从土壤中分离获得某种微生物的步骤是①土壤取样②梯度稀释③选择培养④涂布培养⑤筛选菌株A．①...

从土壤中分离获得某种微生物的步骤是（　　　 ）

①土壤取样

②梯度稀释

③选择培养

④涂布培养

⑤筛选菌株

A．①②③④⑤　　 B．①③②④⑤

C．①②④③⑤　　 D．①④②③⑤

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某生物活动小组为测定当地农田土壤中分解尿素的细菌的数量，进行了随机取样、系列梯度稀释、涂布平板、培养、计数等步骤，实验操作如下：

请分析并回答下列问题：

（1）为了筛选和分离尿素分解菌，培养基中需要添加____________作为唯一氮源，除了必需的营养物质外，培养基中还需要添加____________。尿素分解菌能产生脲酶，把尿素分解成____________。

（2）在上述系列梯度稀释时，吸取前一试管（或锥形瓶）中lmL菌液到后一试管的工具是____________，该工具在使用前需要进行____________灭菌。

（3）实验结果：3号试管涂布的三个平板的菌落数为560、601、24，4号试管涂布的三个平板的菌落数为57、59、61，5号试管涂布的三个平板的菌落数为8、15、28。该10克土壤样品中含有尿素分解菌的估算数目是____________。通过该方法计算出来的数值往往比实际值低，原因是____________。在进行实验时，除了涂布的三个平板外，还需要至少准备一个空白培养培养基做对照，目的是____________。

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从土壤中筛选纤维素分解菌的实验设计正确的是

A．土壤取样→梯度稀释→稀释涂布平板→发酵培养

B．土壤取样→选择培养→稀释涂布平板→挑选菌落

C．土壤取样→梯度稀释→选择培养→挑选菌落

D．土壤取样→梯度稀释→稀释涂布平板→选择培养→挑选菌落

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请回答下列有关微生物培养和分离的问题。

（1）筛选石油分解菌一般要经过如下的步骤：海水取样→______→梯度稀释→将样品涂布到培养基上→挑选菌落，其中第二步的目的是______。

（2）培养微生物时，获得纯洁培养物的关键是_________。为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在_________附近进行。采用固体平板培养细菌时，为防止冷凝水影响细菌的生长，需将培养皿____培养。

（3）在菌种保藏时，对于我们频繁使用的菌种一般采用临时保藏的方法，但这种方法有两个缺点：__________________；_________________。

（4）做完实验将培养基倒掉之前，一定要进行______处理。

（5）现有5种酵母菌的营养缺陷型菌株1、2、3、4、5，它们不能合成生长所必需的物质G，已知A、B、C、D、E都是合成G物质的必需中间产物，但不知这些物质合成的顺序， 于是在培养基中分别加入这几种物质并分析了这几种物质对各种营养缺陷型菌株生长的影响结果如下表所示。

根据以上结果，推测这几种物质的合成顺序应是________________。

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某种细菌可以分解石油残存物(含有C、H、O元素)，现要分离、培养该细菌，操作步骤为：土壤取样→选择培养→梯度稀释→涂布样品到培养基→选择菌落。请据此回答：

（1）细菌与真菌最主要的区别在于：细菌___________________________________。

（2）石油残存物可以为该种细菌提供的营养物质是________________，分离该细菌的培养基从功能上叫做_____________培养基。

（3）取样时用到的一切工具均需要__________________。梯度稀释、涂布样品到培养基则必须在_____________________(填场所)进行。

（4）若需要对细菌计数，常用的简便方法是_______________，该方法测得的数目往往比实际值________________(填“大”或“小”)。

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某兴趣小组用从不同环境中采集的土壤等进行了“分解纤维素的微生物的分离”实验，实验过程为：土壤取样→选择培养→梯度稀释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落，实验结果见下表1：

表1　不同土壤微生物对纤维素的分解

（1）上述实验过程中“选择培养”的目的是________________。

（2）与30℃相比，37℃培养时霉菌类纤维素分解菌生长迅速，菌丝会________其他菌落，对后续菌种的分离造成困扰，因此采用30 ℃培养为佳。

（3）兴趣小组在鉴别菌种时尝试了两种方案：A． 先培养微生物，再加入刚果红染色；B． 直接在加入刚果红的鉴别培养基上培养微生物。结果发现：A方案在漂洗多余刚果红的过程中，易出现菌落浮起被带走的现象，从而造成________，故选方案B。由于刚果红在高温下容易被分解，应在培养基灭菌________（填“前”或“后”）加入。

（4）有小组成员根据表1结果中的________，认为菌料中的目的菌分解纤维素的能力最强，其他成员对此观点提出异议。兴趣小组继续对三组样品进行透明圈直径、菌落直径和酶活力的测定，实验结果如下表2：

表2　不同H/C值纤维素分解菌酶活性的比较

你认为将________作为判断纤维素分解菌分解能力大小的依据更合理，其大小与酶活力呈________相关。

（5）兴趣小组欲对培养液中的纤维素分解菌进行计数，具体做法是：先在培养基上加入若干质量较轻的小球，然后在平板上滴加一定体积的培养液，盖上培养皿盖后左右摇晃。试分析这样做的目的是________。

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植物中的纤维素能被土壤中的某些微生物分解，下图为分离纤维素的微生物的实验流程。请回答：土壤取样→选择培养→梯度稀释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选特定的菌落

（1）纤维素酶是一种复合酶，一般认为它包括C1酶、　　　　　　 、　　　　　　　 。

（2）在使用超净工作台前，可以用　　　　　　　　 照射30min，以杀死物体表面或空气中的微生物，在照射前，适量喷洒　　　　　　　　 溶液（写出一种即可），可以加强消毒效果。

（3）上图中选择培养的作用是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（4）需要在鉴别培养基中加入　　　　　　　　 染料，通过颜色反应对分解纤维素的微生物进行筛选。产生纤维素酶的菌落周围将会出现明显的　　　　　　　　　　　　 。筛选到的菌种可以采用　　　　　　　　　 的方法长期保存。

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（15分）生产实践中应用的菌种主要来自土壤，从土壤中分离微生物的实验流程如下：

土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养

请回答下列有关问题：

（1）将土壤浸出液接种到特定培养基上，可以将酵母菌从混杂的微生物群体中分离出来，获得纯种酵母菌，这一过程叫做________。在培养酵母菌的过程中，对培养基、接种环常采用的灭菌方法分别是_________。

（2）在使用酵母菌发酵生产酒精的过程中，影响酵母菌酒精发酵的主要因素有_______，常使用_______的方法从发酵液中提取纯酒精。

（3）从土壤中分离纤维素分解菌，最好选择在_______环境中采集土样，所选择的培养基应以_______作为唯一碳源。

（4）纤维素分解菌能够合成纤维素酶，为了使纤维素酶反复使用，可以对纤维素酶进行_______处理，处理的方法有吸附法、共价键结合法和_______法。

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土壤中的纤维素分解菌能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究与应用，使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等。从土壤中分离纤维素分解菌的实验流程如下：

土壤取样→选择培养基→梯度稀释→鉴别培养基

（1）纤维素酶是复合酶，由C1酶、Cx酶和__________组成。

（2）实验室中微生物筛选常应用选择培养基的方法，原理是__________。为分离得到纤维素分解菌，使用的培养基应以__________作为主要碳源。

（3）梯度稀释前进行选择培养的目的是__________，这一步一般选用__________（填“固体”或“液体”）培养基。

（4）梯度稀释后用__________（仪器）将菌种接种在培养基表面。

（5）用__________染色法鉴定纤维素分解菌时，培养基上的菌落周围会形成透明圈，其大小反映____________________。

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【生物——选修1　 生物技术实践】有些科学家欲从污染的土壤中分离筛选出能够高效降解原油的菌株进行大规模培养并应用。请回答问题：

（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以　　　　　　　　 为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于　　　　　　　　 培养基。筛选过程中，虽然土壤中微生物含量非常丰富，但在此培养基上长出的微生物菌落非常少，甚至有时一个培养皿中一个菌落都没有，这是因为　　　　　　　　 。

（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即　　　　 和　　　　 。

（3）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、　　　 　　 和　　 　　 　　 。

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