GDNF是一种神经营养因子,研究人员构建了含GDNF基因的表达载体(如图1所示),经筛选得到的载体主要有三种。为鉴定这3种连接方式,选择限制性核酸内切酶对筛选的载体进行酶切,并对酶切后的DNA片段进行电泳分析,结果如图2所示。若图2中第②泳道显示所鉴定的载体是正向连接的,则鉴定时所选的限制性核酸内切酶是( )
A.XhoI B.HpaI和BamHI C.HpaI和XhoI D.BamHI和XhoI
高三生物单选题简单题
GDNF是一种神经营养因子,研究人员构建了含GDNF基因的表达载体(如图1所示),经筛选得到的载体主要有三种。为鉴定这3种连接方式,选择限制性核酸内切酶对筛选的载体进行酶切,并对酶切后的DNA片段进行电泳分析,结果如图2所示。若图2中第②泳道显示所鉴定的载体是正向连接的,则鉴定时所选的限制性核酸内切酶是( )
A.XhoI B.HpaI和BamHI C.HpaI和XhoI D.BamHI和XhoI
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GDNF是一种神经营养因子,研究人员构建了含GDNF基因的表达载体(如图1所示),经筛选得到的载体主要有三种。为鉴定这3种连接方式,选择限制性核酸内切酶对筛选的载体进行酶切,并对酶切后的DNA片段进行电泳分析,结果如图2所示。若图2中第②泳道显示所鉴定的载体是正向连接的,则鉴定时所选的限制性核酸内切酶是( )
A.XhoI B.HpaI和BamHI C.HpaI和XhoI D.BamHI和XhoI
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【生物-现代生物科技专题】(10分)
GDNF是一种神经营养因子。对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了含GDNF基因的表达载体(如图1所示),并导入到大鼠神经干细胞中,用于干细胞基因治疗的研究。请回答:
(1)在分离和培养大鼠神经干细胞的过程中,使用胰蛋白酶的目的是 。
(2)构建含GDNF基因的表达载体时,需选择图1中的 限制酶进行酶切。
(3)经酶切后的载体和GDNF基因进行连接,连接产物经筛选得到的载体主要有三种:单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接(如图1所示)。为鉴定这3种连接方式,选择HpaI酶和BamHI酶对筛选的载体进行双酶切,并对酶切后的DNA片段进行电泳分析,结果如图2所示。图中第
泳道显示所鉴定的载体是正向连接的。
(4)将正向连接的表达载体导入神经干细胞后,为了检测GDNF基因是否成功表达,可用相应的
与提取的蛋白质杂交。当培养的神经干细胞达到一定的密度时,需进行 培养以得到更多数量的细胞,用于神经干细胞移植治疗实验。
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GDNF是一种神经营养因子。对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了含GDNF基因的表达载体(如图所示),并导入到大鼠神经干细胞中,用于干细胞基因治疗的研究。请回答:
(1)完成图中A过程必需的工具是 ;该基因治疗的受体细胞为 。
(2)基因工程最核心的步骤是 。
(3)若要构建含GDNF基因的表达载体,则需选择图中的 限制酶进行酶切。
(4)限制酶XhoI和限制酶HpaI的识别序列及切割位点分别是—C↓AATTG—和—G↓AATTC—。如下图表示四种质粒,其中,箭头所指部位为酶的识别位点,质粒的阴影部分表示标记基因。适于作为图示GDNF基因运载体的是 。
(5)下列有关限制性核酸内切酶和质粒运载体的描述,正确的是_______。
A.限制性核酸内切酶能识别DNA、切割DNA任一序列
B.限制性核酸内切酶的作用部位与RNA聚合酶的相同
C.使用质粒运载体是为了避免目的基因被分解
D.质粒运载体可能是从细菌或者病毒的DNA改造的
(6)经酶切后的载体和GDNF基因进行连接,连接产物经筛选得到的载体主要有三种:单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接(如图所示)。为鉴定这3种连接方式,选择HpaI酶和BamHI酶对筛选的载体进行双酶切,若是正向连接的重组载体,其产生的酶切片段数为 个,反向连接的重组载体产生片段有 (多选)。
①100bp ②200bp ③600bp ④700bp ⑤6000bp ⑥6500bp
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GDNF是一种神经营养因子。对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了含GDNF基因的表达载体(如图所示),并导入到大鼠神经干细胞中,用于干细胞基因治疗的研究。请回答:
(1)完成图中A过程必需的工具是 ;该基因治疗的受体细胞为 。
(2)若要构建含GDNF基因的表达载体,则需选择图中的 限制酶进行酶切。
(3)限制酶XhoI和限制酶HpaI的识别序列及切割位点分别是—C↓AATTG—和—G↓AATTC—。如下图表示四种质粒,其中,箭头所指部位为酶的识别位点,质粒的阴影部分表示标记基因。适于作为图示GDNF基因运载体的是 。
(4)下列有关限制性核酸内切酶和质粒运载体的描述,错误的是_______(多选)。
A.限制性核酸内切酶能识别DNA、切割DNA任一序列
B.限制性核酸内切酶的作用部位与RNA聚合酶的相同
C.使用质粒运载体是为了避免目的基因被分解
D.质粒运载体可能是从细菌或者病毒的DNA改造的
(5)经酶切后的载体和GDNF基因进行连接,连接产物经筛选得到的载体主要有三种:单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接(如图所示)。为鉴定这3种连接方式,选择HpaI酶和BamHI酶对筛选的载体进行双酶切,若是正向连接的重组载体,其产生的酶切片段数为 个,反向连接的重组载体产生片段有 (多选)。
①100bp ②200bp ③600bp ④700bp ⑤6000bp ⑥6500bp
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GDNF是一种神经营养因子.对损伤的神经细胞具有营养和保护作用.研究人员构建了含GDNF基因的表达载体(如图1所示),并导入到大鼠神经干细胞中,用于干细胞基因治疗的研究.请回答:
(1)在分离和培养大鼠神经干细胞的过程中,使用胰蛋白酶的目的是 .
(2)构建含GDNF基因的表达载体时,需选择图1中的 限制酶进行酶切.
(3)经酶切后的载体和GDNF基因进行连接,连接产物经筛选得到的载体主要有三种:单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接(如图1所示).为鉴定这3种连接方式,选择HpaI酶和BamHI酶对筛选的载体进行双酶切,并对酶切后的DNA片段进行电泳分析,结果如图2所示.图中第 泳道显示所鉴定的载体是正向连接的.
(4)将正向连接的表达载体导入神经干细胞后,为了检测GDNF基因是否成功表达,可用相应的 与提取的蛋白质杂交.当培养的神经干细胞达到一定的密度时,需进行 培养以得到更多数量的细胞,用于神经干细胞移植治疗实验.
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胶质细胞分泌的神经营养因子(GDNF)对神经元有保护和修复作用。为研究高尔基体膜分选受体S对GDNF分泌的影响,研究者进行了实验。
(1)分泌蛋白一般通过两种途径被分泌到胞外:一种是不受外界影响持续的组成型分泌,另一种是受到生理刺激后产生的调节型分泌,如下图。
分泌蛋白的分泌过程与膜的________有关。M作为信号分子的________,其加工过程发生在________。
(2)研究者将受体S基因与GDNF基因均转入PC12细胞,构建了S基因过量表达的细胞系甲,并和仅转入GDNF基因的PC12细胞系乙进行比较,检测结果如下图。
据图可知,受体S对GDNF分泌的影响是________________。
(3)为验证上述结论,研究者将与S基因序列互补的小RNA(抑制S基因表达)导入到上述细胞系________中作为实验组,对照组导入________的RNA。与对照组相比,若实验组细胞的GDNF的调节型分泌量________,组成型分泌量________,则证明上述结论正确。
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科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊,以便通过乳腺生物反应器生产人 凝血因子IX医用蛋白,其技术路线如图。
(1)要想目的基因只在乳腺组织中表达,在构建基因表达载体A 时,需要将_________基因和__________等调控组件重组在一起。
(2)将A导入绵羊胎儿成纤维细胞中常用的方法是__________。将 A 导入受精卵能否获得转基因绵羊? ______ ,判断依据是________________.
(3)核移植的受体应选用__________期卵母细胞?。
(4)移植应选择胚胎发育到________阶段时进行;转基因绵羊的性状基本上与代孕母羊无关的原因是__________.
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转基因克隆猪已经在我国培育成功。研究组首先从猪胎儿皮肤中分离出纤维细胞,进行体外培育。通过电穿孔的方法将构建好的基因表达载体转入纤维细胞,经筛选后将基因纤维细胞进行体细胞克隆。接着,将重组胚胎移入代孕母猪体内,最终获得转基因克隆猪。请回答:
(1)在对纤维细胞进行培养时,需要在细胞培养液中添加一定量的 ,以防止培养过程的污染,此外,应定期更换 ,防止 对细胞自身造成危害。
(2)筛选转基因细胞时,需要利用基因表达载体中 的作用。
(3)在进行体细胞克隆前,先要从屠宰场收集猪卵巢,采集 ,并在体外培养成熟。然后将转基因纤维细胞注入到 中 ,再经过一系列过程获得含有目的基因重组胚胎。
(4)为了 ,可以对处于 阶段的胚胎进行均等分割。将重组胚胎移入到受体子宫中,由于受体子宫不会对外来胚胎发生 ,并能与之建立正常的生理和组织上的联系,因次,重组胚胎能在受体子宫中继续发育成转基因克隆猪。
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[生物—选修3;现代生物科技专题]
转基因克隆猪已经在我国培育成功.研究组首先从猪胎儿皮肤细胞中分离出纤维细胞,进行体外培养.通过电穿孔的方法将构建好的基因表达载体转入纤维细胞,经筛选后将转基因纤维细胞进行体细胞克隆.接着,将重组胚胎移入代孕母猪体内,最终获得转基因克隆猪.请回答:
(1)在对纤维细胞进行培养时,需要在细胞培养液中添加一定量的 ,以防止培养过程的污染.此外,应定期更换 ,防止 对细胞自身造成危害。
(2)基因工程中常用的运载体有 ,在基因工程中需要用到的工具酶是 ,筛选转基因细胞时,需要用到基因表达载体中的标记基因,标记基因的作用是 。
(3)在进行体细胞克隆前,先要从屠宰场收集猪卵巢,采集 ,并在体外培养成熟.然后将转基因纤维细胞注入到 中,再经过一系列过程获得含有目的基因重组胚胎。检测目的基因是否整合到纤维细胞DNA分子上可采用 。
(4)为了提高 ,可以对处于 阶段的胚胎进行均等分割.将重组胚胎移入到受体子宫后,由于受体子宫不会对外来胚胎发生免疫排斥反应,并能与之建立正常的 上的联系,因此,重组胚胎能在受体子宫中继续发育成转基因克隆猪。
(5)生态系统内即使某个物种由于某种原因而死亡,也会很快有其他物种占据它原来的生态位置,从而避免系统结构或功能失衡.这最主要体现了生态工程的 原理(只填一项)。
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