科研人员分别将蛋白C基因和蛋白G（葡萄糖转运蛋白）基因与空质粒连接，构建表达载体。将空质粒...

科研人员分别将蛋白C基因和蛋白G（葡萄糖转运蛋白）基因与空质粒连接，构建表达载体。将空质粒和上述两种表达载体分别转入三组蛋白G缺陷细胞，在三种不同浓度的葡萄糖间隔刺激下，测定三组细胞的葡萄糖转运速率，结果如下图。下列叙述错误的是　

A. I组实验的目的是排除空质粒对实验结果的影响

B. II、III组葡萄糖转运速率随葡萄糖浓度增加而减小

C. 由实验结果推测蛋白C是一种葡萄糖转运蛋白

D. 实验结果表明蛋白C的转运功能强于蛋白G

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科研人员分别将蛋白C基因和蛋白G（葡萄糖转运蛋白）基因与空质粒连接，构建表达载体。将空质粒和上述两种表达载体分别转入三组蛋白G缺陷细胞，在三种不同浓度的葡萄糖间隔刺激下，测定三组细胞的葡萄糖转运速率，结果如下图。下列分析不正确的是

A. Ⅰ组实验的目的是排除空质粒对实验结果的影响

B. Ⅱ、Ⅲ组葡萄糖转运速率随葡萄糖浓度增加而减小

C. 由实验结果推测蛋白C是一种葡萄糖转运蛋白

D. 实验结果表明蛋白C的转运功能强于蛋白G

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科研人员分别将蛋白C基因和蛋白G（葡萄糖转运蛋白）基因与空质粒连接，构建表达载体。将空质粒和上述两种表达载体分别转入三组蛋白G缺陷细胞，在三种不同浓度的葡萄糖间隔刺激下，测定三组细胞的葡萄糖转运速率，结果如下图。下列叙述错误的是　

A. I组实验的目的是排除空质粒对实验结果的影响

B. II、III组葡萄糖转运速率随葡萄糖浓度增加而减小

C. 由实验结果推测蛋白C是一种葡萄糖转运蛋白

D. 实验结果表明蛋白C的转运功能强于蛋白G

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科研人员分别将蛋白C基因和蛋白G（葡萄糖转运蛋白）基因与空质粒连接，构建表达载体。将空质粒和上述两种表达载体分别转入三组蛋白G缺陷细胞，在三种不同浓度的葡萄糖间隔刺激下，测定三组细胞的葡萄糖转运速率，结果如下图。下列分析不正确的是

A. Ⅰ组实验的目的是排除空质粒对实验结果的影响

B. Ⅱ、Ⅲ组葡萄糖转运速率随葡萄糖浓度增加而减小

C. 由实验结果推测蛋白C是一种葡萄糖转运蛋白

D. 实验结果表明蛋白C的转运功能强于蛋白G

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为使水稻获得抗除草剂性状，科研人员将除草剂草甘膦抗性基因转入水稻植株，获得抗草甘膦转基因水稻。

（1）将草甘膦抗性基因作为_____，与Ti质粒用相同的_____和DNA连接酶处理构建基因表达载体。

（2）用_____处理农杆菌后获得感受态细胞，将其与基因表达载体混合完成转化后，在添加_____的培养基中，经筛选1得到含基因表达载体的农杆菌。

（3）利用PCR技术，可以鉴定被侵染的愈伤组织中是否含有草甘膦抗性基因。草甘膦抗性基因的部分序列如下：

5'﹣﹣﹣ATGGCT………AGGAAC﹣﹣﹣3'

3'﹣﹣﹣TACCGA………TCCTTG﹣﹣﹣5'

根据上述序列应选择引物_____（填字母）进行PCR。

A．引物：5'﹣TACCGA﹣3'

B．引物：5'﹣GTTCCT﹣3'

C．引物：5'﹣AUGGCU﹣3'

D．引物：5'﹣ATGGCT﹣3'

（4）PCR扩增时需要根据草甘膦抗性基因序列设计_____种引物，其原因是_____。

（5）除了鉴定愈伤组织中是否含有目的基因以外，还可以利用GUS基因表达产物的鉴定进行图中的筛选2，以确定目的基因是否_____。两次筛选后得到的转基因愈伤组织经过细胞的_____过程，获得转基因水稻。

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啤酒酵母是啤酒工业发酵菌种，对啤酒的品质、风味有很大影响。请回答：

（1）科研人员将表达乙肝病毒表面抗原的基因构建在重组质粒中，进而转入___，发酵生产 转基因酵母乙肝疫苗。在构建重组质粒过程中，通过同种限制性核酸内切酶（-G↓AATTC-）切割得到的一个目的基因和一个开环质粒，共有 __（A．1 个　　 B．2 个　　 C．3个D．4 个）粘性末端。将重组质粒导入受体细胞的操作步骤完成以后，需要对所有受体细胞进行筛选，这是因为___。该转基因技术实践应用的成功标志是 __。

（2）转基因技术结合胚胎工程在高等动物育种中也有成熟应用。人们将经过基因改造的胚胎干细胞核与 __融合，得到___，并促使其在体外分裂发育成 __，再通过胚胎移植获得后代。目前胚胎移植是胚胎工程中获得后代的唯一方法，其原因是 __。

（3）胚胎干细胞具有重要的生产和临床医学价值。在培养胚胎干细胞时，首先要在培养皿底部制备一层细胞，称为 __，其作用是 __。

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甲醇酵母菌是基因工程中常用的受体菌，研究人员将人的胶原蛋白基因导入甲醇酵母菌中并成功表达。请回答下列问题

（1）在构建基因表达载体时，用两种不同的限制分别切割目的基因的两端和质粒，使目的基因和质粒获得不同的黏性末端，其目的是___________________。目的基因与质粒连接时，需用________酶。

（2）甲醇酵母菌可高效表达外源蛋白质，但自身蛋白质分泌到培养基中的很少，这一特点的优点在于______________________，甲醇酵母菌分泌的胶原蛋白的结构与人的几乎完全相同，从细胞结构的角度分析，其原因可能是________________________。

（3）要使胶原蛋白基因在甲醇酵母菌中表达，需要先构建基因表达载体而不是直接将基因导人受体细胞，原因是_______________、___________________。

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科研人员从耐盐植物中获得了耐盐基因，利用转基因技术将耐盐基因转入水稻细胞中，进而培育出了耐盐水稻新品系。下图表示构建耐盐基因表达载体的过程。请回答下列问题：

(1)据图分析可知，在构建的耐盐基因表达载体中，图中未标注出的必需元件有耐盐基因启动子，其功能是_________________________________。

(2)据图分析可知，在构建耐盐基因表达载体时，需要用______________对质粒进行切割，从而保证______________________________。

(3)常用农杆菌转化法将耐盐基因导入水稻受体细胞，根据农杆菌的感染特点，将耐盐基因插入Ti质粒的T-DNA上，经过转化作用进入水稻细胞，并将其插入水稻细胞______________上，从而使其遗传特性得以稳定维持和表达。

(4)受体细胞经诱导后形成愈伤组织的过程称为______________，进一步培育成幼苗，这体现了___________________________。检测转基因水稻是否培育成功可使用的最简便的方法是________________________________。

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我国一科研团队将小麦液泡膜Na+/K+逆向转运蛋白基因（TaNHX2基因）转移到水稻细胞内，获得了转基因耐盐水稻新品种。回答下列有关问题：

（1）若目的基因在水稻细胞中能够表达，理论上构建的基因表达载体应包含下列_____________等结构（多选）。

A. 启动子　　　　　 B. 终止密码子　　　　　 C. 标记基因　　　　　 D. 目的基因

（2）水稻的转化过程为：将水稻幼胚接种到诱导培养基上，经过_____________过程，培养出愈伤组织，然后用_____________法，将目的基因和相关功能片段整合到愈伤组织细胞的染色体DNA上，最后诱导愈伤组织形成水稻植株。

（3）为验证外源基因整合到水稻基因组后是否转录，可从转基因植株的细胞中提取_____________并反转录成cDNA，再以反转录产物为模板，利用TaNHX2基因特异引物，通过PCR方法进行基因扩增。

①若小麦液泡膜Na+/K+逆向转运蛋白基因含m个碱基对，则其表达产物的氨基酸数目至多为________个。

②利用PCR技术每循环一次，目的基因的量可以增加________倍。

（4）将生长至4叶期的转基因幼苗转入高浓度的NaCl溶液中培养，进行耐盐试验，用非转基因幼苗作为对照。培养30天后观察现象，若_________________________则说明转基因植株获得了耐盐特性。

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马铃薯是表达外源蛋白的理想受体材料。某科研小组通过农杆菌转化法获得高产重组人血清白蛋白（rHSA)的转基因马铃薯，下图是该小组构建的基因表达载体中T-DNA示意图。请回答：

（1）天然农杆菌Ti质粒的T-DNA上具有tms和tmr基因（分别控制合成植物生长素和细胞分裂素），在人工改造质粒时应使用________切除这两个基因，以防止____________________。

（2）构建基因表达载体时，在rHSA基因两端分别加上限制酶KpnⅠ和SalⅠ的识别序列（两种酶切割产生不同的黏性末端)，从基因表达角度分析其目的是____________。科研小组PCR扩增rHSA基因时，其中一种引物碱基序列为：5＇-CGGGGTACCGCCACCATGGATGCACACAAG-3＇，该序列含有KpnⅠ识别序列和增强表达的序列5＇-GCCACC-3＇，则限制酶KpnⅠ的识别序列是_______________。

（3）将基因表达载体转入处于___________的农杆菌细胞中。用农杆菌转化液与马铃薯愈伤组织共培养一段时间后，为了得到已转化且不含农杆菌的愈伤组织，将感染后的愈伤组织转移至含有潮霉素和羧苄青霉素的培养基中培养，加潮霉素的目的是_______________，加羧苄青霉素的目的是____________。

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