养基,将1ml土壤悬液加入已经凝固的下层培养基上,再倒入50℃培养基,混匀制成上层培养基。适宜条件下培养合适时间,结果如下图表示:
下层平板中加入的金黄色葡萄球菌的作用是:____;用无菌牙签挑取___菌落进一步的分离、鉴定。
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酵母菌与人类的生活息息相关,目前被广泛运用于食品、酿酒、医药卫生等方面。下图为科学家利用相关技术改造酵母菌以提高酿酒工艺。请据图回答:
(1)科学家将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中,经筛选获得高效利用淀粉的工程酵母菌菌种。上述基因工程过程中最常用的载体是__________,利用_________将目的基因和载体连接起来。淀粉酶基因之所以能嫁接到质粒的DNA分子上,是因为两者的DNA分子具有相同的化学组成和相同的______。培育工程酵母菌的核心操作步骤是下列的________。
A.提取目的基因(淀粉酶基因)
B.将目的基因与载体结合构建重组DNA分子
C.将目的基因导入酵母菌细胞
D.目的基因的检测和表达
(2)图中为达到筛选高效利用淀粉的工程酵母菌的目的,图中平板固体培养基应以_________作为唯一的碳源。若在获取高效酵母菌菌种后往培养基中加入___________指示剂,则这些工程菌菌落周围会出现____________现象时表明淀粉酶基因已在酵母菌细胞内成功表达。
(3)生产实践中利用紫甘薯制酒可提高其附加值,工业化大规模制酒前,需要将酵母菌种扩大培养,下列相关说法正确的是____________。
A.应将酵母菌种接种至固体培养基中
B.最后应使用由蛋白胨、酵母提取物等物质制备成的LB培养基培养菌种
C.所有操作工具都必须选择高压蒸汽灭菌锅灭菌
D.在超净工作台上进行接种工作时,应关闭事先打开的紫外灯
(4)为使发酵反应过程管道化、连续化和自动化,同时提高酵母菌多次使用率,科学家进行了固定化酵母菌的相关研究:取磁性壳聚糖微球固体颗粒,加入经扩大培养的酵母菌液,30℃条件下震荡1h,装入上图发酵柱中,用蒸馏水多次清洗。上述固定化酵母菌的方法属于________法。
(5)在酒精发酵阶段,密闭发酵柱内的酵母菌进行________呼吸。培养液中酒精的浓度一般不会超过________。发酵得到的葡萄酒因含有纤维素、果胶等多糖类而比较浑浊,而酵母菌因无分解此类物质的酶故无法直接分解澄清,在工业生产中可用经固定化的________加以澄清处理。
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(14分)乐果是一种广泛使用且含有机磷的农药,其残毒会对土壤造成严重污染。研究表明,阴沟肠杆菌、枯草芽孢杆菌等都对乐果有降解作用,可以用于修复由乐果造成的农田土壤污染。请分析回答下列问题:
(1)能分解乐果的阴沟肠杆菌、枯草芽孢杆菌等基本都分布在土壤的表层,它们的代谢类型应是________,在生态系统的成分中属于 ________。
(2)为比较阴沟肠杆菌、枯草芽孢杆菌对乐果的降解效率,课外小组的同学作了如下 实验:
①配制液体培养基。配制培养基时,除加入必要的营养物质,还必须加入 ________。将配好的培养基均分为甲、乙两组,进行 ________。
②各取阴沟肠杆菌、枯草芽孢杆菌的新鲜菌液lml,分别接种到上述甲、乙培养基中,适宜条件下培养48h。48h后通过检测 ________,可以比较阴沟肠杆菌、枯草芽孢杆菌对乐果的降解效率。
(3)农田中长期施用乐果会使动物的种类和数量减少。若要调查某农田中华大蟾蜍的种群密度,应采用 ________法。因污染太严重而废弃的农田在污染停止后将发生的群落演替,其类型属于 ________。
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枯草芽孢杆菌产生的蛋白酶在医药和化工等领域具有重要的价值。为筛选蛋白酶产量高的枯草芽孢杆菌菌株,分别将浸过不同菌株的提取液(a -e)及无菌水(f)的无菌圆纸片置于平板培养基表面,在37℃恒温箱中放置2-3天,结果如图。如图是枯草芽孢杆菌的蛋白酶和其它酶的热稳定性数据(酶在不同温度下保温足够长的时间后,再测定其最适宜温度下的活性)。请回答问题:
(l)在筛选枯草芽孢杆菌蛋白酶高产菌株时,培养基营养成分应包括水、无机盐、生长因子、葡萄糖、____。培养枯草芽孢杆菌时,常用摇床进行振荡培养,目的是______。
(2)a-e中蛋白酶产量最高的菌株是____(用字母回答),判断依据是____。
(3)在蛋白酶的生产过程中,通常先将发酵液在60 -70℃保温一定时间后,再制备酶制剂。保温一定时间的目的是____。
(4)质监局为了检验标有含该蛋白酶的加酶洗衣粉质量,设计了如图所示实验。如果实验结果是____,则说明该洗衣粉中含有蛋白酶。若用该实验来判断此酶活性大小可通过观察____实现。
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枯草芽孢杆菌产生的蛋白酶在医药和化工等领域具有重要的价值。为筛选蛋白酶产量高的枯草芽孢杆菌菌株,分别将浸过不同菌株的提取液(a -e)及无菌水(f)的无菌圆纸片置于平板培养基表面,在37℃恒温箱中放置2-3天,结果如图1。请回答问题:
(l)在筛选枯草芽孢杆菌蛋白酶高产菌株时,培养基营养成分应包括水、无机盐、生长因子、葡萄糖、____。培养枯草芽孢杆菌时,常用摇床进行振荡培养,目的是______。
(2)a-e中蛋白酶产量最高的菌株是____(用字母回答),判断依据是____。
(3) 利用凝胶色谱法分离提取到的部分蛋白质时,等样品完全进入凝胶层后,加入pH为7.0、浓度为20mmol/L的____________到适当高度进行洗脱,结果先洗脱出来的是_________的蛋白质。
(4)质监局为了检验标有含该蛋白酶的加酶洗衣粉质量,设计了如图2所示实验。如果实验结果是____,则说明该洗衣粉中含有蛋白酶。若用该实验来判断此酶活性大小可通过观察____实现。
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枯草芽孢杆菌产生的蛋白酶在医药和化工等领域具有重要的价值。为筛选蛋白酶产量高的枯草芽孢杆菌菌株,分别将浸过不同菌株的提取液(a -e)及无菌水(f)的无菌圆纸片置于平板培养基表面,在37℃恒温箱中放置2-3天,结果如图1。请回答问题:
(l)在筛选枯草芽孢杆菌蛋白酶高产菌株时,培养基营养成分应包括水、无机盐、生长因子、葡萄糖、____。培养枯草芽孢杆菌时,常用摇床进行振荡培养,目的是______。
(2)a-e中蛋白酶产量最高的菌株是____(用字母回答),判断依据是____。
(3) 利用凝胶色谱法分离提取到的部分蛋白质时,等样品完全进入凝胶层后,加入pH为7.0、浓度为20mmol/L的____________到适当高度进行洗脱,结果先洗脱出来的是_________的蛋白质。
(4)质监局为了检验标有含该蛋白酶的加酶洗衣粉质量,设计了如图2所示实验。如果实验结果是____,则说明该洗衣粉中含有蛋白酶。若用该实验来判断此酶活性大小可通过观察____实现。
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枯草芽孢杆菌产生的蛋白酶在医药和化工等领域具有重要的价值。为筛选蛋白酶产量高的枯草芽孢杆菌菌株,分别将浸过不同菌株的提取液(a~e)及无菌水(f)的无菌圆纸片置于平板培养基表面,在37 ℃恒温箱中放置2~3天,结果如图所示。请回答问题:
(1)在培养包括枯草芽孢杆菌在内的异养型微生物时,培养基营养成分应包括水和_______________,配制图1培养基的基本步骤是计算→称量→_____→灭菌→倒平板。
(2)a~e中蛋白酶产量最高的菌株是__(用字母回答),判断依据是________________。
(3)分离和纯化枯草芽孢杆菌可用稀释涂布平板法。在进行稀释涂布平板操作时,要将菌液进行一系列的_____________,涂布时,要将涂布器末端浸在盛有体积分数为______的烧杯中。
(4)工业上生产碱性蛋白酶成本高,目前可以采用___________技术多次重复使用以降低成本。
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