下列有关使用高压蒸汽灭菌锅的操作，错误的是( )A.加水时，水面应与三角搁架平齐B.加盖时...

下列有关使用高压蒸汽灭菌锅的操作，错误的是(　　)

A. 加水时，水面应与三角搁架平齐

B. 加盖时，将排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内

C. 加热时，待冷空气完全排尽后关上排气阀

D. 切断电源后，打开排气阀使压力表降到零后开盖

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下列有关使用高压蒸汽灭菌锅的操作，错误的是(　　)

A.加水时，水面应与三角搁架平齐

B.加盖时，将排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内

C.加热时，待冷空气完全排尽后关上排气阀

D.切断电源后，打开排气阀使压力表降到零后开盖

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下列关于无菌操作技术的说法，正确的是(　　)

A. 消毒仅能杀死物体表面的芽孢和孢子　　 B. 液态的牛奶可用巴氏消毒法消毒

C. 培养皿、胶头吸管可用干热灭菌法灭菌　　 D. 高压蒸汽灭菌时间达到后立即排气降温

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下列关于制备牛肉膏蛋白胨培养基的叙述,错误的是　　 (　 )

A. 培养基应先调pH再进行灭菌

B. 培养基应先灭菌再分装到培养皿

C. 溶化琼脂时不能使培养基溢出或烧焦

D. 高压蒸汽灭菌锅加盖时应按顺时针方向依次旋紧螺栓

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回答下列（一）、（二）小题：

（一）回答下列《生物技术实践》有关问题：

（1）高压蒸汽灭菌锅灭菌，开始加热时要打开排气阀、关闭安全阀，其目的是为了_________，以避免锅内达不到预设的温度或压力。

（2）葡萄酒呈现深红色的原因是_________。发酵完成后，将发酵液用_________过滤，除去葡萄皮和籽；酿果酒时，加蔗糖是为了_________。

（3）在制作泡菜测定亚硝酸盐含量时，显色剂是由10g/L的对氨基苯磺酸和1g/L的N-1-萘基乙二胺_________混合而成，泡菜打成匀浆前，_________（填不需要/需要）用清水冲洗；泡菜腌制过程中若泡菜坛有砂眼，常导致腌制的蔬菜臭而不酸，其原因可能是_________条件下乳酸菌不发酵，而其它杂菌繁殖后导致蔬菜腐败发臭。泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有_________等（写出两点）。

（二）药用植物是一类具有特殊用途的经济植物，对人类健康具有重要的医疗和保健作用。药用植物的品种改良工作引起了科研人员的重视。请回答下列问题：

（1）科研人员通过对植物_________的培养进行单倍体克隆。为鉴定单倍体植株，可通过制作临时装片观察_________来确定。

（2）人参皂甙具有抗肿瘤等作用，科研人员设计如图1所示流程制备人参皂甙Rg3，并研究过程③生物反应器中人参细胞产量、人参皂甙Rg3产量随培养时间的变化，结果如图2。

图1中的过程②常将愈伤组织进行悬浮培养得到X，X是_________，实现了能产生人参皂甙Rg3的细胞克隆及其工业化生产。由图2可知，影响人参皂甙Rg3产量的因素是_________。

（3）东莨菪碱是从东莨菪中分离出来的可用于麻醉镇痛、止咳、平喘。将莨菪中提取到天仙子胺6β羧化酶基因转入颠茄中，转基因颠茄能够产生大量的东莨菪碱。构建该目的基因的基因文库需要用到的工具酶是_____，然后用_________从该基因文库中选择、钓取。含目的基因的农杆菌侵染植物细胞时，加入农杆菌培养液中的植物组织往往切成许多小块，这种创伤刺激的意义是_________（写出两点）。

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某研究小组以紫葡萄为原料制作葡萄酒的基本流程和装置示意图如下。请回答下列问题：

（1）用高压蒸汽灭菌法对葡萄浆进行灭菌，灭菌锅内连接在盖上软管的作用是__________________。

（2）固定化酵母细胞常用的包埋剂是_________________，将混合液滴入到适宜浓度的CaCl2．溶液中，CaCl2的作用是___________________。

（3）从装置图来看，该小组实验存在的不足是_______，这样会造成________________________。

（4）经检测，过滤前的发酵液中存在酵母菌，最可能的原因是_____________________，使用血球计数板（16×25， 1mm×lmm）测定其浓度，某个小方格中酵母菌分布如图，则统计该小方格的酵母菌数量为______________________个。

（5）实验中，判断发酵完毕的依据是 _____________________。

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回答下列（一）、（二）小题：

（一）请回答与微生物培养和植物组织培养有关的问题：

（1）高压蒸汽灭菌是常见的无菌操作。在对培养基进行高压蒸汽灭菌时，发现灭菌锅内压力达到1kg/cm2而温度未达到121℃，为同时达到设定的温度和压力要求，此时应该___________（填操作过程）。利用果酒制作果醋时，___________（填“能”或者“不能”）对果酒进行高压蒸汽灭菌。

（2）制作泡菜时，蔬菜入坛前在开水中浸1 min和坛内加入一些___________以减少发酵时间。测定泡菜汁样品液亚硝酸盐的含量时，如果错将光照波长550nm变成450nm，OD值会变___________。

（3）在超净台内接种目标菌种时，紫外灯应该关闭，这是因为___________（至少写出两点）。

（4）在配制MS培养基时，常先配成母液后用时稀释，这样做的优点是___________。在对菊花茎段进行组织培养时，一般先选用___________培养基。

（二）回答与基因工程和植物克隆有关的问题：

科研工作者将TaNHX2基因转移到某植物细胞内，获得了转基因耐盐植株新品种。下图是获取的含有目的基因的DNA片断，Sau3AⅠ、 EcoRⅠ、 BamhⅠ三种限制性核酸内切酶的识别序列分别是↓GATC、G↓AATTC、G↓GATCC，质粒上各有一个Sau3AⅠ和 ECoRⅠ的酶切位点。请分析回答问题：

（1）若用BamH Ⅰ切割图中所示的DNA片段获得了目的基因，则需选用___________酶切割质粒，以便构建重组质粒，该方案的缺陷是会出现目的基因和质粒的自我环化以及___________。故切割图中所示DNA片段的最佳方案是选用___________酶。实验中酶作用的强弱可用___________表示。

（2）将获得的重组质粒导入原生质体，导入方法有农杆菌转化法和___________。原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇，其作用是___________。原生质体经过细胞壁再生，进而分裂和脱分化形成___________。

（3）为了从个体水平检测成果，需要进行的操作是___________。

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下列关于微生物实验操作的叙述，正确的是（　　 ）

A.微生物的培养实验中用到的仪器都要进行高压蒸汽灭菌

B.使用G6玻璃砂漏斗进行过滤灭菌时，可通过抽滤加快灭菌速度

C.倒平板时，应将打开的培养皿盖放到一边，以免培养基溅到培养皿盖上

D.能利用尿素的细菌，通过分泌的脲酶将尿素分解为氨和H2O，并利用其中的氨

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下列操作正确的是（　 ）

A.G6玻璃砂漏斗使用前后都需要高压蒸汽灭菌法灭菌

B.若需在超净台操作，从接种前30分钟开始至接种结束，紫外灯和过滤风必须始终开着

C.α-淀粉酶固定化之后及淀粉水解作用的检测之后，都需要洗涤酶柱，这2次酶柱的洗涤所用蒸馏水的体积相同，流速相同，但目的不同

D.制作酵母悬液和用果汁制果酒时，都需要加入适量的蔗糖，其作用相同

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下列有关微生物培养的叙述，错误的是

A. 用平板划线法分离大肠杆菌时，需要多次灼烧接种环

B. 倒置平板可防止培养皿盖上的冷凝水滴落，造成污染

C. 新配置的培养基可以用高压蒸汽灭菌或干热灭菌的方法灭菌

D. 获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染

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