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如图为某种质粒，小箭头所指为限制性内切酶EcoRⅠ的酶切位点，ampR为氨苄青霉素抗性基因，tetR为四环素抗性基因，P为启动子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端包括EcoRⅠ在内的多种酶的酶切位点。请根据图
回答下列问题。
（1）将含有目的基因的DNA与质粒分别用EcoRⅠ酶切，酶切产物用DNA连接酶进行连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有_________、_________、_________三种。将此三种连接产物与无任何抗药性的细菌A接种到含四环素的培养基中，能生长的细菌A所含有的连接产物是_________；若接种到含青霉素的培养基中，能生长繁殖的细菌A所含有的连接产物是_________。
（2）假设人的生长激素基因，与上述质粒构建表达载体后导入细菌B（本身不含有氨苄青霉素和四环素抗性质粒），然后接种在一个只含有氨苄青霉素的培养基上，得到如图a所示的结果（圆点表示菌落），该结果说明能够生长的细菌中已经导入了_________，反之则没有导入；再将灭菌绒布按到培养基a上，使绒布表面沾上菌落，然后将绒布按到只含有四环素的培养基上培养，得到如图b所示结果（空心圆圈表示与图a中培养基上对照没有菌落的位置）。与图b圆圈相对应的图a中的菌落表现型是_________，这些菌落则是导入了_________的工程菌。
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下面是质粒的示意图，其中ori为复制必需的序列，ampr为氨苄青霉素抗性基因，tetr为四环素抗性基因，箭头表示限制性核酸内切酶的酶切位点．若要得到一个能在四环素培养基上生长而不能在氨苄青霉素培养基上生长的含重组质粒的细胞，应选择合适的酶切位点是（ ）
A．
B．
C．
D．
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如图为某质粒表达载体简图，小箭头所指分别为限制酶39．如图为某质粒表达载体简图，小箭头所指分别为限制酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，ampR为青霉素抗性基因，tctR为四环素抗性基因，P为启动子，T为终止子，ori为复制原点。又知植物甲具有极强的耐旱性，其耐旱性与某个基因有关。若从该植物中获得该耐旱基因，并将其转移到耐旱性低的植物乙中，有可能提高后者的耐旱性。已知耐旱基因两端分别有包括EcoRⅠ、BamHⅠ在内的多种酶的酶切位点。据图回答：
（1）获得耐旱基因常用基因文库法。理论上， 文库中含有该生物的全部基因；而 文库中含有生物的部分基因。
（2）实验中，为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是 。酶切产物用DNA连接酶处理后，两两连接的产物有 种。
（3）将上述连接产物导入无任何抗药性的宿主细胞后，将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能正常生长的宿主细胞所含有的连接产物是 。
（4）目的基因表达时，RNA聚合酶识别和结合的位点是 ，其合成的产物是 。
（5）假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交，子代中耐旱植株与不耐旱植株的数量比为3：1时，则可推测该耐旱基因整合到了 （填“同染色体的一条上”或“同染色体的两条上”）。
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如图为某质粒表达载体简图，小箭头所指分别为限制酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，ampR为青霉素抗性基因，tctR为四环素抗性基因，P为启动子，T为终止子，ori为复制原点．又知植物甲具有极强的耐旱性，其耐旱性与某个基因有关．若从该植物中获得该耐旱基因，并将其转移到耐旱性低的植物乙中，有可能提高后者的耐旱性．已知耐旱基因两端分别有包括EcoRⅠ、BamHⅠ在内的多种酶的酶切位点．据图回答：
（1）获得耐旱基因常用基因文库法．理论上，_________________（填基因文库种类）中含有该生物的全部基因；而_________________（填基因文库种类）中含有生物的部分基因．将含有耐旱基因的DNA与该质粒表达载体分别用EcoRⅠ酶切，酶切产物用DNA连接酶处理后，两两连接的产物有_________种。
（2）将上述连接产物导入无任何抗药性的宿主细胞后，将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能正常生长的宿主细胞所含有的连接产物是___________________________。
（3）目的基因表达时，RNA聚合酶识别和结合的位点是_______________，其合成的产物是_______________。
（4）在上述实验中，为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是_______________。
（5）假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交，子代中耐旱植株与不耐旱植株的数量比为3：1时，则可推测该耐旱基因整合到了_______________________（填“同染色体的一条上”或“同染色体的两条上”）。
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下图是获得人乳铁蛋白的技术路线。（图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamHI、HindⅢ、SmaI三种限制酶的酶切位点如图所示）
据图回答：
（1）已知人乳铁蛋白基因的全部序列，可通过人工合成法或 技术获得人乳铁蛋白基因。据图分析，过程①表示____ ．，该过程需要的限制酶是___ _。筛选含有重组载体的大肠杆菌，培养基中应另添加____ 。
（2）图中过程②最常用的方法是__ __。体外培养受精卵时，需将其置于含95%空气加5% CO2的混合气体的培养箱中进行培养，C02的主要作用是 。
（3）图中过程___ _（填序号）表示胚胎移植，在胚胎移植前要对代孕牛进行___ _处理。
（4）为检测人乳铁蛋白基因是否成功表达，可采用 技术。
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如图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。
据图回答：
(1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用________限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含________的培养基上进行。
(2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是________ (填字母代号)。
A.启动子 B.tetR C.复制原点 D.ampR
(3)过程②可采用的生物技术是________________。
(4)对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。这利用了细胞的________性。
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（8分）下图（一）为某基因工程中利用的质粒简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，ampR为青霉素（抗生素）抗性基因，tctR为四环素（抗生素）抗性基因。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。下图（二）为几种酶作用于基因的位置。请回答下列问题：
（1）在基因工程中常用的工具有三种：一是用作切取目的基因的________酶；二是将目的基因与运载体拼接的________酶；三是作为运载体的质粒。
（2）将含有目的基因的DNA与经特定的酶切后的运载体（质粒）进行拼接形成重组DNA，理论上讲，重组DNA可能有：目的基因－目的基因、目的基因－运载体和运载体－运载体三种，其中有效的（所需要的）重组DNA是________，因此需要对这些拼接产物进行分离提纯。
（3）利用图（一）所示的质粒拼接形成的3种拼接产物（重组DNA）导入无任何抗药性的原核宿主细胞，并接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的拼接产物（重组DNA）是________。含有效的重组基因（目的基因-运载体）的原核宿主细胞在含青霉素的培养基上_________（能/不能）生长。
（4）在动物基因工程中，将重组DNA导入受体细胞的常用方法是________ 。
（5）图（二）中，作用于a 位置的酶是________；作用于b 位置的酶是________。
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右下图为某种质粒表达载体简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，ampR为青霉素抗性基因，tctR 为四环素抗性基因，P为启动子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。据图回答下列问题：
⑴将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用EcoRI酶切，酶切产物用DNA连接酶进行连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有______种。若要从这些连接产物中分离出重组质粒，需要对这些连接产物进行分离纯化。
⑵用上述几种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是____________________；
⑶在上述实验中，为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是________。
⑷基因工程是一柄“双刃剑”，一方面可以极大地提高栽培作物的基因潜力，打破了种间的______隔离，从变异的角度看，基因工程的原理是_____________；另一方面也可能给生态系统和人类带来安全隐患，举一例简要说明：_______________________。
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[生物——选修3：现代生物科技专题]下图表示利用羊生产抗凝血酶的过程，图中ampR表示氨苄青霉素抗性基因，tetR表示四环素抗性基因，BamH I、Hind Ⅲ、Sma I为三种限制酶及酶切位点，据图回答问题：
（1）通常采用_______技术来扩增获得抗凝血酶基因，其原理是_________，需要_______酶。据图分析，可将目的基因插入________抗性基因中。
（2）质粒的化学本质是______，除质粒外，还有______（至少写出两种）也可以充当载体。
（3）过程①可采用______的方法将重组质粒导入羊受精卵中，可采用_____技术来检测抗凝血酶基因是否转录成功。
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下图是基因工程中构建生产人乳铁蛋白的重组载体。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamHI、HindIII、SmaI直线所示为三种限制酶的酶切位点。图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用几种限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含哪种抗生素的培养基上进行？
A、1种 四环素 B、2种 氨苄青霉素 C、1种 四环素 D、2种 四环素
