右边图示全过程是( )
A.构建基因组文库 B.构建 cDNA 文库
C.构建基因表达载体 D.构建转基因工程菌
高三生物选择题简单题
右边图示全过程是( )
A.构建基因组文库 B.构建 cDNA 文库
C.构建基因表达载体 D.构建转基因工程菌
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下列说法不正确的是
A.基因身份证是指把每个人的致病基因和易感基因都检测出来,记录在磁卡上
B.基因文库包括基因组文库、cDNA文库等
C.基因工程的核心是基因表达载体的构建
D.基因工程中重组DNA时,外源DNA的插入不是随机的
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在下列基因工程的基本操作步骤中,未发生碱基互补配对的是( )
A. 构建cDNA文库
B. 重组质粒导入受体细胞
C. 目的基因与质粒构建重组质粒
D. 目的基因在受体细胞内表达
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下列有关基因工程的说法正确的是( )
A.如果某种生物的 cDNA 文库中的某个基因与该生物的基因组文库中的某个基因控制的性状相同,则这两个基因的结构也完全相同
B.一个基因表达载体的组成,除了目的基因外,还必须有启动子、终止密码子和 标记基因
C.目的基因进入受体细胞,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程,称为转化
D.将目的基因导入植物细胞和动物细胞的常用方法是显微注射法
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根据以下植物基因工程的操作步骤,回答有关问题。
(1)利用PCR技术从cDNA文库中获取目的基因(基因序列未知),需根据相应蛋白质的氨基酸序列设计多种引物,原因是____________,基因表达载体中目的基因上游的____________是RNA聚合酶的识别位点。
(2)将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是____________。
(3)下图是利用CRISPR/Cas9基因编辑技术将目的基因导入植物受体细胞的示意图。图中质粒含CRISPR基因和Cas9基因,CRISPR基因转录的sgRNA可以特异性识别细胞核DNA分子中的特定序列,Cas9基因表达的Cas9酶能切割被sgRNA识别的DNA序列。重组片段中的目的基因,能通过DNA损伤修复和被切割的DNA序列连接。
sgRNA通过____________特异性识别细胞核DNA分子中的有关序列,sgRNA、Cas9酶和基因工程中的基本工具____________作用相似。不同基因工程中利用的CRISPR/Cas9质粒有差异,这些质粒中所含的CRISPR基因通常是____________(填“相同”或“不同”)的,所含的Cas9基因通常是____________(填“相同”或“不同”)的。
(4)利用CRISPR/Cas9基因编辑技术将目的基因导入受体细胞与“(2)”中使用的方法相比,优点是____________。
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以下是基因工程四个主要操作程序:
①基因表达载体的构建 ②将目的基因导入受体细胞 ③目的基因的获取 ④目的基因的检测与鉴定
请回答下列问题:
(1)进行③操作时,可以从基因文库中获取,基因文库分为_____________ 两种,其区别是_____________ ,PCR扩增也是获取目的基因常用的方法,进行PCR时,需要向扩增仪中加入热稳定DNA聚合酶、四种原料、_____________ 以及引物,合成引物的前提是_____________ 。PCR扩增时,与引物结合的是_____________ 。
(2)进行操作①时,应先选择合适的载体,常见的载体是质粒,质粒的本质是______;如图是常用的质粒载体,基因工程中利用BamH I限制酶识别CCATCC序列,并在GG之间切割,通过BamH I限制酶切割形成的末端属于___________,科研人员利用该质粒完成基因工程,则通过___________基因供重组DNA的鉴定与选择。
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基因文库的构建是基因工程操作中不可缺少的环节,关于基因文库的说法错误的是( )
A.某种生物的基因组文库比cDNA文库容量大
B.cDNA文库和基因组文库中均含有基因中的启动子
C.真核生物基因组文库中含有内含子,而cDNA文库没有
D.cDNA文库中的基因一般均可在物种间交流,而基因组文库中的基因只有部分可以
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科研人员利用大肠杆菌构建了抗虫基因文库。最新研究发现漏斗蜘蛛中的AH基因控制合成的毒素肽具有显著的杀虫效果,现以p-B质粒为载体,构建AH基因的cDNA文库。图1表示p-B质粒,其中Cm!r表示氯霉素抗性基因,ccdB 基因表达产物能抑制大肠杆菌DNA复制。图中箭头表示相关限制酶的酶切位点,且不同种限制酶识别序列不同,其中Aiu I、Xba I、Ssp I和Mfe I识别的碱基序列和酶切位点分别是AGLCT、T4CTAGA、AATIATT、 CIAATTG。请分析回答:
(1)为获得AH基因的cDNA,先要从漏斗蜘蛛毒素肽分泌细胞中提取_________, 再利用反应体系中添加__________, 从而准确合成出AH基因的cDNA,排除其他提取物的干扰。若从漏斗蜘蛛其他组织细胞提取,则难以成功,原因是其他组织细胞中_________。
(2)利用图中的质粒和AH基因构建重组质粒时,宜选用________双酶切质粒, 再选用_________切割目 的基因,将切割后获得的DNA片段混合,经DNA连接酶处理后,再与大肠杆菌混合培养,在含有适量氯霉素的培养基中添加适量冷冻的________,以促进转化。
(3)经上述处理培养后,获得存活的大肠杆菌中应含有的质粒是________,原因是_________。
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cDNA文库的构建、克隆和筛选常用大肠杆菌作为受体菌。大肠杆菌质粒或噬菌体常作为cDNA文库构建的载体。已知天然大肠杆菌质粒上有氨苄靑霉素抗性基因,而噬菌体使细菌裂解后会在培养基上产生肉眼可见的噬菌斑。请冋答下列问题:
(1)作为载体,质粒与T2噬菌体在结构上的区别是__________,已知DNA序列与载体DNA分子连接后导入宿主细胞可克隆(扩增)DNA片段,在前述两种载体中,能够克隆大片段DNA的是________________。
(2)筛选文库的过程:第一步,将普通培养基上培养的大肠杆菌用尼龙膜(具有吸收DMA的功能)转移到含氨苄靑霉素的培养基上培养,一段时间后发现含重组质粒或含重组噬菌体的大肠杆菌在培养基上的生长情况不同,前者_________、后者___________;第二步,用尼龙膜影印培养基后正面朝上置于另一培养皿中,用碱使双链DNA__________(填“解旋成为单链”或“分解为脱氧核苷酸”);第三步,将尼龙膜浸入用______________作为探针的溶液中,保温后检测膜上是否出现________,从原始普通培养基上找到相应的区域即可得到含目的基因的大肠杆菌。
(3)作为受体的大肠杆菌细胞内,应不含_________基因,以利于筛选出含重组质粒的受体菌。
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根据基因工程的有关知识,回答下列问题:
(1)cDNA文库属于 基因文库,其构建方法是:用某种生物发育的某个时期的____通过反转录产生cDNA片段,与 连接后储存在一个受体菌群中。
(2)切割DNA分子的工具是____ ,它能使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的 断开,形成黏性末端或平末端。
(3)基因工程中所使用的DNA连接酶有两类。既可以“缝合”黏性末端,叉可以“缝合”平末端的是 DNA连接酶。
(4)将目的基因导人植物细胞采用最多的方法是___ _;如果受体细胞是大肠杆菌,需要用 处理细胞,使之成为感受态细胞,才能吸收DNA分子。
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