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请回答下列有关生物技术实践方面的问题：
（1）培养基配制的步骤为：计算-称量-_______-_______-倒平板；为统计样品中活菌的数目，在37℃培养箱中培养适当时间后形成菌落，一般选择菌落数在_________个的平板进行计数。
（2）泡菜虽然好吃，但其中的亚硝酸盐会危害人体健康。亚硝酸盐在特定条件下会转变成________，这是一种致癌物，测定亚硝酸盐含量的原理是在__________条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色物质。
（3）腐乳制作的流程是：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制。配制卤汤时，要使卤汤中酒的含量控制在___________左右。
（4）某同学釆用血细胞计数板计数(规格为16×25，O.lmm3)，统计4个中格中的细菌数，计算出每个小格所含细菌的平均数为2个，则每毫升样品中的细菌数是(稀释倍数为103) _________个。
（5）对于频繁使用的菌种可将试管放入_____________保藏。
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请回答下列有关生物技术实践方面的问题：
(1)培养基配制的步骤为：计算→称量→___________→___________→倒平板。
(2)在微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是___________；对接种针进行灭菌的常用方法是______________________。
(3)橘皮精油的主要成分是___________，常用的提取方法为___________，为了提高出油率，该方法操作时需对橘皮进行______________________的预处理。
(4)β-胡萝卜素能用于治疗人类因缺乏维生素A而引起的各种疾病，由此推测β-胡萝卜素发挥作用的机理很可能是______________________。
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急性肠胃炎是由细菌通过消化道进入人体导致的。因此检验饮用水的细菌含量是有效监控疾病发生的必要措施，请回答下列与检验饮用水有关的问题：
（1）配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的基本步骤：计算→称量→溶化→灭菌→__________。
（2）检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种接种方法称为____________。
（3）用该方法统计样本菌落数时是否需要设置对照组__________，为什么?__________。
（4）如分别取 0．1 mL 已稀释 102 倍的水样分别涂布到三个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为 52、 55 、 58 ，则每升原水样中大肠杆菌数为__________。 与用显微镜直接计数法相比，此计数方法测得的细菌数目较__________（填“多”或“少”）。
（5）已知大肠杆菌能发酵乳糖并产酸产气，现提供足量的已灭菌的乳糖蛋白胨培养液和具塞试管，应如何判断待检水样中是否含有大肠杆菌？请写出大致的实验思路。
_____________________________。
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[生物——生物技术实践]（15分）
微生物培养与分离技术是生物学中重要的实验技术。根据有关微生物的知识，分析回答问题：
(1)培养基的制备需经过计算、称量、溶化和A：____、B:_____等过程，上述过程中需要在超净工作台上操作的是_______。
(2)纯化菌种时为得到单菌落，常采用的接种方法是平板划线法和D:_____法，其中需用接种环进行操作的是__________。
(3)为达到筛选土壤中分解尿素细菌目的，平板内固体培养基应以尿素作为唯一的_ __，培养基中加入________指示剂培养后，若变红以鉴定其中含有所需细菌。若筛选纤维素分解菌，在选择培养后须进行E:____和F:______过程，一般通过观察_______的有无挑选出所需菌种。
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【选修1：生物技术实践】
下图为苹果醋的工业生产流程，以及实验室分离、纯化发酵菌的方法步骤。请回答以下问题：
纯化发酵菌的方法步骤：配制培养基→培养基灭菌→接种→培养→挑选符合要求的菌落。
（1）上图中①过程与②过程需要接种的发酵菌分别是________________________________。
（2）微生物培养基的营养成分包括____________、水、无机盐和生长因子。
（3）某同学用新鲜苹果醋为实验材料分离纯化其中的发酵菌，为了保证能获得单菌落，要先对苹果醋____________________________________。
（4）某同学计划统计食醋中该发酵菌的总数，他选用10-4、10－5、10－6稀释液进行涂布，每种稀释液都设置了3个培养皿。从对照实验的角度看，还应设置的一组对照组是_____________，设置对照组的目的是_________________。
（5）上图所示曲线中，能正确表示上述发酵过程中培养液pH变化曲线是_________（选填“①”、
“②”、“③”、“④”）。
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自然界中有很多种微生物，尚未能分离纯化培养，科研人员开发了新的微生物分离技术以筛选微生物。
（1）配制培养基并分离微生物的步骤是：计算→称量→溶化→调pH→灭菌→倒平板→_______→培养。筛选微生物的一般思路是，根据表型特征利用_______培养基进行筛选。
（2）若某种微生物没有明显表型特征时，就无法通过上述方法筛选，科研人员通过图1所示的流程进行筛选。
①据图分析，科研人员利用目标微生物的基因获取大量膜蛋白，需要构建_______，并导入用________处理的大肠杆菌细胞中。
②利用兔子制备单克隆抗体时，第一次筛选获得多种_______，第二次筛选利用_______原理筛选得到分泌抗膜蛋白抗体的杂交瘤细胞，进行克隆培养。 用目的微生物的膜蛋白而不是胞内蛋白作为抗原的原因_______。
（3）将上述带有荧光的单克隆抗体与待分离微生物群体混合，用流式细胞仪分离不同荧光强度的细胞，结果如图2所示。对结果进行比较，应从区域_______（选填图中数字）的细胞中筛选目标微生物。
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【生物——生物技术实践】
从自然界获得纯种的酿酒酵母，基本程序是：配制培养基—接种—培养—观察记录—纯化培养。请回答下列有关的问题：
（1）酵母菌的培养最好使用下列哪种培养基？（ ）
A．牛肉膏蛋白胨培养基 B．麦芽汁琼脂培养基
C．伊红-美蓝培养基 D．MS培养基
（2）采用平板划线法接种时，开始接种时要灼烧接种环，目的是________。要把接种后的培养基和一个未接种的培养基同时放入恒温箱培养，设置“未接种的培养基”做对照的目的是 ________。
（3）将得到的纯种酿酒酵母接种到葡萄汁中，经过发酵可以得到________。
（4）将酵母菌破碎并提取得到酵母菌的蛋白质，利用聚丙烯胺凝胶电泳技术将得到的蛋白质进行分离，在电泳过程中，影响蛋白质迁移速度的因素包括蛋白质分子的________、________以及分子的形状等。
（5）把从酵母细胞中提取的淀粉酶固定在尼龙布上制成固定化酶，采用的方法是________，与传统酶应用技术相比，此技术最显著的优点是________。
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自然界中有很多种微生物，尚未能分离纯化培养，科研人员开发了新的微生物分离 技术以筛选微生物。
（1）配制培养基并分离微生物的步骤是：计算→称量→溶化→调pH→______________→倒平板→______________→培养。筛选微生物的一般思路是，根据表型特征利用____培养基进行筛选。
（2）若某种微生物没有明显表型特征时，就无法通过上述方法筛选，科研人员通过图所示的流程进行筛选。
①据图分析，科研人员利用目标微生物编码膜蛋白的____________________，构建表达载体，并导入用________________处理的大肠杆菌细胞中，获取大量膜蛋白。
②用获取的膜蛋白作为抗原，利用兔子制备单克隆抗体的具体流程是：_____。
（3）将上述带有荧光的单克隆抗体与待分离微生物群体混合，目的是_____目标微生物。 用流式细胞仪分离不同荧光强度的细胞，结果如图2所示。对结果进行比较，应从区域_____（选填图中数字）的细胞中筛选目标微生物。
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（8分）[生物一生物技术实践]
从自然界获得纯种酿酒酵母菌的基本程序是：配制培养基—接种—培养—观察记录—纯化培养。请回答下列有关问题：
（1）酵母菌的培养最好使用下列哪种培养基？________。
A．牛肉膏蛋白胨培养基 B．麦芽汁琼脂培养基
C．蛋白胨酵母膏培养基 D．MS培养基
（2）采用平板划线法接种时，开始接种时要灼烧接种环，目的是________
________。要把接种后的培养基和一个未接种的培养基同时放入恒温箱培养，设置：“未接种的培养基”做对照的目的是________
________。
（3）将得到的纯种酿酒酵母接种到葡萄汁中，经过发酵可以得到________。
（4）将酵母菌破碎并提取得到酵母菌的蛋白质，利用聚丙烯胺凝胶电泳技术将得到的蛋白质进行分离，在电泳过程中，影响蛋白质迁移速度的因素包括蛋白质分子的________、________。
（5）把从酵母细胞中提取的淀粉酶固定在尼龙布上制成固定化酶，采用的方法是________
________，与传统酶应用技术相比，此技术最显著的优点是
________。
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(选修1——生物技术实践)（共15分）生物技术实践与人们的生产和生活密切相关。请回答下列有关问题。
(1)进行菊花组织培养的基本操作步骤是制备MS固体培养基、_______ _、接种、培养、移栽、栽培。花药离体培养时，选择合适发育时期的花粉能提高诱导成功率，确定花粉发育时期最常用的染色方法是_______ 。花粉经脱分化产生胚状体还是愈伤组织主要取决于培养基中______ 。
(2)如图一表示制备固定化酵母细胞的有关操作，图中的X溶液为________ ，其作用是_______________ 。用注射器滴加海藻酸钠与酵母菌混合液时，应将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温，才能加入已活化的酵母菌，目的是防止_________ 。
(3)为了探究某加酶洗衣粉中碱性蛋白酶含量与洗涤效果的关系，某同学通过实验获得如图二所示的结果。由图可知，加酶洗衣粉中碱性蛋白酶的最适含量是______%，本实验的自变量是 _______________ 。
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