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[生物——选修1：生物技术实践]（15分）
某同学家的门前有一条小溪，近几年由于上游几家造纸厂不断向其中排放废水，小溪变得不再清澈。某同学想测定该溪水中的细菌含量情况。回答下列问题：
（1）先根据所学知识制备牛肉膏蛋白胨固体培养基。制备该培养基的步骤是：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板，其中灭菌常用的方法是_______________；为了防止培养皿盖上的水珠落入培养基，造成污染，所倒平板应如何处理？____________________________。
（2）该同学利用上述制备的培养基来检测水样中的细菌含量，他所选择的方法应是___________（填“平板划线法”或“稀释涂布平板法”）；该同学在接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是______________________________________________________。值得注意的是，他所选择的这种方法统计的结果往往比实际细菌的数目要低，这是因为①___________________________________，②____________________________________________。除了上述的计数法外，______________也是测定微生物数量的常用方法。
（3）该同学欲将所分离出的某种细菌临时保藏，应选择的保藏方法是___________________________（填“接种到试管的斜面培养基上，等到菌落长成后，放入冰箱低温保藏”或“甘油管藏”）。
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（一）某村庄有一条小溪，近几年由于上游几家乳胶厂不断向其中排放废水，小溪变得不再清澈。某同学想测定该溪水中的细菌含量情况。回答下列问题：
（1）先根据所学知识制备LB培养基。制备该培养基的步骤是：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板，下列关于制备LB培养基的叙述，错误的是____
A.培养基应先调pH再进行灭菌
B.培养基应先灭菌再分装到培养皿
C.溶化琼脂时不能使培养基溢出或烧焦
D.灭菌时一般用高压蒸汽灭菌锅在121℃，500g/cm2压力下灭菌15分钟
（2）该同学利用上述制备的培养基来检测水样中的细菌数量，他所选择的分离方法应是_____；该同学在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是____。接种在超净工作台上进行，工作台上实验前一段时间需打开，实验中需关闭的是______（A.酒精灯 B.照明灯 C.紫外线 D.过滤风）
（3）值得注意的是，他所选择的这种方法统计的结果往往比实际细菌的数目要低，这是因为①______②_______（不考虑实验操作原因引起的细菌数目的变化）
（4）该同学欲将所分离出的某种细菌临时保藏，应接种到试管的______培养基上，等菌落长成后，放入冰箱低温保藏。
（二）回答有关胚胎工程的问题。
（1）“二娃”政策实施后，一些高龄夫妇选择“试管婴儿”技术孕育二胎：要使精子和卵细胞在体外成功融合，首先须采集到成熟的卵细胞，最常用的方法是卵巢经过_______处理后，使用超声监视器确定卵泡的位置，插入穿刺针吸取卵泡液，取出_______，在体外进行人工培养，促进其成熟。同时对于男方提供的精子，须经系列处理与培养，以达到_______状态。受精卵形成后，经人工培养至_______阶段，借助胚胎移植技术回输至女方体内，经过自然孕育，即得试管婴儿。
（2）胚胎干细胞研究发展前景诱人，它具有发育全能性和二倍体核型。培养胚胎干细胞的培养基中，必须加入胰岛素、葡萄糖、_______等成分。并且要将干细胞接种在饲养层上，用于饲养层的细胞一般是_______。
（3）下列有关胚胎移植的说法错误的是_______
A．供体与受体是同一物种的雌性
B．受体与供体保持相同的的生理状态
C．供体胚胎与受体子宫建立正常的生理和组织联系
D.多胚胎移植在提高妊娠率的同时，常可获得性状完全相同的孩子
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【生物——选修1:生物技术实践】（15分）由于石油价格的不断上涨，替代化石燃料的产品如燃料酒精、生物柴油、沼气等的开发备受世界关注，有人想利用玉米秸秆生产燃料酒精，其大致流程为：
（1）玉米秸秆预处理后，应该选用 进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖。
（2）分离这种水解酶的野生菌株一般从土壤中筛选，所需要的培养基为 培养基，但现有的野生菌株对玉米秸秆的转化效率低，某同学尝试对其进行改造，以获得高效菌株。
实验步骤：
①配制 (固体、半固体、液体)培养基，该培养基的碳源应为 。
②将野生菌株接入已经用 法灭菌的培养基平板上。
③立即用适当剂量的紫外线照射，其目的是对野生菌株进行 。
④菌落形成后，加入 染液，观察菌落周围培养基的颜色变化和变化范围的大小，周围出现 (现象)的菌落即为初选菌落。
⑤分离、纯化菌种时为得到单菌落，常用 法和 法接种。
（3）发酵阶段需要的菌种是 ，生产酒精必须要控制的条件是 。
（4）生产的酒精易挥发但可溶于水，宜选用水蒸气蒸馏的方法从酵母菌代谢产物中提取。
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[生物：选修1—生物技术实践]亚硝胺广泛存在于化工类废水中，对环境有严重危害。某研究小组欲从处理废水的活性污泥中分离纯化亚硝胺降解高效菌株。请回答下列问题：
(1)泡菜腌制过程中产生的____________在特定的条件下也会转变成亚硝胺，对人体健康产生危害，所以在泡菜腌制过程中，要注意控制腌制的时间、温度和_____________。
(2)选择培养时的培养基只能以____________作为唯一氮源，经____________灭菌后，用于富集亚硝胺降解菌。
(3)分离纯化出3种亚硝胺降解高效菌株，为了比较3种菌株的降解效率，将等量的3种菌株分别接种于富含亚硝胺的培养基，一组不接种作为空白对照，一段时间后测定4组培养基中亚硝胺的_____。设置空白对照的目的是____________________。
(4)在上述实验的基础上研究亚硝胺降解高效菌株混合使用的降解效率，理论上还需要设计________组实验。
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【生物——选修1：生物技术实践】
雅安市城区居民用水取自于青衣江上游，为保障居民用水安全，相关单位需要定期检测水源中细菌种类及数量，以确定水质是否达标。请回答下列问题：
（1）制备牛肉膏蛋白胨培养基的步骤是计算→称量→熔化→灭菌→________。其中对培养基灭菌的方法是_________。为避免杂菌污染，倒平板时应当在__________进行。
（2）培养基中的牛肉膏主要为细菌提供__________营养成分。培养细菌的pH应调节至_________。
（3）要统计水源中的活菌总数，应该采用的方法是__________。工作者将三个接种了等量水源水的培养基置于37℃的恒温箱中培养。24小时后观察到三个平板上的菌落数目为21、256、215，请分析结果出现的可能原因并提供解决方案：___________________。
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【生物一选修1:生物技术实践】
农作物秸秆可用于还田、种蘑菇、生产燃料、造纸等，秸秆中的纤维素可被某些微生物分解，为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表）：
水
无机盐
淀粉
纤维素粉
酵母膏
CR溶液
琼脂
培养基甲
+
+
+
+
+
+
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培养基乙
+
+
+
-
+
+
+
注：“+“表示有，“-”表示无。
（1）人们常常将滤纸等埋在土壤中以获得纤维素分解菌，原因是_______________________________。
（2）据表判断，上述两种培养基能否____用于分离和鉴别纤维素分解菌，为什么？___________。
（3）分离出的纤维素分解菌能利用___________酶将纤维素分解成纤维二糖。
（4）将筛选培养的纤维素分解菌破碎后，用_______的方法可将纤维素酶溶液与其他细胞成分分离开。纤维素酶能催化纤维素分解为还原性的葡萄糖，根据这一特性，可用___________试剂判断提取物是否起到了降解纤维素的作用。
（5）微生物培养过程中，防止杂菌污染的关键技术是______________，为了排除杂菌污染如何设计对照实验？_____________________________________________________________________________。
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蓝球藻是所有藻类生物中最简单、最原始的一种。近年来太湖等地由于城市生活污水、工业废水等的排放造成水体N、P超标而导致蓝球藻爆发。科技人员创造了浮床生态工艺(即在浮床上种植特殊的水生、半水生植物)的生物性防治措施进行防治，取得了净化污水，抑制蓝球藻的良好效果。浮床生态工艺净化污水的原理是
A．物质循环再生和协调与平衡的原理
B.水生植物直接吸收N、P以及浮床遮光，抑制蓝球藻的生长繁殖
C.整体性原理和系统学原理
D.物种多样性原理和协调和平衡原理
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（2013•黄州区一模）【生物一选修模块1：生物技术实践】
请回答下列与生物技术实践相关的问题：
（1）利用纤维素解决能源问题的关键是高性能纤维素酶的获取．科学家利用培养基从土壤中筛选出能分解纤维素的细菌，这类细菌经过大量培养后可以从中提取纤维素酶．
①土壤中富含各种微生物，将土壤浸出液接种到特定培养基上，可得到能分解纤维素的细菌，实验室中获取纯净菌种常用的接种方法有 平板划线法 和 稀释涂布平板法 ．
②虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、 无机盐、碳源、氮源
（2）酵母菌是一种真菌，可用于制作果酒．
①果汁发酵后是否产生酒精，可以用 重铬酸钾 来检验，在酸性条件下，该物质与酒精反应呈现特定的颜色．
②酵母菌细胞固定化可大大提高生产效率．固定酵母菌细胞时首先需要将干酵母放入 蒸馏水 中活化；若制得的凝胶珠着色过浅，可能是 海藻酸钠浓度过低 ．
（3）突变菌往往带有一些特殊的基因，在获得这些基因的过程中，PCR技术相当重要．PCR扩增反应中加入引物的作用是 使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸 ．
（4）加酶洗衣粉中有的加香精，高档洗衣粉中的香精是由植物芳香油制成的，目前从植物中提取芳香油的方法有 萃取法、蒸馏法、压榨法 等．
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［生物——选修1生物技术实践］（15分）
请回答下列有关生物技术实践的问题：
（1）利用纤维素解决能源问题的关键是高性能纤维素酶的获取。科学家利用培养基能从地壤中选择出能分解纤维素的细菌。这类细菌经过大量培养后可以从中提取纤维素酶。
①土壤中富含各种微生物，将土壤浸出液接种到特定培养基上，可得到能分解纤维素的细菌，实验室中获取纯净菌的常用方法有________和________。
②使用纤维素酶和化学方法均能分解纤维素，说出使用酶解法处理的优点：________。
（2）酵母菌是一种真菌，可用于制作果酒。
①果汁发酵后是否产生酒精，可以用________来检验，在酸性条件下，该物质与酒精反应呈________色。
②酵母菌细胞固定化可大大提高生产效率。固定酵母菌细胞时首先需要将干酵母放入________中活化；若制得的凝胶珠着色过浅，可能是________。
（3）突变菌往往带有一些特殊的基因，在获得这些基因的过程中，PCR技术相当重要。PCR扩增反应中加入引物作用是________，加入DNA聚合酶的作用是________。
（4）加酶洗衣粉中有的加有香精，高档洗衣粉中的香精是由植物芳香油制成的，目前从植物中提取芳香油的方法有________等。
（5）虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、________。
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【生物——选修1：生物技术实践】（15分）“中国柑橘之乡”常德石门县由于独特的土壤气候环境，具有得天独厚的优质果品生产先天的资源优势，被国际果业界认定为“蜜橘绝佳产地”。但由于缺乏农产品的深加工企业，近几年柑橘滞销现象严重。
（1）当地政府想引入一个大型的果酒加工厂，需要的发酵菌种是 。分离纯化上述菌种所用的培养基属于 （填“液体”或“固体”）培养基。对于频繁使用的菌种，可以将菌种接种到试管的 培养基上临时保藏。
（2）橘皮可用作提取胡萝卜素和橘皮精油的原料。提取胡萝卜素常采用 法，需安装冷凝回流装置，其目的是 ；提取橘皮精油时，为避免 时有效成分水解，应使用 （填“水中蒸馏”或“水上蒸馏”或“水气蒸馏”）法，为防止产生原料焦糊的问题，常采用 法。
（3）为了保持某橘子品种的品质，可用组织培养技术繁殖试管苗。培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值 （填“高”或“低”）时，有利于芽的分化。
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