有些微生物含有纤维素酶。人们研究和应用这些微生物，可将农作物秸秆等废弃物生产出酒精等产物。...

有些微生物含有纤维素酶。人们研究和应用这些微生物，可将农作物秸秆等废弃物生产出酒精等产物。实验室培养纤维素分解菌，需要配制培养基。下表为纤维素分解菌的鉴别培养基配方：

为了测定某种分解纤维素的微生物生长所需要的最适pH，甲、乙两组同学分别设计了下列实验方案：

（1）甲组方案：

①称量培养基各成分各5份，分装到5个锥形瓶中，用缓冲液分别调节pH为6、6．5、7、7．5、8，分别标号为I、II、III、IV、V。

②将每瓶培养基等量分装到5支试管中，加棉塞并包扎成5捆。

③将试管放到1个大烧杯中，在酒精灯上加热煮沸15~30 min灭菌，待温度冷却到50°C，将试管搁置斜面。

④在无菌条件下，往每支试管中接种等量的菌种，一共接种25支，然后，将它们置于37 °C左右的恒温箱中培养12~24 h。

⑤测定每支试管中培养基的重量，观察并记录实验结果。

方案公布后，乙组同学指出甲组同学的方案需要完善，因为上述步骤中至少存在3处明显错误。请你帮甲组同学找出3处错误来，并加以更正。____________________________________________。

（2）乙组方案：

①称量培养基各成分，配制培养基，分装到5支试管中。

②将培养基的pH分别调节到6、6．5、7、7．5、8后，将培养基灭菌。待适当冷却后，搁置斜面。

③将等量的纤维素分解菌分别接种在上述培养基上。

④放在适宜条件下培养，观察并记录结果。

乙组同学仅凭一次实验就能确定微生物生长所需要的最适pH吗?____________。为什么?________ 。

（3）为了提高纤维素分解菌的产酶量，请你利用诱变育种的方法，设计一个实验获得产纤维素酶较多的菌株。

①将培养好的生产菌株分成两组，一组用一定剂量的诱变剂处理，另一组不处理作对照。

②把诱变组的大量菌株接种到多个含有____________的固体培养基上，同时接种对照．组（未处理）的菌株。把它们置于相同的条件下培养。

③用__________染色。

④结果：诱变组透明圈与对照组相比，面积较_________（填“大”或“小”），则说明诱变育种成功了。

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土壤中的纤维素分解菌能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究与应用，使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等。从土壤中分离纤维素分解菌的实验流程如下：

土壤取样→选择培养基→梯度稀释→鉴别培养基

（1）纤维素酶是复合酶，由C1酶、Cx酶和__________组成。

（2）实验室中微生物筛选常应用选择培养基的方法，原理是__________。为分离得到纤维素分解菌，使用的培养基应以__________作为主要碳源。

（3）梯度稀释前进行选择培养的目的是__________，这一步一般选用__________（填“固体”或“液体”）培养基。

（4）梯度稀释后用__________（仪器）将菌种接种在培养基表面。

（5）用__________染色法鉴定纤维素分解菌时，培养基上的菌落周围会形成透明圈，其大小反映____________________。

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某些微生物能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究，人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等。研究人员用下表的培养基，成功地筛选到纤维素分解菌。请分析并回答问题：

（1）筛选纤维素分解菌时会在富含纤维素的环境中寻找，原因是________________有人为筛选到这样的微生物还将滤纸埋在土壤中，作用是__________________________________________。

（2）该配方是_______________培养基(根据物理状态)。这个培养基对微生物是否具有选择作用，如果具有，又是如何进行选择的？______________________________________________。

（3）选择培养能够“浓缩”所需的微生物的原因是_________________________________________

（4）一同学在纯化该类生物时，发现涂布的培养基上菌落连成一片，最可能的原因是___________________，应该采取____________措施避免出现此现象。另一同学使用划线法分离纯化菌株，经一段时间培养，发现有的线上长满了菌，有的线上无菌落，造成这种情况的原因可能是划线操作时_____________。

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有些微生物能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究和应用，使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等。研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐、以及微量元素配制的培养基，成功地筛选出能产生纤维素酶的微生物。请分析后回答下列问题：

(1)培养基中加入的化合物A是________，为微生物的生长提供________，这种培养基属于________培养基。

(2)为了筛选出能产生纤维素酶的微生物，应向培养基中加入________。

(3)在筛选出能产生纤维素酶的微生物之前，可用液体培养基培养，增加微生物的浓度。若获得纯净的菌株，常采用平板划线的方法进行接种，此过程所用的接种工具是________，操作时采用________灭菌的方法，还可用________方法进行接种。

(4)实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，这样做的目的是________________________________________________________________。

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有些微生物能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究和应用，使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等。研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐、以及微量元素配制的培养基，成功地筛选出能产生纤维素酶的微生物。请分析后回答下列问题：

(1)培养基中加入的化合物A是________，为微生物的生长提供________，这种培养基属于________培养基。

(2)为了筛选出能产生纤维素酶的微生物，应向培养基中加入________。

(3)在筛选出能产生纤维素酶的微生物之前，可用液体培养基培养，增加微生物的浓度。若获得纯净的菌株，常采用平板划线的方法进行接种，此过程所用的接种工具是________，操作时采用________灭菌的方法，还可用________方法进行接种。

(4)实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，这样做的目的是________________________________________________________________。

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生物乙醇是以生物为原料生产的可再生能源。我国利用农作物废弃物(秸秆)生产乙醇，其技术流程为：纤维素酶分解→酵母菌发酵→蒸馏→成品。如果向含有纤维素培养基中加入刚果红染液时，刚果红会与纤维素形成红色复合物，而呈现红色，如果纤维素被降解，则培养基表面会形成以纤维素分解菌为中心的透明圈。　请分析回答下列问题：

71、纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取。某同学设计了从土壤中分离纤维素分解菌的实验流程：土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养。

①最好选择________环境采集土样。

②配置培养基时，各种成分在熔化后分装前必须进行________，接种前要进行________。在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在无菌条件下进行。在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，应将平板倒过来放置，这样做的目的是________ 。

③以下是两种培养基配方：

A培养基配方：

B培养基配方：

如果要分离提纯土壤中的纤维素分解菌，应选择________(填编号) 培养基配方，从功能看该培养基属于________培养基。

④为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，可以在鉴别培养基中加入刚果红染液，将筛选获得的菌液稀释后用________　　 法接种到鉴别培养基上，然后挑选产生________　 的菌落作为菌种进行扩大培养。

72、进行工业化酶解时，为了使纤维素酶能反复使用，可以采用酶固定化技术，其具体方法包括如下图所示的三种，则①表示________、②表示________、③表示载体结合法。

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（8分）【生物——生物技术实践】

有些微生物能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究，使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等。研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能产生纤维素酶的微生物。分析回答问题。

（1）培养基中加入的化合物A是________，为微生物的生长提供________，这种培养基属于________培养基。

（2）为了筛选出能产生纤维素酶的微生物，向培养基中加入________。

（3）在筛选出能产生纤维素酶的微生物之前，可用液体培养基培养，增加微生物的浓度。若获得纯净的菌株，常采用平板划线的方法进行接种，此过程所用的接种工具是________，操作时采用灭菌的方法；还可用________方法操作。

（4）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，这样做的目的是________。

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【生物-选修1：生物技术实践】某些微生物能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究，人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等。研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐以及微量元素配置的培养基，成功地筛选到能产生纤维素酶的微生物。请分析并回答问题：

（1）培养基中加入的化合物A是　　　　　　 ，为微生物的生长提供碳源，这种培养基属于　　 培养基，配置培养基过程中常用的灭菌法为　　　　　　　　 。

（2）在筛选纤维素分解菌的过程中，通常用　　　　　　 　 染色法，如果培养基某部位出现　　　　 现象则说明存在纤维素分解菌。

（3）一同学在纯化该类生物时，发现涂布的培养基上菌落连成一片，最可能的原因是　　　　　 　　 ，应该采取　　　 措施避免出现此现象。

（4）实验结束后，使用过的培养基应该进行　　　　　　 　　 处理后才能倒掉，这样做的目的是保护环境（防止污染环境）。

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纤维素的微生物分解对减轻废弃物污染和作物秸秆再利用具有重要应用价值。某兴趣小组从富含纤维素的土壤中取样，加入选择培养基中进行振荡培养，待培养液混浊后接种于鉴别培养基上进行培养，筛选出能够分解纤维素的微生物。请回答：

（1）上述选择培养的目的是_________。培养过程中“振荡”作用是_________。

（2）鉴别培养时，为了得到单菌落，常采用平板划线法或_________进行接种，后一种方法测得的菌落数比活菌实际数目低的原因是_________。

（3）鉴别培养基中需加入_________才能对纤维素分解菌加以筛选。鉴别培养后，培养基中出现了几个以菌落为中心的透明圈，根据_________（ 填 “菌落直径”、“透明圈直径”或“透明圈直径/菌落直径”）的大小可初步筛选出高效纤维素分解菌。

（4）从纯化培养得到的纤维素分解菌中分离提取纤维素酶后怎样确定该酶酶活性的高低？_________。

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为了减轻废弃农作物秸秆对农村环境污染，某科研小组使用下图所示接种方法分离纯化分解纤维素的微生物用于生产。请据图回答下列问题：

（1）图中接种工具的名称是______，制备培养微生物的培养基时，灭菌与调pH的先后顺序是______。

（2）步骤②中，将接种工具冷却的原因是______。

（3）图示接种方法是______。

（4）为从富含纤维素的土壤中分离获得分解纤维素的微生物单个菌落，某同学配制了一个培养基（成分见下表）：

注：“+”表示有

据表分析，该培养基含有微生物所需的______、氮源、水、无机盐四大类营养物质。该培养基______（填“能”或“不能”）用于分离纤维素分解菌，原因是______。

（5）对该微生物的优良菌种进行长期保存，可以采用______的方法。

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