草甘磷是一些除草剂的活性成分，使用时需要加入少量的洗衣粉作为表面活性剂。一种特定的基因对草...

草甘磷是一些除草剂的活性成分，使用时需要加入少量的洗衣粉作为表面活性剂。一种特定的基因对草甘磷具有抗性，如果这个基因能通过基因工程转入农作物中，就能使农作物即使被撒到除草剂也能存活。为了检测转入农作物中的目的基因是否表达，某同学随机选取了对草甘磷敏感的植株（A、D）、对草甘磷天然具有抗性的植株（B、E）和转入抗草甘磷目的基因的转基因植株（C、F），进行实验，观察并记录植株的生长情况如下图。据图分析，下列叙述中正确的是　　 （　　　 ）

A．实验组叶面定时喷洒一定浓度的草甘磷溶液，对照组则不作任何处理

B．实验结果表明转入植株C、F的草甘磷抗性基因已成功表达

C．自然种群中存在对草甘磷天然具有抗性植株（E）的根本原因是基因重组

D．长期使用草甘磷，将导致农作物中抗草甘磷基因频率的定向改变

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草甘磷是一些除草剂的活性成分。农作物被洒到除草剂，也会死亡。草甘磷抗性基因能使植物对草甘磷具有抗性。如果这个基因能通过基因工程转入农作物中，就能使农作物即使被洒到除草剂也能存活。现有植株A、B、C、D、E、F，其中A和D对草甘磷敏感，B和E天然具有抗性，C和F经过了转基因处理，但是否有效仍然未知。植株A、B和C浇清水，D、E和F浇的水中含有草甘磷成分的除草荆。

(1)假设草甘磷抗性基因被转移到植株F中并成功表达。预测D、E和F在浇了草甘磷后是否能健康生长，并说明理由。________。

(2)要检测植株F的DNA中是否插入了草甘磷抗性基因，需要运用____方法。该方法需要用到探针，探针是指____。F植株浇的水中含有草甘磷成分的除草剂用于检测转基因是否成功，这属于 ___水平的检测。

(3)基因工程除了可用于抗除草剂植物的培养，还可用于进行基因治疗。基因治疗包括有________________________________________。

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草甘膦是一种广泛应用的除草剂，能不加选择地杀死各种杂草和农作物。研究发现，某种植物对草甘膦具有抗性，将该种植物的抗草甘膦基因转入油菜中，使油菜能抗草甘膦。在转基因油菜种植多年后，该地域未使用草甘膦的野生油菜约有80%含有抗草甘膦基因。下列叙述中不正确的是

A．人们培育出转基因油菜的育种原理是基因重组

B．转入抗草甘膦基因，可为油菜的进化提供原材料

C．大量使用草甘膦，降低了物种的多样性

D．野生油菜中含抗草甘膦基因是自然选择的结果

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为使水稻获得抗除草剂性状，科研人员将除草剂草甘膦抗性基因转入水稻植株，获得抗草甘膦转基因水稻。

（1）将草甘膦抗性基因作为_____，与Ti质粒用相同的_____和DNA连接酶处理构建基因表达载体。

（2）用_____处理农杆菌后获得感受态细胞，将其与基因表达载体混合完成转化后，在添加_____的培养基中，经筛选1得到含基因表达载体的农杆菌。

（3）利用PCR技术，可以鉴定被侵染的愈伤组织中是否含有草甘膦抗性基因。草甘膦抗性基因的部分序列如下：

5'﹣﹣﹣ATGGCT………AGGAAC﹣﹣﹣3'

3'﹣﹣﹣TACCGA………TCCTTG﹣﹣﹣5'

根据上述序列应选择引物_____（填字母）进行PCR。

A．引物：5'﹣TACCGA﹣3'

B．引物：5'﹣GTTCCT﹣3'

C．引物：5'﹣AUGGCU﹣3'

D．引物：5'﹣ATGGCT﹣3'

（4）PCR扩增时需要根据草甘膦抗性基因序列设计_____种引物，其原因是_____。

（5）除了鉴定愈伤组织中是否含有目的基因以外，还可以利用GUS基因表达产物的鉴定进行图中的筛选2，以确定目的基因是否_____。两次筛选后得到的转基因愈伤组织经过细胞的_____过程，获得转基因水稻。

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为使水稻获得抗除草剂性状，科研人员将除草剂草甘膦抗性基因转入水稻植株，获得抗草甘膦转基因水稻。

注：GUS基因表达产物经染色能从无色变成蓝色

（1）将草甘膦抗性基因作为________，与Ti质粒用相同的______和DNA连接酶处理构建基因表达载体。

（2）用________处理农杆菌后获得感受态细胞，将其与基因表达载体混合完成转化后，在添加_____的培养基中，经筛选1得到含基因表达载体的农杆菌。

（3）取某品种水稻的幼胚，先进行_______处理，然后接种到培养基中，水稻幼胚细胞发生___________形成愈伤组织。用含基因表达载体的农杆菌侵染该愈伤组织。

（4）利用PCR技术，可以鉴定被侵染的愈伤组织中是否含有草甘膦抗性基因。草甘膦抗性基因的部分序列如下：

5’---ATGGCT………AGGAAC---3’

3’---TACCGA………TCCTTG---5’

根据上述序列应选择引物_________（填字母）进行PCR。

A.引物：5’-TACCGA-3’　　　　　　　 B.引物：5’-GTTCCT-3’

C.引物：5’-AUGGCU-3’　　　　　　　 D.引物：5’-ATGGCT-3’

（5）除了鉴定愈伤组织中是否含有目的基因以外，还可以利用GUS基因表达产物的鉴定进行图中的筛选2，以确定目的基因是否____。两次筛选后得到的转基因愈伤组织经过细胞的________过程，获得转基因水稻。

（6）为获得具有抗除草剂性状的转基因水稻，还需要在个体水平进行抗性测试。请你设计一个实验方案，筛选出对草甘膦具有抗性的转基因水稻。_____

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为使水稻获得抗除草剂性状，科研人员将除草剂草甘膦抗性基因转入水稻植株，获得抗草甘膦转基因水稻。

注：GUS基因表达产物经染色能从无色变成蓝色

（1）将草甘膦抗性基因作为________，与Ti质粒用相同的______和DNA连接酶处理构建基因表达载体。

（2）用___________________处理农杆菌后获得感受态细胞，将其与基因表达载体混合完成转化后，在添加_________________的培养基中，经筛选1得到含基因表达载体的农杆菌。

（3）取某品种水稻的幼胚，先进行__________处理，然后接种到培养基中，水稻幼胚细胞发生_____________________形成愈伤组织。用含基因表达载体的农杆菌侵染该愈伤组织。

（4）除了鉴定愈伤组织中是否含有目的基因以外，还可以利用GUS基因表达产物的鉴定进行图中的筛选2，以确定目的基因是否______。两次筛选后得到的转基因愈伤组织经过细胞的_____________过程，获得转基因水稻。

（5）为获得具有抗除草剂性状的转基因水稻，还需要在个体水平进行抗性测试。请你设计一个实验方案，筛选出对草甘膦具有抗性的转基因水稻。____________

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为使水稻获得抗除草剂性状，科研人员将除草剂草甘膦抗性基因转入水稻植株，获得抗草甘膦转基因水稻。

注：GUS基因表达产物经染色能从无色变成蓝色

（1）将草甘膦抗性基因作为________，与Ti质粒用____________酶处理构建基因表达载体。

（2）用________处理农杆菌后获得感受态细胞，将其与基因表达载体混合完成转化后，在添加_________的培养基中，经筛选1得到含基因表达载体的农杆菌。

（3）取某品种水稻的幼胚，进行消毒处理，接种到培养基中，水稻幼胚细胞发生___________形成愈伤组织。用含基因表达载体的农杆菌侵染该愈伤组织。

（4）除了鉴定愈伤组织中是否含有目的基因以外，还可以利用GUS基因表达产物的鉴定进行图中的筛选2，以确定目的基因是否____________。

（5）为获得具有抗除草剂性状的转基因水稻，还需要在个体水平进行抗性测试。请你设计一个实验方案，筛选出对草甘膦具有抗性的转基因水稻__________。

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回答下列（一）、（二）小题：

（一）研究者将抗草甘膦除草剂抗性基因和毒蛋白抗虫基因成功导入棉花，获得双抗棉花转基因植株，请回答：

（1）该基因工程中的目的基因是_______________________。

（2）构建重组DNA时需要用到的工具酶是________和___________，重组DNA通过_________导入棉花细胞。转基因技术成功意味着重组DNA在烟草细胞内进行复制和高效____________________。

（3）欲证明转基因棉花具有抗草甘膦、抗虫能力，还需对转基因植株进行试验，下列方法错误的是______。

A.根据标记基因用选择培养基进行筛选　　　　　　

B.喷洒草甘膦除草剂

C.提取毒蛋白，利用抗原一抗体反应检测　　　　　

D.利用棉铃虫进行检测

(二）为快速获得转基因棉花，研究者按下图流程开展了实验。请回答：

（1）MS培养基由大量元素、微量元素和_____________组成，也可将这些成分分别配成浓度为配方5-10倍的____________，用时稀释。

（2）茎尖在70%乙醇中浸泡后，再放入__________中浸泡，最后在_________中用无菌水清洗。切取茎尖接种于生芽培养基中培养获得X，X称为_____________。

（3）过程③的目的是使幼苗逐渐适应自然环境，该过程中的湿度变化是________________。

A.保持较高湿度不变　　　　　　　　

B.逐渐升高

C.保持较低湿度不变　　　　　　　　

D.逐渐降低

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黑麦草具有抗除草剂草甘膦的能力，是因为黑麦草具有抗草甘膦基因。科学家利用该基因通过转基因技术获得了抗除草剂草甘膦的玉米新品种，回答下列问题：

（1）科研人员选择能够茁壮生长在喷洒过草甘膦溶液环境中的黑麦草，从黑麦草细胞中提取___________，通过反转录法构建_______文库，再从中选取抗草甘膦基因。该方法获得的目的基因直接导入玉米细胞中不能正常表达，其原因是__________________。

（2）将目的基因导入植物细胞有多种方法，最常用的是___________________。

（3）经研究发现该种玉米新品种抗草甘膦的能力较低，可通过_____________工程修饰或合成编码抗草甘膦的基因。

（4）种植该转基因玉米作为食物会引发公众在食物安全方面的担忧，主要是担心转基因生物会产生出___________________。

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【生物—选修3:现代生物科技专题】黑麦草具有抗除草剂草甘麟的能力，是因为黑麦草拥有编码抗草甘麟酶的基因。科学家利用该基因.通过转基因技术获得了抗除草剂草甘磷的玉米新品种。培育新品种过程中用到了PCR技术(如图所示)，请回答下列问题:

(1)通过反转录法得到_______________文库，从中选取抗草甘磷酶的基因。该方法获得的目的基因缺少基因表达所需的调控序列，即_______________。

(2)体外获得大量编码抗草甘麟酶的基因要利用PCR技术，该技术所依据的原理为_______________，图中物质A是_______________，B酶是_______________。

(3)将目的基因导入植物细胞有多种方法，最常用的是_______________。

(4)若需要对转入抗草甘麟基因的玉米进行个体生物学水平的鉴定，需要对玉米做_____操作。

(5)若实验结果不理想，为了提高抗草甘麟酶活性，可以通过_______________工程设计和改造编码抗草甘麟酶的基因。

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