多发性硬化症是一种由纤维蛋白渗入大脑引发的神经系统疾病。科研人员制备了抗纤维蛋白的单克隆抗体(5B8)。请回答问题。
(1)科研人员将纤维蛋白作为________注射到小鼠体内,激活________过程产生抗体。
(2)科研人员利用上述小鼠制备了抗纤维蛋白的单克隆抗体(5B8),请说明制备的基本技术流程____________。
(3)活性氧(ROS)是氧分子正常代谢的副产物,但当吞噬细胞中的ROS大量产生并释放时,会毒害周围神经元。NADPH氧化酶是催化细胞内产生ROS的主要酶。为研究单克隆抗体5B8的作用机制,研究人员检测了5B8处理后,吞噬细胞中NADPH氧化酶和ROS的含量,结果如图。
①由于细胞中GADPH蛋白________,在实验中可作为标准参照,排除实验操作等无关变量对结果的影响。
②对比____________组检测结果,可知纤维蛋白提高了吞噬细胞中NADPH氧化酶和ROS的含量,使其对神经元产生毒害。
③另有试验结果显示,单克隆抗体5B8对多发性硬化症有明显疗效。请根据上述结果分析其具有疗效的原因____________。
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多发性硬化症是一种由纤维蛋白渗入大脑引发的神经系统疾病。科研人员制备了抗纤维蛋白的单克隆抗体(5B8)。请回答问题。
(1)科研人员将纤维蛋白作为________注射到小鼠体内,激活________过程产生抗体。
(2)科研人员利用上述小鼠制备了抗纤维蛋白的单克隆抗体(5B8),请说明制备的基本技术流程____________。
(3)活性氧(ROS)是氧分子正常代谢的副产物,但当吞噬细胞中的ROS大量产生并释放时,会毒害周围神经元。NADPH氧化酶是催化细胞内产生ROS的主要酶。为研究单克隆抗体5B8的作用机制,研究人员检测了5B8处理后,吞噬细胞中NADPH氧化酶和ROS的含量,结果如图。
①由于细胞中GADPH蛋白________,在实验中可作为标准参照,排除实验操作等无关变量对结果的影响。
②对比____________组检测结果,可知纤维蛋白提高了吞噬细胞中NADPH氧化酶和ROS的含量,使其对神经元产生毒害。
③另有试验结果显示,单克隆抗体5B8对多发性硬化症有明显疗效。请根据上述结果分析其具有疗效的原因____________。
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EV71是引发手足口病的一种人肠道病毒。为制备抗EV71的单克隆抗体,科研人员用小鼠进行实验。
(1)将EV71灭活病毒、EV71外壳蛋白VP1和VP2作为______分别注射到3组小鼠体内,引发小鼠机体的_______免疫,产生相应的抗体。
(2)多次免疫后,分别取上述3组小鼠的血清和未免疫小鼠血清,测定抗体与抗原的结合强度,结果如图所示。
①EV71免疫的小鼠血清抗体_______(填“是”或“不是”)单一抗体,判断依据是___________。
②测定各组小鼠血清与非EV71蛋白结合强度,目的是排除___________________的影响。
③制备抗EV71单克隆抗体时,选用_______免疫的小鼠脾脏细胞效果最佳,依据是___________________________________________。
(3)取相应免疫组小鼠的脾脏,剪碎并用________酶处理得到小鼠脾脏细胞,用灭活的病毒诱导,与________细胞融合,筛选获得5个不同的杂交瘤细胞株。
(4)为进一步研究抗体的作用效果,科研人员培养上述杂交瘤细胞株,获得5种单克隆抗体,分别将它们与等量EV71混合,加入到5组RD细胞(EV71的宿主细胞)中,测定______________,以分析抗体的作用效果。
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EV71是引发手足口病的一种人肠道病毒。为制备抗EV71的单克隆抗体,科研人员用小鼠进行实验。
(1)将EV71灭活病毒、EV71外壳蛋白VP1和VP2作为______分别注射到3组小鼠体内,引发小鼠机体的_______免疫,产生相应的抗体。
(2)多次免疫后,分别取上述3组小鼠的血清和未免疫小鼠血清,测定抗体与抗原的结合强度,结果如图所示。
①EV71免疫的小鼠血清抗体_______(填“是”或“不是”)单一抗体,判断依据是___________。
②测定各组小鼠血清与非EV71蛋白结合强度,目的是排除___________________的影响。
③制备抗EV71单克隆抗体时,选用_______免疫的小鼠脾脏细胞效果最佳,依据是___________________________________________。
(3)取相应免疫组小鼠的脾脏,剪碎并用________酶处理得到小鼠脾脏细胞,用灭活的病毒诱导,与________细胞融合,筛选获得5个不同的杂交瘤细胞株。
(4)为进一步研究抗体的作用效果,科研人员培养上述杂交瘤细胞株,获得5种单克隆抗体,分别将它们与等量EV71混合,加入到5组RD细胞(EV71的宿主细胞)中,测定______________,以分析抗体的作用效果。
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神经纤毛蛋白-1 (NRP-1) 是一种多功能糖蛋白,在多种肿瘤组织中呈高表达,可与血管内皮生长因子结合促进肿瘤血管的形成,使肿瘤体积增大。科研人员通过制备NRP-1单克隆抗体,开展对小鼠的乳腺癌肿块进行靶向治疗的研究。请分析回答:
(1)制备单克隆抗体涉及的动物细胞工程常用技术手段有_________________________(写出两项)。
(2)制备时,首先给小鼠注射___________________________,分离得到B细胞。将B细胞与骨髓瘤细胞诱导融合后得到杂交瘤细胞,经系列处理选出______________________细胞注射到小鼠腹腔中,从腹水中提取到大量的NRP-1单克隆抗体。
(3)为了论证制取的单克隆抗体的治疗效果,研究者选择生长状况一致的小鼠,分别注射等量的乳腺癌细胞悬液,经饲养后,各小鼠均形成了体积基本相同的肿瘤。
①将上述小鼠随机分成实验组和对照组,实验组和对照组应分别注射____________,___________________,且每隔3天重复进行相同的注射操作,一段时间后测算发现,实验组小鼠的肿瘤体积都小于对照组,原因可能是_________________________发生特异性结合,阻断了___________________________的结合,从而抑制了肿瘤内血管生成,导致肿瘤体积减小。
②上述实验小鼠应选用没有___________________(器官)的动物模型鼠,由于这种鼠存在免疫缺陷,实验时可以避免小鼠的免疫系统对NRP-1单克隆抗体和乳腺癌肿块进行攻击,从而保证实验结果更可靠。
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中国科学院微生物研究所的科研攻关团队在新型冠状病毒肺炎治疗性单克隆抗体研究方面取得了很好的进展。鼠源单克隆抗体用于疾病治疗时有严重不足,单克隆抗体人源化已成为热点课题。请回答下列问题:
(1)制备单克隆抗体的过程中使用的技术手段有______________ 和动物细胞培养,前者依据的原理是_________________________。
(2)制备抗新型冠状病毒的单克隆抗体时,需将灭活的新型冠状病毒注射到小鼠体内,目的是_____________________________。单克隆抗体制备的过程中需要进行多次筛选,第一次筛选的目的是获得____细胞,该过程一般使用特定的选择性培养基培养,最后收集增殖细胞即可达到筛选目的,其原因是____________________________。
(3)除了使用单克隆抗体诊断人体是否感染新型冠状病毒(RNA病毒)外,还可以采用核酸(DNA)检测试剂盒检测,请写出该试剂盒制备和检测的基本思路:_________________。
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下图是制备抗埃博拉病毒(EBoV)VP40蛋白单克隆抗体的过程。请据图回答:
(1)埃博拉病毒(EBOV)的遗传物质是RNA,EBOV病毒容易变异的原因是____________。
(2)科研人员利用小鼠的B淋巴细胞与鼠的瘤细胞进行杂交,获得纯净的单一品种抗体,其特点是_________________,可以用此抗体与放射性同位素、化学药物或细胞毒素相结合,制成“_______________ ”,抗击埃博拉病毒(EBOV)。
(3)利用PCR获取目的基因的过程中,反应体系内要加入含有VP40基因的DNA、dNTP、Taq酶和根据________________________合成的引物。
(4)选用EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切的优点是 ___________________________ ;VP40基因进入大肠杆菌细胞,并在大肠杆菌内维持稳定和表达,该过程可称为_____________。
(5)过程⑥常用的不同于植物原生质体融合的促融方法是用_________________处理。
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布鲁菌病是一种由 布鲁菌引起的人鲁共患传染病,简称布病。为研制快速检测布病的产品,科研人员对布鲁菌单克隆抗体的制备进行了相关研究。回答下列问题:
(1)布鲁菌单克隆抗体能用于布病的检测,其原理是依据了__________________________的特性。
(2)在制备布鲁菌单克隆抗体时,要先在小鼠体内注射布鲁菌的脂多糖(LPS), 才能在小鼠的____________________细胞中形成相应B淋巴细胞,注射LPS后能形成相应B淋巴细胞的原因是_______________________________________________________________。
(3)在获得相应B淋巴细胞后,要将其与鼠的______________________融合,并用特定的选择性培养基进行筛选,在该培养基上_____________细胞和____________的细胞都会死亡,从而可筛选出具有___________________________________________________特点的杂交瘤细胞。
(4)利用杂交瘤细胞进行体外培养获得单克隆抗体后,可用该抗体分别与布鲁菌和其他细菌的裂解抗原进行反应,若____________________________,则说明该单克隆抗体的特异性强。
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人肌红蛋白(Myo)是早期诊断急性心肌梗塞的生化标志物之一。为制备抗Myo的单克隆抗体,科研人员进行研究。
(1)科研人员以Myo作为抗原免疫小鼠,取小鼠的脾脏细胞与_________细胞诱导融合。用_________培养基筛选融合细胞,得到杂交瘤细胞。
(2)将得到的杂交瘤细胞接种到多孔培养板上,进行抗体阳性检测,之后稀释、培养、再进行抗体阳性检测并多次重复上述操作,多次重复该过程的目的是筛选获得抗Myo抗体_________的杂交瘤细胞。
(3)双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法,具体原理如下图:
固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合,这是由于不同抗体与同一抗原表面的_________结合。该检测方法中,酶标抗体的作用是_________。
(4)研究人员获得三种抗Myo单克隆抗体,分别记为A、B、C。为检测它们之中哪两种适合用于双抗体夹心法,科研人员需要进行_________组实验,检测并比较各组实验的_________。
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已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒,该病毒表面的A蛋白为主要抗原。现利用该病毒通过基因工程和单克隆抗体制备技术来生产预防和诊断该疾病的疫苗和抗体。请回答下列问题:
(1)由该RNA病毒获得A基因过程中发生的碱基互补配对方式为______________。
(2)制备A蛋白过程的核心是构建A基因表达载体,启动子和终止子也需要重新构建,以能被受体细胞的____________所识别,便于其催化转录过程。
(3)将提取的A蛋白重复注射到小鼠皮下细胞,目的是获得更多的___________细胞,而使获得________细胞的几率大大增加,再通过扩大培养提取单克隆抗体。
(4)对健康人进行该传染病免疫预防时,可选用提取的_________来制备疫苗。对该传染病疑似患者确诊时,可以用 ______________与分离出的病毒进行特异性检测。
(5)与传统工程相比,生态工程是一类___________的工程体系。沼气工程利用的原理主要是_________
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已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒,该病毒表面的A蛋白为主要抗原。现利用该病毒通过基因工程和单克隆抗体制备技术来生产预防和诊断该疾病的疫苗和抗体。请回答下列问题:
(1)由该RNA病毒获得A基因过程中发生的碱基互补配对为__________。获得A基因后,可以利用__________技术进行扩增,该技术要用到一种特殊的__________酶。
(2)制备A蛋白过程的核心是构建A基因表达载体,启动子和终止子也需要重新构建,以能被受体细胞的__________所识别,便于其催化转录过程。
(3)将提取的A蛋白重复注射到小鼠皮下细胞,目的是获得更多的__________,从而使获得__________细胞的几率大大增加,再通过扩大培养提取单克隆抗体。
(4)对健康人进行该传染病免疫预防时,可选用提取的__________来制备疫苗。对该传染病疑似患者确诊时,可以用__________与分离出的病毒进行特异性检测。
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