分离筛选降解纤维素能力强的微生物,对于解决秸秆等废弃物资源的再利用和环境污染问题具有重要意义。研究人员用纤维素、硝酸盐、磷酸盐、硫酸盐、KCl、酵母膏以及水解酪素配制的培养基,成功筛选出能产生纤维素酶的微生物。回答下列问题:
(1)有些微生物能降解纤维素,有些微生物则不能,原因是前者能产生_____,一般认为它至少包括三种组分,即_________。
(2)配制培养基时,按照培养基配方准确称量各组分,将其溶解、定容后,调节培养基的________,及时对培养基进行分装,并进行___________灭菌法灭菌。
(3)用来筛选降解纤维素的微生物的培养基含有硝酸盐、磷酸盐、硫酸盐、其作用是________、_______。(答出两点即可)
(4)为在培养基表面形成单个菌落,若用稀释涂布平板法进行接种,在涂布平板时,滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多,原因是_________。若用平板划线法进行接种,在第二次以及其后的划线操作时,需要从上一次划线的末端开始划线,原因是__________。
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分离筛选降解纤维素能力强的微生物对于解决秸秆等废弃物资源的再利用和环境污染问题具有理论和实际意义。研究人员从土壤和腐烂的秸秆中分离筛选出能高效降解纤维素的菌株,并对筛选出的菌株进行了初步研究。
(1)对培养基进行灭菌的常用方法是 。为在培养基表面形成单个菌落,若以接种环为工具,则用 法进行接种。
(2) 先将样品悬液稀释后涂在放有滤纸条的固体培养基上进行筛选得到初筛菌株。再将初筛菌株接种到以 为唯一碳源的培养基培养2~5天,加入 溶液后,依据出现的颜色反应进行筛选,观察菌落特征并测量 。同时将初筛菌株制备成的菌液放入加有滤纸条的液体培养基中,恒温振荡培养8天,观察滤纸条的破损情况。结果见表。由表可知,8种菌株中1、3、7号菌株产酶能力较强,原因是 。
注: ① DP = (D / d) 2,其中d表示菌落直径(cm) ,D表示水解圈直径(cm)
②“+”为滤纸边缘膨胀, “+ + ”为滤纸整齐膨胀并弯曲,“+ + + ”为滤纸不定形“+ + + +”为成团糊状“+ + + + +” 为半清状
(3) 为进一步研究1、3、7号菌株对秸秆降解的效果。分别用这三种菌株对秸秆进行处理,并在第5天和第10天对秸秆和秸秆中含有的纤维素、半纤维素以及木质素等组分的降解情况进行了测定。结果见下图。
由图分析可知,三种菌株对 的降解最强,与第5天结果相比,第10天秸秆各组分中 的降解率变化最大。整体分析 号菌株的降解效果最好。
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分离筛选降解纤维素能力强的微生物,对于解决秸秆等废弃物资源的再利用和环境污染问题具有重要意义。研究人员用纤维素、硝酸盐、磷酸盐、硫酸盐、KCl、酵母膏以及水解酪素配制的培养基,成功筛选出能产生纤维素酶的微生物。回答下列问题:
(1)有些微生物能降解纤维素,有些微生物则不能,原因是前者能产生_____,一般认为它至少包括三种组分,即_________。
(2)配制培养基时,按照培养基配方准确称量各组分,将其溶解、定容后,调节培养基的________,及时对培养基进行分装,并进行___________灭菌法灭菌。
(3)用来筛选降解纤维素的微生物的培养基含有硝酸盐、磷酸盐、硫酸盐、其作用是________、_______。(答出两点即可)
(4)为在培养基表面形成单个菌落,若用稀释涂布平板法进行接种,在涂布平板时,滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多,原因是_________。若用平板划线法进行接种,在第二次以及其后的划线操作时,需要从上一次划线的末端开始划线,原因是__________。
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纤维素分解菌对于环境治理和废弃物的资源化开发利用具有重大意义。研究人员从富含腐殖质的土壤样品中筛选出高效纤维素分解菌并测定其纤维素分解能力。请回答下列问题。
(l)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以______为唯一碳源的固体培养基上,培养基中加入的KH2P04和Na2HP04的作用有____(答出两点即可)。
(2)经选择培养后的样品需接种在___的培养基上培养,在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间,这样做的目的是____。为了将分离到的菌株纯化,挑取了菌落在3块相同平板上划线,结果其中l块平板的各划线区均未见菌落生长,最可能的原因是____。
(3)刚果红可以与纤维素形成____色复合物,但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。研究人员将菌液接种在刚果红培养基平板中培养,长出菌落后出现大小不同的透明圈,透明圈的大小与纤维素酶的____有关,应选择____的菌落即为分解纤维素能力最强的菌株。
(4)为确定得到的是纤维素分解菌,需进行发酵产纤维素酶的实验。可采用对纤维素酶分解滤纸后产生____进行定量的测定。
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随着能源和环境问题日益严峻,利用纤维素酶降解秸秆生产燃料乙醇,对缓解全球能源危机有着重大意义。科研人员开展筛选、诱变及选育高产纤维素酶菌株的相关研究,过程如下图。请回答:
(1)从物理状态来看CMC平板属于__________培养基,培养基中应以___________为唯一碳源,常用的灭菌方法是___________。
(2)富集培养后的菌种常采用____________法接种于CMC平板,培养一段时间后,可根据___________初步鉴定并挑取产纤维素酶菌株XZ-33。
(3)诱变选育高产纤维素酶的菌株时,通过向培养基中加入刚果红染液筛选出____________与菌落直径比大的菌落(刚果红能与纤维素形成红色复合物,但不与纤维素水解产物结合)。
(4)如图是筛选获得菌株UV-Col6过程中60Co-γ辐照剂量与致死率和正突变率(符合生产需要的突变菌数占诱变后活菌数的比例)的关系。实验结果表明,用60Co-y射线诱变处理时合适的辐照剂量为__________KGy。从基因突变的特点分析,正突变率低的原因是_________、________________。
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[生物——选修1:生物技术实践]
针对蔬菜废弃物纤维素降解慢的难题,从自然界中采集堆肥、枯树叶等样品进行分离,筛选分解能力较强的纤维素分解菌。某研究小组探究了温度对纤维素分解菌分解能力的影响,实验步骤如下:①纤维素分解菌的筛选、分离及纯化→②纤维素分解菌菌株数量的测定→③纤维素酶活力测定和降解滤纸能力的检测。请回答下列问题:
(1)步骤①中,用________法将1 mL菌液逐步稀释成10-6的悬浊液。为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落,某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见下表):
酵母膏 | 无机盐 | 淀粉 | 纤维素粉 | 琼脂 | CR 溶液 | 水 | |
培养基甲 | + | + | + | + | - | + | + |
培养基乙 | + | + | + | - | + | + | + |
注:"+"表示有,"-"表示无。
据表判断,培养基甲_____(填"能"或"不能")用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是________;培养基乙________(填"能"或"不能")用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是____________。某同学在纯化土壤中的细菌时,发现培养基上的菌落连成一片,最可能的原因是____。
(2)对土壤中该类微生物进行计数,则步骤①采用的接种方法是______________。
(3)纤维素酶的测定方法,一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的________进行定量测定的方法。
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牛羊等反刍动物可以消化秸秆,原因在于其胃部、盲肠等处有丰富的纤维素分解菌。研究人员从牛胃中筛选纤维素分解菌,并对其降解纤维素能力进行了研究。请回答下列问题:
(1)研究人员采用稀释涂布平板法分离、纯化纤维素分解菌。在实验前,需要使用___________法对培养基进行灭菌;在接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,目的是________________;
在样品稀释和涂布平板步骤中,下列选项不需要的是(填序号)____________。
①酒精灯 ②培养皿 ③接种环 ④无菌水 ⑤显微镜
(2)刚果红可以与纤维素形成红色复合物,但并不与纤维素降解产物____________发生这种反应。若研究人员在刚果红培养基平板上,发现以某种菌的菌落为中心的____________,则表明此种菌为纤维素分解菌。
(3)研究人员欲将筛选得到的纤维素分解菌进行大量培养,应选用____________培养基(填“液体”或“固体”),并以____________为唯一碳源;培养过程中应保持恒温培养箱中的温度约为__________(填“4℃”“20℃”或“35℃”),原因是____________________。
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牛羊等反刍动物可以消化秸秆,原因在于其胃部、盲肠等处有丰富的纤维素分解菌。研究人员从牛胃中筛选纤维素分解菌,并对其降解纤维素能力进行了研究。请回答下列问题:
(1)研究人员采用稀释涂布平板法分离、纯化纤维素分解菌。在实验前,需要使用________________法对培养基进行灭菌;在接种前看随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,目的是_____________;在接种的过程中,需要使用________________(填“接种环”或“涂布器”)进行接种。
(2)刚果红可以与纤维素形成红色复合物,但并不与纤维素降解产物纤维二糖、葡萄糖发生这种反应。若研究人员在刚果红培养基平板上,发现以某种菌的菌落为中心的__________,则表明此种菌为纤维素分解菌。
(3)研究人员欲将筛选得到的纤维素分解菌进行大量培养,应选用__________培养基(填“液体”或“固体”),并以__________为唯一碳源,配置此培养基时,__________(填“能”或“不能”)使用牛肉膏作为氮源。培养过程中应保持恒温箱中的温度约为__________(填“4℃”“20℃”或“35℃”)。
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乙醇燃料已成为国际上普遍公认可降低环境污染和取代化石燃料的主要资源。可利用纤维素分解菌将植物秸秆中的纤维素降解为小分子糖类,后经酵母菌发酵即可生产乙醇。下面是分离、筛选纤维素分解菌的部分过程,请回答相关问题:
(1)从富含纤维素的环境中分离得到纤维素分解菌,这说明寻找目的菌株的方法之一是___________。为了分离纤维素分解菌,在配制选择培养基时以____________作为唯一碳源;从代谢类型分析,培养反刍动物胃中的纤维素分解菌时,必须提供无氧环境的原因是____________。
(2)在筛选纤维素分解菌时,可在培养基中加入_________染料,然后根据菌落周围是否产生______来筛选目的菌株。
(3)纯化菌株时,通常使用的划线工具是____________。划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落,第二划线区域的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落。分析造成第二划线区域的第一条线无菌落的可能原因是____________。
(4)初步筛选后,还需进行发酵产纤维素酶的实验,纤维素酶活性的测定方法一般是____________。
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[生物一选修1生物技术实践专题]
针对蔬菜废弃物纤维素降解慢的难题,从自然界中采集堆肥、枯树叶等样品进行分离,筛选分解能力较强的纤维素分解菌。回答下列问题:
(1)采集的样品中的纤维素分解菌能产生纤维素酶,该酶是一种复合酶,一般认为它至少包括三种组分,即____酶、____酶和葡萄糖苷酶,葡萄糖苷酶可将_____________分解成葡萄糖。
(2)为了确保能够从样品中分离到所需要的微生物,通常可以通过__________增加纤维素分解菌的浓度。配制的培养基按物理性质分属于______培养基,其中碳源为__________,除碳源外,还应有的营养物质有水、氮源、________。
(3)为了分离出分解能力强的纤维素分解菌的单个菌落,用_________法将富含纤维素分解
菌的溶液接种到无色的培养基上,待长出菌落后,覆盖_____溶液,10~15分钟后倒去,再
经过________溶液的处理,15min后倒掉,此时,产生纤维素酶的菌落周围将会出现________。
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某些微生物能合成纤维素酶,通过对这些微生物的研究,人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精,用纤维素酶处理服装面料等。研究人员用下表的培养基,成功地筛选到纤维素分解菌。请分析并回答问题:
(1)筛选纤维素分解菌时会在富含纤维素的环境中寻找,原因是________________有人为筛选到这样的微生物还将滤纸埋在土壤中,作用是__________________________________________。
(2)该配方是_______________培养基(根据物理状态)。这个培养基对微生物是否具有选择作用,如果具有,又是如何进行选择的?______________________________________________。
(3)选择培养能够“浓缩”所需的微生物的原因是_________________________________________
(4)一同学在纯化该类生物时,发现涂布的培养基上菌落连成一片,最可能的原因是___________________,应该采取____________措施避免出现此现象。另一同学使用划线法分离纯化菌株,经一段时间培养,发现有的线上长满了菌,有的线上无菌落,造成这种情况的原因可能是划线操作时_____________。
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