为研究除草剂草甘膦对黑麦根尖细胞增殖的影响，以有丝分裂指数（细胞群体中分裂细胞所占的百分比...

为研究除草剂草甘膦对黑麦根尖细胞增殖的影响，以有丝分裂指数（细胞群体中分裂细胞所占的百分比）为指标。请根据以下提供的实验材料和用具，完善实验思路，

预测实验结果并进行分析。材料与用具：黑麦种子、草甘膦、蒸馏水、培养液、培养瓶、显微镜等

（要求与说明：测定有丝分裂指数的具体操作不做要求）

（1）完善实验思路：

①利用蒸馏水配制浓度为10mg/L、102mg/L、103mg/L、104mg/L、105mg/L的草甘膦溶液；

②取黑麦种子若干在室温下浸泡过夜，将萌动的黑麦种子培养一段时间；

③____________________；

④在相同且适宜条件下培养3天，取黑麦根尖细胞利用显微镜观察并统计__________，计算有丝分裂指数，并记录；

⑤每隔两天重复步骤④；

⑥__________。

（2）如果草甘膦可以抑制DNA复制，而且浓度越大抑制作用越强，请预测实验结果（在以草甘膦浓度为横坐标的坐标曲线图中表示前两次实验结果）__________

（3）分析与讨论：

为了更好地分离细胞，可以将黑麦根尖置于含__________溶液中酶解一段时间，然后再压片。未加草甘膦溶液培养的黑麦根尖细胞有丝分裂指数只有2．3%，原因是__________。

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为研究铬（Cr）对黑麦细胞的毒性作用，科学家研究了不同浓度的铬（Cr）对黑麦根尖细胞分裂指数（即视野内处于分裂期的细胞数占细胞总数的百分比）和染色体畸变率的影响，实验结果如下。

表：K2Cr2O7对黑麦根尖细胞有丝分裂指数及染色体畸变率的影响

（1）制作黑麦根尖细胞临时装片，需经过　　　　　　 →漂洗→染色→制片等几个步骤，其中可用　　　　　　 溶液对染色体进行染色。

（2）由表中数据可以看出，促进细胞有丝分裂的K2Cr2O7的最适浓度为　　　　　　 mg·L-1,而在K2Cr2O7浓度≥　　　　　　 mg·L-1时，对黑麦根尖细胞的有丝分裂有抑制作用。

（3）科学家通过在显微镜下观察染色体的　　　　　　 和数目，统计并比较　　　　　　　 的染色体畸变率，从而明确了铬（Cr）对黑麦细胞的毒性。

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为了研究从植物中提取的可可碱是否可以作为除草剂，某科研小组开展了可可碱对鬼针草根尖细胞的有丝分裂和种子萌发影响的实验研究，结果如下表。请回答：

注：有丝分裂指数＝分裂期细胞数/观察细胞的总数×100%

(1)上图为显微镜下观察到的部分细胞图像，箭头所指的细胞处于分裂期的________期。

(2)实验结果显示，与对照组相比，当可可碱浓度到达1.0 mmol·L－1时，在分裂期的细胞中，后期和末期的细胞数目相对________。产生这种结果的原因可能是________，导致染色体无法移向细胞两极。

(3)实验结果表明，随着可可碱浓度的升高，种子发芽率________。为探究可可碱影响种子发芽率的可能原因，某同学提出假设：可可碱会降低种子中赤霉素的水平。现欲通过实验检验上述假设，请写出实验设计的基本思路：_______________________________________。

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（6分）某学校的研究性学习小组开展了“探究洋葱根尖分生组织细胞有丝分裂的日周期性”的课题研究，以确定洋葱（染色体数2N=16）根尖取材的最佳时间。细胞分裂指数是衡量洋葱根尖细胞分裂状况的指标之一，分裂指数＝（观察视野中分裂期细胞的平均数/总细胞平均数）×100%。实验操作步骤如下：

第一步：取多个已经培养好的洋葱鳞茎（根长约为5 cm左右）作为实验材料。

第二步：在某一天的8～18点时间段内每隔1小时，取3根洋葱根尖分别制成临时装片。  制作临时装片的方法如下：

①解离：剪取洋葱根尖2～3 mm，立即放入盛有质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精混合液（体积比为1∶1）的玻璃皿中，在室温下解离3～5min。

②漂洗：将根尖放入盛有清水的玻璃皿中漂洗约10 min。

③染色：将根尖放进盛有质量浓度为0．01 g/mL龙胆紫溶液的玻璃皿中染色3～5 min。

④制片：将根尖放在载玻片上，加一滴清水，并用镊子把根尖弄碎，盖上载玻片，用拇指轻轻按压载玻片。

第三步：观察、计数并记录结果。

请回答下列问题：

（1）请改正制作临时装片步骤中的1处错误。________。

（2）步骤①解离的目的是________。

（3）该研究小组的同学最后把数据转变为下图1，据图得出的结论是________。

（4）图2表示在高倍镜下观察洋葱根尖细胞时的一个视野，图中箭头所指的细胞正处于________期，该细胞不能进入下一分裂时期的原因是________。

（5）请画出洋葱根尖分生区细胞有丝分裂一个周期中染色体数目的变化曲线图。

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为比较不同处理方法对洋葱（2n＝16）根尖细胞分裂指数（即视野内分裂期细胞数占细胞总数的百分比）的影响，某研究性学习小组进行了相关实验，实验步骤如下：

①将洋葱的老根去除，经水培生根后取出。

②将洋葱分组同时转入质量分数为0.01%、0.1%秋水仙素溶液中，分别培养24h、36h、48h；秋水仙素处理停止后再转入清水中分别培养0h、12h、24h、36h。

③剪取根尖，用卡诺氏液处理8h，然后将根尖浸泡在15%盐酸溶液和95%酒精溶液中5～8min。

④步骤D_______。

⑤用苯酚品红染液进行染色。

⑥制片、镜检；计数、拍照。

实验结果：不同方法处理后的细胞分裂指数（%）如下表。

请分析上述实验，回答有关问题：

（1）步骤③中卡诺氏液的作用是__________________________；“将根尖浸泡在15%盐酸溶液和95%酒精溶液中”的目的是_______________________________。

（2）步骤④中”D”的操作是___________________。

（3）该实验中，秋水仙素的作用是____________________________________，由实验可知，提高细胞分裂指数的最佳方法是_____________________________________________。

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（12分）洋葱(2n=16)为二倍体植物。为比较不同处理方法对洋葱根尖细胞分裂指数（即视野内分裂期细胞数占细胞总数的百分比）的影响，某研究性学习小组进行了相关实验，实验步骤如下：

①将洋葱的老根去除，经水培生根后取出。

②将洋葱分组同时转入质量分数为0.01%、0.1%秋水仙素溶液中，分别培养24h、36h、48h；秋水仙素处理停止后再转入清水中分别培养0h、12h、24h、36h。

③剪取根尖，用Carnoy固定液（用3份无水乙醇、1份冰乙酸混匀）固定8h，然后将根尖浸泡在1 mol/L盐酸溶液中5~8 min。

④将根尖取出，放入盛有清水的培养皿中漂洗。

⑤用醋酸杨红试剂染色。

⑥制片、镜检；计数、拍照。

实验结果：不同方法处理后的细胞分裂指数(%)如下表。

请分析上述实验，回答有关问题：

(1)步骤③中“将根尖浸泡在1 mol/L盐酸溶液中”的作用是________ 。

(2)步骤⑥为了获得相应的观察视野，镜检时正确的操作方法是________。

(3)为了统计数据更加科学，计数时应采取的方法是________。

(4)根据上表结果可以得出如下初步结论：

①质量分数为秋水仙素溶液诱导后的细胞分裂指数较高；

②本实验的各种处理中，提高细胞分裂指数的最佳方法是________ 。

(5)右面为一位同学在步骤⑥所拍摄的显微照片，形成细胞a的最可能的原因是________。

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（8分）洋葱(2n=16)为二倍体植物。为比较不同处理方法对洋葱根尖细胞分裂指数（即视野内分裂期细胞数占细胞总数的百分比）的影响，某研究性学习小组进行了相关实验，实    验步骤如下：

①将洋葱的老根去除，经水培生根后取出。

②将洋葱分组同时转入质量分数为0. 01%、0. 1%秋水仙素溶液中，分别培养24 h、36 h、

48 h；秋水仙素处理停止后再转入清水中分别培养0 h、12 h、24 h、36 h。

③剪取根尖，用Carnoy固定液（用3份无水乙醇、1份冰乙酸混匀）固定8h，然后将根尖浸泡在1 mol/L盐酸溶液中5~8 min。

④将根尖取出，放入盛有清水的培养皿中漂洗。

⑤用石炭酸一品红试剂染色。

⑥制片、镜检；计数、拍照。

实验结果：不同方法处理后的细胞分裂指数(%)如下表。

请分析上述实验，回答有关问题：

(1)步骤③中“将根尖浸泡在1 mol/L盐酸溶液中”的作用是________。

(2)步骤⑥为了获得相应的观察视野，镜检时正确的操作方法是

________。 (3)为了统计数据更加科学，计数时应采取的方法是________。

(4)根据上表结果可以得出如下初步结论：

①质量分数为________秋水仙素溶液诱导后的细胞分裂指数较高；

②本实验的各种处理中，提高细胞分裂指数的最佳方法是________

________。

(5)下面为一位同学在步骤⑥所拍摄的显微照片，形成 细胞a的最可能的原因是________

________。

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为了研究双氢青蒿素对肺癌细胞增殖的抑制作用机制，请根据以下提供的材料与用具，以肺癌细胞的抑制率（细胞抑制率=1-细胞存活率）为测定指标，完善实验思路，预测实验结果并进行分析与讨论。

（要求与说明：培养过程中不更换培养液；实验条件适宜）

材料与用具：培养瓶若干，人肺癌细胞悬液，细胞培养液，生理盐水，低、中、高三种浓度的双氢青蒿素溶液，细胞培养箱等。

（1）完善实验思路：

①取培养瓶若干，均分成4组，标号1、2、3、4组。分别加入____和人肺癌细胞悬液。

②2-4号培养瓶中加入____，l号培养瓶加入____。置于细胞培养箱中培养一定时间。

③对4组培养瓶中的细胞进行计数。

④____。

（2）预测实验结果（设计一张表格用于填写实验数据，并预测实验结果）：

（3）分析与讨论

①如何计算细胞的存活率？____。

②经实验发现，经药物作用后的肺癌细胞甲的凋亡率较不加药物的细胞凋亡率显著增高，推测双氢青蒿素抑制肺癌细胞的方式是____。

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欲研究药物乙对海拉细胞增殖的抑制作用，请根据以下提供的材料与用具，以海拉细胞的细胞数变化为测定指标，完善实验分组设计和实验思路，预测实验结果并进行分析与讨论。

材料与用具：海拉细胞悬液，药物甲溶液(对细胞增殖有影响)，药物乙溶液，培养液、培养瓶，血细胞计数板，显微镜等。

(要求与说明：细胞计数的具体操作过程不做要求，不考虑加入溶液对体积的影响，实验条件适宜)

回答下列问题：

(1)实验分组设计：

A组：海拉细胞悬液＋培养液

B组：海拉细胞悬液＋培养液＋药物甲溶液

C组：海拉细胞悬液＋培养液＋药物甲溶液，培养一段时间后，加入_______________。

(2)完善实验思路：___________________

(3)预测实验结果(以坐标曲线图形表示实验结果，并标出加入药物的时间)：

_______________

(4)分析与讨论：

药物甲的作用是________________。

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有文章介绍，铝对植物生长有益，但在一定的条件下铝对植物也有毒害作用．请设计实验探究三氯化铝对洋葱根尖细胞有丝分裂的影响。（提示：细胞分裂情况可用细胞分裂指数来衡量，即分裂期细胞数与所观察的细胞总数之比值）

（1）实验材料：市售质无污染洋葱，1．0/L的AlCl3溶液，显微镜，解离液，龙胆紫染液，蒸馏水，镊子，烧杯，培养皿，载玻片和盖玻片等。

（2）实验步骤：

①将两个洋葱分别放入盛有清水的A、B洁净培养皿中（其中B为对照组），在室温下培养生根，每天换水一次．约38～48h后洋葱萌生新根。

②在A培养皿中加入10mL的　　　　　　　　　　 ，

在B培养皿中加入　　　　　　　　　　　　　　　　 。

③培养相同时间后，各取A、B培养皿中相同数量的洋葱根尖数个，制成临时装片。制作装片时为了便于观察需要用　　　　　　　　　　 进行染色。

④观察A、B根尖分生区各1000个细胞，分别计算分裂指数。如图是其中的一个观察视野，a、b、c、d中，最适于观察染色体的形态和数目的是　　　　　　 ，细胞数量最多的是　　　　　 。（选填字母）

（3）实验预期结果与结论：

①A培养皿中洋葱根尖的分裂指数明显大于B，说明三氯化铝对细胞分裂有促进作用；

②　　　　　　　　　　 ；

③A培养皿中洋葱根尖的分裂指数明显小于B，说明三氯化铝对细胞分裂有抑制作用。

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