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哺乳动物产生的凝乳酶是一种重要的商用酶。图1是利用生物工程技术快速生产凝乳酶的过程；图2是图1中过程⑤合成的含有目的基因的DNA[片段，HindⅢ、EcoRI、BamHI分别为三种限制性内切酶，下图2中箭头所指为三种限制酶的切点；图3表示某种大肠杆菌的质粒中含有β半乳糖苷酶α片段序列，大肠杆菌的DNA分子中则含有β半乳糖酶ω片段序列，由于天然大肠杆菌同时具备这两种片段序列，可以使培养基中含有Xgal底物转变成蓝色产物，当缺少任意一个α或ω片段序列，Xgal底物不能转变成蓝色产物。图4是大肠杆菌中的质粒放大图。
（1）图1中所示通过①②③过程获取目的基因的方法为______________________。
（2）能否在该哺乳动物的唾液腺细胞中获得相关的mRNA，为什么？______________。
（3）将经转基因技术处理过的质粒导入大肠杆菌后，再将大肠杆菌接种到含有Xgal底物的培养基培养一段时间后，培养基中出现较多的蓝色菌落，这是因为__________________。
（4）应选用的限制性内切酶是____________，选择的依据是____________。
（5）图中的引物是RNA分子片段，由过程②设计该引物的原理依据是________。
（6）过程⑩的基本环节如下图：
酶蛋白沉淀的方法有_____________，提纯酶的方法常用_____________。
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（12分） 哺乳动物产生的凝乳酶是一种重要的商用酶。下图是利用生物工程
技术快速生产凝乳酶的过程。请据图分析回答下列问题：
（1）图中的目的基因就是控制________的基因。从生物细胞中直接切取目的基
因所需的酶与切开目的基因载体的酶必须是同种限制性内切酶，这是因为
________。
（2）图中的引物是RNA分子片段，由过程②设计该引物的原理依据是
________。
（3）过程⑤称为________。过程⑥这项技术全称为________。
（4）过程⑨、⑩属于________ 工程技术；图中包含多种生物工程技术，其中核
心工程技术是________工程。
过程⑩的基本环节如下图：
酶蛋白沉淀的方法有________，提纯酶的方法常用________。
（5）目的基因在牛与工程菌中表达的产物是一样的，说明________。
（6） 分子进化速率为每改变1%氨基酸需P年, 若人和猪胰岛素同源序列，在总
共m个氨基酸中有n个氨基酸不同，则可推知人和猪的祖先在距今
年前开始分道扬镳。
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哺乳动物产生的凝乳酶是一种重要的商用酶。下图是利用生物工程
技术快速生产凝乳酶的过程。请据图分析回答下列问题：
（1）图中的目的基因就是控制________的基因。从生物细胞中直接切取目的基
因所需的酶与切开目的基因载体的酶必须是同种限制性内切酶，这是因为
________。
（2）图中的引物是RNA分子片段，由过程②设计该引物的原理依据是
________。
（3）过程⑤称为________。过程⑥这项技术全称为________。
（4）过程⑨、⑩属于________ 工程技术；图中包含多种生物工程技术，其中核
心工程技术是________工程。
过程⑩的基本环节如下图：
酶蛋白沉淀的方法有________，提纯酶的方法常用________。
（5）目的基因在牛与工程菌中表达的产物是一样的，说明________。
（6） 分子进化速率为每改变1%氨基酸需P年, 若人和猪胰岛素同源序列，在总
共m个氨基酸中有n个氨基酸不同，则可推知人和猪的祖先在距今
年前开始分道扬镳。
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【生物——选修3：现代生物科技专题】奶酪生产中的凝乳酶是一种分泌蛋白。研究人员利用PCR技术扩增了目的基因，并培育了能合成凝乳酶的转基因酵母菌。请结合下图回答：
（1）利用PCR技术扩增目的基因原理与细胞内DNA复制类似（如左图所示）。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为________。PCR反应体系的主要成分应包含：扩增缓冲液（含ATP和Mg2+)、水、4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、引物和___________。
（2）为了食品安全，右图所示的表达载体需用___________酶切除抗性基因的部分片段，再用___________酶使表达载体重新连接起来。选用缺失URA3基因的酵母菌作为受体细胞（必须在含有尿嘧啶的培养基中才能存活），为了筛选出成功导入表达载体的酵母菌，所使用的培养基___________（填“需要”或“不需要”）添加尿嘧啶。
（3）工业生产过程中，选用大肠杆菌作为受体细胞不能正常表达出凝乳酶，而选用酵母菌则能，原因是酵母菌含有______________________。
（4）测定凝乳酶基因转录的mRNA序列，测得从起始密码子到终止密码子之间的序列为1201个碱基，经判断这段序列的测定是错误的，为什么？_______________________。
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凝乳酶能够使乳汁中的蛋白质凝聚形成奶酪，主要来源为未断奶的小牛胃粘膜。随着社会发展，传统来源的凝乳酶已不能满足生产需要。研究人员利用PCR技术扩增了目的基因，并培育了能合成凝乳酶的转基因酵母菌，从而获得足够的凝乳酶。回答下列问题：
(1)利用PCR技术扩增目的基因的前提条件是要有____________用来合成引物。PCR反应体系的主要成分应包含：扩增缓冲液(含ATP和Mg2+)、4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、引物和_____________。
(2)凝乳酶基因可从构建的凝乳酶基因组文库中获取，也可以从其cDNA文库中获取，从前者获取的凝乳酶基因__________（填“含有”或“不含有”）启动子。
(3)利用PCR技术扩增目的基因后需要构建基因表达载体，其目的是___________。
(4)构建基因表达载体过程中需要用__________（酶）处理。目的基因转录过程中，__________能使转录在所需要的地方停止下来。
(5)分子水平上检测目的基因是否成功导入酵母菌的方法是___________________。
(6)工业生产过程中，使用酵母菌作为受体，而不选用大肠杆菌的原因是_______。
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凝乳酶能够使乳汁中的蛋白质凝聚形成奶酪，主要来源为未断奶的小牛胃粘膜。随着社会发展，传统来源的凝乳酶已不能满足生产需要。研究人员利用PCR技术扩增了目的基因，并培育了能合成凝乳酶的转基因酵母菌，从而获得足够的凝乳酶。回答下列问题：
(1)利用PCR技术扩增目的基因的前提条件是要有____________用来合成引物。PCR反应体系的主要成分应包含：扩增缓冲液(含ATP和Mg2+)、4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、引物和_____________。
(2)利用PCR技术扩增目的基因后需要构建基因表达载体，其目的是___________。构建的基因表达载体中通常含有标记基因，其作用是__________________。
(3)分子水平上检测目的基因是否成功导入酵母菌的方法是___________________。
(4)工业生产过程中，使用酵母菌作为受体，而不选用大肠杆菌的原因是_____________________________________。
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如图为科学家培育能生产人血清白蛋白乳腺生物反应器的过程，据图回答下列问题： 
(1)利用PCR技术扩增目的基因，前提是________，以便据此合成________．一个DNA分子三轮复制以后，含有两种引物的DNA分子有________个．
(2)得到的转基因母牛通过有性生殖产生的雌性后代不一定能产生人血清白蛋白，为了保证其遗传性状不变，科学家可通过________技术保证其优良性状，该技术的成功证明了________．该技术的最后一个环节是________，其优势是________．若想提高同卵双胎或多胎的概率，可利用________技术．
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凝乳酶是奶酪生产中的关键性酶，研究人员运用基因工程技术，将编码该酶的基因转移到了微生物细胞中并使之表达。下图是基因工程中获取目的基因和构建重组质粒过程，请回答有关问题：
①科学家己经测出该酶的氨基酸序列，因此可以通过__________方法来获取目的基因，获得目的基因后，常利用PCR技术在体外将其大量扩增；②分析上图可知，构建重组DNA分子（如图所示）最好选用__________限制酶，理由是____________________。
（2）工业化生产过程中，最初多采用重组大肠杆菌或芽孢杆菌生产凝乳酶，将目的基因导入大肠杆菌或芽孢杆菌前所做的处理方法是___________________。现在生产凝乳酶多采用重组毛霉或重组的酵母菌，毛霉或酵母菌作为受体细胞的优势是____________________。
（3）研究发现，如果将该凝乳酶20位和24位氨基酸改变为半胱氨酸，其催化能力将提高2倍，科学家可以生产上述高效凝乳酶的现代生物工程技术是___________。该生物工程技术的实质是__________。
（4）转基因技术和细胞工程在动植物都有广泛应用，但是，胚胎工程只是指对动物的__________所进行的多种显微操作和处理技术。
（5）生态工程是实现循环经济最重要的手段之一，请写出它遵循的基本原理_________（至少答二项）。
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研究人员利用PCR技术扩增了目的基因，并培育了能合成凝乳酶的转基因酵母菌。请结合下图回答：
（1）利用PCR技术扩增目的基因原理_____________________。左图中引物为单链DNA片段，它是根据___________________的脱氧核苷酸序列合成的。从理论上推测，第2轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为________。
（2）右图所示的基因表达载体中的URA3基因能编码乳清苷5-磷酸脱羧酶，该酶能催化酵母菌尿嘧啶的合成，若酵母菌缺乏乳清苷5-磷酸脱羧酶，就无法生长，除非在培养基中加入尿嘧啶。利用URA3基因作为__________基因来筛选转化成功的酵母菌，要选择_______________的酵母菌作为受体细胞，所使用培养基___________（填“需要”或“不需要”）添加尿嘧啶。
（3）奶酪生产中的凝乳酶是一种分泌蛋白。工业生产过程中，________（能/否）选用大肠杆菌作为受体细胞表达出凝乳酶？原因是______________________。
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乳腺生物反应器是基于转基因技术平台，将外源基因导入动物基因组中并定位表达于动物乳腺，利用动物乳腺能够天然、高效合成分泌蛋白的能力。下图是利用生物工程技术让羊生产治疗心脏病药物tPA的大致过程。请据图回答：
(1)图中①表示基因表达载体的构建，该载体的组成通常有外源基因、________、______
, ________等。
（2）图中②过程选择受精卵作为tPA基因受体细胞的主要原因是________________
受体细胞除受精卵外，还可以是________。
(3)图中③过程的受体母羊事先应接受________处理。
(4)图中④表示检测和筛选过程，通常采用的方法是________ ，________。
(5)要快速扩大转基因羊群，除了让转基因羊进行有性杂交外，还可采取哪些方法？请列举两种。____________________________,____________________________。
(6)乳腺生物反应器可用来生产多肽类药品、抗体、疫苗、酶制剂等 ，在构建基因表达载体时，注意要在目的基因前加能在启动子。除利用乳腺、膀胱等生物反应器外，人们还可利用_____________、________________等方法来生产上述物质。而传统生产上述药品是________提取，存在的缺点是：________。