完全生物降解塑料（BDP）是淀粉与可降解聚酯的共混物，废弃物适合堆肥或墳埋等处理方式，能被...

完全生物降解塑料（BDP）是淀粉与可降解聚酯的共混物，废弃物适合堆肥或墳埋等处理方式，能被微生物完全分解，可持续替代以石油为原料的传统塑料，从而避免“白色污染”。回答下列问题。

（1）从填埋BDP的土壤中分离BDP分解菌的步骤是先从土壤取样并接种在液体培养基上，进行为期5天的_____________培养，以增加该菌的浓度；再将样品进行____________后，涂布接种到固体培养基上，以进一步分离纯化该菌。

（2）当淀粉被淀粉酶分解后，经稀碘液处理，培养平板上会出现以BDP分解菌为中心的____________。提纯淀粉酶可以采用凝胶色谱法，该方法是根据___________________分离蛋白质，所用凝胶的化学本质大多为_________________________。

（3）淀粉酶适宜采用__________________法固定化。某同学选用海藻酸钠作载体制备固定化BDP分解菌，制得的凝胶珠不是圆形或椭圆形，其主要原因是_____________________________。

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[生物——选修1：生物技术实践]

针对蔬菜废弃物纤维素降解慢的难题，从自然界中采集堆肥、枯树叶等样品进行分离，筛选分解能力较强的纤维素分解菌。某研究小组探究了温度对纤维素分解菌分解能力的影响，实验步骤如下：①纤维素分解菌的筛选、分离及纯化→②纤维素分解菌菌株数量的测定→③纤维素酶活力测定和降解滤纸能力的检测。请回答下列问题：

（1）步骤①中，用________法将1 mL菌液逐步稀释成10-6的悬浊液。为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表）：

注："+"表示有，"-"表示无。

据表判断，培养基甲_____（填"能"或"不能"）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是________；培养基乙________（填"能"或"不能"）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是____________。某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是____。

（2）对土壤中该类微生物进行计数，则步骤①采用的接种方法是______________。

（3）纤维素酶的测定方法，一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的________进行定量测定的方法。

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[生物一选修1生物技术实践专题]

针对蔬菜废弃物纤维素降解慢的难题，从自然界中采集堆肥、枯树叶等样品进行分离，筛选分解能力较强的纤维素分解菌。回答下列问题：

（1）采集的样品中的纤维素分解菌能产生纤维素酶，该酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即____酶、____酶和葡萄糖苷酶，葡萄糖苷酶可将_____________分解成葡萄糖。

（2）为了确保能够从样品中分离到所需要的微生物，通常可以通过__________增加纤维素分解菌的浓度。配制的培养基按物理性质分属于______培养基，其中碳源为__________,除碳源外，还应有的营养物质有水、氮源、________。

（3）为了分离出分解能力强的纤维素分解菌的单个菌落，用_________法将富含纤维素分解

菌的溶液接种到无色的培养基上，待长出菌落后，覆盖_____溶液，10～15分钟后倒去，再

经过________溶液的处理，15min后倒掉，此时，产生纤维素酶的菌落周围将会出现________。

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对于农作物秸秆的处理手段越来越倾向于添加高效降解微生物进行腐熟堆肥。为了寻求高效降解纤维素的微生物，某科研团队进行了纤维素优势分解菌的筛选实验。主要步骤如下：

①制备培养基。

②纤维素分解菌的分离、纯化。取富集培养后的土样培养液，经适当稀释后，移取培养液各0.1mL分别接种到能分别筛选出细菌、真菌和放线菌的固体培养基上进行分离、纯化培养。

③纤维素分解菌的初筛。将已经纯化的菌株接种到同一个以纤维素为唯一碳源的固体培养基上，使用刚果红染色法，根据培养基平板上透明圈直径（D）与菌落直径（d）比值的大小，初步筛选出纤维素优势分解菌。

回答下列问题：

（1）为了制成固体培养基，除了水、碳源、氮源和无机盐等基本配方以外，培养基中通常还需加入________。微生物吸收的无机盐的作用是_________________________________________________________________（答出两点即可）。

（2）步骤②、③中，若将稀释后且富含多种类型微生物的土样培养液直接涂布于同一个以纤维素为唯一碳源的固体培养基上，可能导致错过优势纤维素分解菌的发现，原因是___________________________。某研究人员将1mL培养液稀释100倍后，在4个平板上分别接入0.1mL的稀释液，经适当培养后，4个平板上的菌落数分别是15、151、155、159，据此可得出1L培养液中的活菌数是__________个。

（3）步骤③中，刚果红可以与纤维素形成______色复合物。接种在培养基上初筛分离得到的4个菌株的观察结果如下表。据表分析，哪号菌株产生的纤维素酶活性最高或其纤维素酶量最大？理由是什么？_______________________________________________

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2019年全国多个城市出台了本市的《生活垃圾分类管理办法》我们每天产生的塑料垃圾是惊人的，怎样处理塑料垃圾是迫在眉睫的问题。科学家发现了一种能分解聚乙烯（塑料的成分）的微生物：聚乙烯分解菌，它能分泌聚乙烯降解酶降解塑料，从中获取能量。

（1）聚乙烯分解菌与目前发现的新型冠状病毒在结构上的最大区别是____________________。

（2）在筛选聚乙烯分解菌过程中，应选择含___________丰富的垃圾场土壤，制作培养基时，应将___________作为培养基中的唯一碳源，并使用___________灭菌法对培养基进行灭菌。

（3）在制备培养基时，按照培养基配方准确称量各组分，将其溶解、定容后，需先调节培养基的pH，再灭菌倒平板的原因是____________________。倒平板时的温度一般是50℃的原因是__________________。

（4）甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定所选土壤样品中聚乙烯分解菌的数量，在同一稀释倍数下得到以下结果：

甲同学涂布了3个平板统计的菌落数分别是110、140和149，取平均值133。

乙同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是27、169和176，取平均值124。

这两位同学的结果中，___________的结果可信度低，其原因是：____________________。

（5）为测定聚乙烯降解酶降解塑料的能力，需要先将该分离出来，常用凝胶色谱法，凝胶色谱法分离聚乙烯降解酶的基本过程：样品加入后进行洗脱，而后收集聚乙烯降解酶。最后收集到的蛋白质样品与刚洗脱时收集到的蛋白质相比，分子质量较___________（填“大”或“小”），原因是___________________。

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焚烧和填埋是传统的垃圾处理方式，极易造成环境污染与资源浪费。目前我国正在大力推行垃圾分类管理，对不同种类的垃圾采取不同方式的回收利用，如利用厨余垃圾进行生物堆肥（利用微生物使垃圾中的有机物发生生物化学反应而降解）、生产饲料等，以实现废物的资源化利用。下列有关叙述正确的是（　　 ）

A.可采用样方法对垃圾填埋场中小动物类群的丰富度进行调查

B.垃圾分类管理有利于实现物质的循环再生和能量的循环利用

C.生物堆肥时要充分考虑垃圾性质、引入的微生物种类等因素

D.利用厨余垃圾进行生物堆肥过程中涉及的微生物属于消费者

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2019年12月1日，《生活垃圾分类标志》标准正式实施。生活垃圾被分为可回收物、有害垃圾、厨余垃圾及其他垃圾四大类。对厨余垃圾进行堆肥处理（利用微生物将垃圾中的有机物分解）是常用的方法。回答下列问题。

（1）不同微生物对厨余垃圾的分解能力不同，科研人员在选取能高效降解厨余垃圾微生物的过程中，获得纯净微生物的关键是__________。厨余垃圾含有较多盐分，在选取微生物时需在培养基中加入高盐配制成_________（填“选择”或“鉴别”）培养基，不耐盐的微生物会出现__________而致死的现象。

（2）堆肥过程可在露天进行，在发酵初期可在堆肥的某些部位进行打孔，其目的主要是__________；随着发酵的进行，堆肥温度在一段时间内会逐渐升高，其热量主要来自__________。研究人员欲探究温度对某菌株X的影响，可通过测定不同温度条件下__________来反映菌株处理厨余垃圾的能力，进而确定其所需的适宜温度条件。除盐度、温度对微生物分解能力的影响外，请列举两项影响微生物分解厨余垃圾的外界因素：______________________________。

（3）请列举两项进行垃圾分类或集中处理的益处：____________________。

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随着垃圾分类实行，餐厨垃圾高效处理迫在眉睫。餐厨废液中含有淀粉、蛋白质等有机物能够被微生物分解并利用。回答下列问题。

（1）传统餐厨垃圾主要以填埋、焚烧等方式进行处理，此种方式不可取的原因是____________。

（2）为探究处理餐厨垃圾的适宜方式，研究者进行了如下实验。

①以某食堂提供的午餐、晚餐残余混合物为材料，制成4种不同浓度的发酵液。

②将取自某污水处理厂的菌种加入发酵罐中，间隔不同时间分别加入等量不同浓度的发酵液，在厌氧条件下进行发酵。

③35℃下发酵并测定甲烷的产率，结果如下图。据图分析，你认为对餐厨垃圾较为适宜的处理及依据是_________________。

（3）为探究圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌处理某餐厨垃圾废液的最佳接种量比，来制备微生物菌剂，研究者做了如下实验：

①将两种菌液进行不同配比分组处理如下表所示：

将上表菌液外别接种于100mL某餐厨垃圾废液中进行振荡培养，振荡处理的目的是________________。本实验还需设置对照组为______________。

②培养3天后测定活菌数，取一定量菌液进行______________稀释，然后分别取0.1ml的菌液采用______________法接种于基本培养基中培养。进行计数时，可依据______________对两种菌进行区分，并选取菌落数在______________内的平板。实验结果表明，两菌种接种量比例为1:1时，废液中两种菌种的有效活菌数能够实现同步最大化。

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随着垃圾分类实行，餐厨垃圾高效处理迫在眉睫。餐厨废液中含有淀粉、蛋白质等有机物能够被微生物分解并利用。回答下列问题。

（1）传统餐厨垃圾主要以填埋、焚烧等方式进行处理，此种方式不可取的原因是____________。

（2）为探究处理餐厨垃圾的适宜方式，研究者进行了如下实验。

①以某食堂提供的午餐、晚餐残余混合物为材料，制成4种不同浓度的发酵液。

②将取自某污水处理厂的菌种加入发酵罐中，间隔不同时间分别加入等量不同浓度的发酵液，在厌氧条件下进行发酵。

③35℃下发酵并测定甲烷的产率，结果如下图。据图分析，你认为对餐厨垃圾较为适宜的处理及依据是_________________。

（3）为探究圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌处理某餐厨垃圾废液的最佳接种量比，来制备微生物菌剂，研究者做了如下实验：

①将两种菌液进行不同配比分组处理如下表所示：

将上表菌液外别接种于100mL某餐厨垃圾废液中进行振荡培养，振荡处理的目的是________________。本实验还需设置对照组为______________。

②培养3天后测定活菌数，取一定量菌液进行______________稀释，然后分别取0.1ml的菌液采用______________法接种于基本培养基中培养。进行计数时，可依据______________对两种菌进行区分，并选取菌落数在______________内的平板。实验结果表明，两菌种接种量比例为1:1时，废液中两种菌种的有效活菌数能够实现同步最大化。

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聚羟基脂肪酸酯（PHA）是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，它具有类似于合成塑料的理化特性，且废弃后易被生物降解，可用于制造无污染的“绿色塑料”。科学家从某咸水湖中寻找生产PHA菌种的流程图如下。下列说法正确的是（　　 ）

①取湖水→②接种在培养基上→③培养→④挑取单菌落，分别扩大培养→⑤检测菌的数目和PHA的产量→⑥获得目标菌株

A.步骤②可用稀释涂布平板法接种到含合成塑料的选择培养基上

B.扩大培养时，接种后需要将培养基放入恒温箱倒置培养，以防杂菌污染

C.④所用到的培养基应加入琼脂，以便挑取单菌落获得纯化菌株

D.挑取菌落时，应挑取多个菌落并分别测定嗜盐细菌的PHA含量

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