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下图1是获取用于构建基因表达载体的含人生长激素基因的DNA片段(DNA复制子链延伸方向是5′→3′，转录方向为左→右)示意图，图2是所用质粒示意图，其上的Ampr表示青霉素抗性基因，Tett表示四环素抗性基因。有关限制酶的识别序列和酶切位点如下表。请据图回答：
限制酶识别序列和酶切位点表
| 限制酶 | HindⅢ | BamHⅠ | PstⅠ | EcoRⅠ | SmaⅠ | BglⅡ |
| 识别序列(5′→3′) | A↓AGCTT | G↓GATCC | C↓TGCAG | G↓AATTC | CCC↓GGG | A↓GATCT |
(1) ①过程催化形成磷酸二酯键的酶有____________________，合成的人生长激素基因中________(选填“有”或“无”)与终止密码子相应的碱基序列。
(2) 引物1由5′→3′的碱基序列为________________________，引物2应含有限制酶________的识别序列；从图1的过程②开始进行PCR扩增，第六次循环结束时，图中用于构建基因表达载体的DNA片段所占比例是________。
(3) 在构建表达载体的过程中对图中质粒、DNA片段进行合适的完全酶切后，向两者的混合物中加入DNA连接酶，若只考虑DNA切段两两连接，则混合物中将形成________种环状DNA。
(4) 2018年11月基因编辑婴儿事件震惊了世界，舆论一片哗然，某科研团队利用“CRISPR/Cas9”技术将受精卵中的艾滋病病毒受体基因CCR5进行修改，拟培育出具有艾滋病免疫能力的基因编辑婴儿。下图3为向导RNA引导Cas9蛋白切割CCR5基因(目标DNA)示意图。
①向导RNA的合成需要________酶。Cas9蛋白是一种________酶。
②“GRISPR/Cas9”技术，是利用________法将Cas9蛋白和特定的引导序列导入受精卵中发挥基因编辑作用。
③基因编辑婴儿引起舆论的关注，很多科学家表示反对，请给出合理的理由______________。
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下图1是获取用于构建基因表达载体的含人生长激素基因的DNA片段(DNA复制子链延伸方向是5′→3′，转录方向为左→右)示意图，图2是所用质粒示意图，其上的Ampr表示青霉素抗性基因，Tett表示四环素抗性基因。有关限制酶的识别序列和酶切位点如下表。请据图回答：
限制酶识别序列和酶切位点表
| 限制酶 | HindⅢ | BamHⅠ | PstⅠ | EcoRⅠ | SmaⅠ | BglⅡ |
| 识别序列(5′→3′) | A↓AGCTT | G↓GATCC | C↓TGCAG | G↓AATTC | CCC↓GGG | A↓GATCT |
(1) ①过程催化形成磷酸二酯键的酶有____________________，合成的人生长激素基因中________(选填“有”或“无”)与终止密码子相应的碱基序列。
(2) 引物1由5′→3′的碱基序列为________________________，引物2应含有限制酶________的识别序列；从图1的过程②开始进行PCR扩增，第六次循环结束时，图中用于构建基因表达载体的DNA片段所占比例是________。
(3) 在构建表达载体的过程中对图中质粒、DNA片段进行合适的完全酶切后，向两者的混合物中加入DNA连接酶，若只考虑DNA切段两两连接，则混合物中将形成________种环状DNA。
(4) 2018年11月基因编辑婴儿事件震惊了世界，舆论一片哗然，某科研团队利用“CRISPR/Cas9”技术将受精卵中的艾滋病病毒受体基因CCR5进行修改，拟培育出具有艾滋病免疫能力的基因编辑婴儿。下图3为向导RNA引导Cas9蛋白切割CCR5基因(目标DNA)示意图。
①向导RNA的合成需要________酶。Cas9蛋白是一种________酶。
②“GRISPR/Cas9”技术，是利用________法将Cas9蛋白和特定的引导序列导入受精卵中发挥基因编辑作用。
③基因编辑婴儿引起舆论的关注，很多科学家表示反对，请给出合理的理由______________。
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植物基因工程在农业中的应用发展迅速。其中最关键的核心是构建基因表达载体,在此之前首先要获取目的基因,PCR是获取大量目的基因的一种方法,PCR技术可以实现在生物体外复制特定的DNA片段。最后将目的基因导入受体细胞并检验是否可以维持和表达其遗传特性。
（1）抗病转基因植物所采用的基因,使用最多的是_____________（答一种即可）。
（2）PCR技术的原理是________________；构建基因表达载体的目的是______________________（答出两点即可）。
（3）我国的转基因抗虫棉用的方法是_______________；将目的基因导入单子叶植物常用的方法是____________；导入双子叶植物常用的方法是______________，在此方法中，植物受到损伤后会分泌__________________________。
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为了研究视神经病变诱导基因（OPTN）的分子机制，科研人员用OPTN基因的部分DNA片段构建表达载体，导入细胞后转录出的RNA会抑制细胞中OPTN蛋白的合成。实验中使用的DNA片段和载体上限制酶的识别序列如下：
| 限制酶 | BglⅡ | BamHⅠ | HindⅢ | XhoⅠ |
| 识别序列和切割位点 | A↓GATCT TCTAG↑A | G↓GATCC CCTAG↑G | A↓AGCTT TTCGA↑A | G↓TCGAG GAGCT↑C |
请回答：
（1）应选用BamHⅠ和HindⅢ切割载体质粒，理由是____________。
（2）重组质粒上____________（填“有”或“无”）BamHⅠ的识别序列，因此可通过酶切法鉴定质粒是否重组成功，方法如下：用BamHⅠ和XhoⅠ两种限制酶处理质粒，未重组的质粒将产生____________种片段，重组的质粒将产生____________种片段。
（3）重组质粒导入细胞后，能抑制细胞中OPTN蛋白合成的原因是____________。
（4）要证明导入重组质粒的细胞中OPTN基因的表达受到抑制，需要设置____________作为对照组。通常采用____________法检测细胞中OPTN蛋白的表达水平。
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继乳腺生物反应器之后，科学家培养出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中，请回答下列问题：
（1）基因表达载体包括 ，在构建基因表达载体过程中，获取目的基因时用 进行切割。人的生长激素基因能整合到小鼠染色体的DNA上，原因是 。
（2）将人的生长激素基因导入小鼠的受体细胞时，常选用 作为受体细胞，原因是 。
（3）从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是 ，在胚胎移植前通过 技术可获得较多胚胎。
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基因表达载体的构建是基因工程的核心。图中甲为限制酶EcoRⅠ的识别序列，图乙表示目的基因及限制酶切点，图丙表示目的基因上的DNA片段，图丁表示质粒。请回答下列问题：
（1）从供体真核生物的某组织中获取mRNA，并以此为模板反转录产生多种片段，与载体连接后储存在一个受体菌群中，该受体菌群体叫____文库，从该文库中获得的目的基因_________（填“含”或“不含”）启动子、终止子、内含子。
（2）若用图甲所示的限制酶EcoRⅠ切割外源DNA，就其专一性而言，切开的是G和A所在的两个_________之间的_________键，即图丙的②处。
（3）为了使目的基因和质粒定向连接，并且有利于受体细胞的筛选，提高重组效率，应该选择的限制酶是PstⅠ和___________，如果大肠杆菌是受体细胞，则其体内应不含________基因，以利于筛选出含质粒的受体菌。
（4）PCR技术扩增图乙中的目的基因时，需要提供模板、Taq酶、_______（原料）、引物C和引物_________等条件。
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关于转基因鲤鱼培育过程的叙述，正确的是
A. 构建表达载体需要限制酶和DNA连接酶 B. 以幼小鲤鱼的肝脏细胞为受体细胞
C. 可用农杆菌转化法导入生长激素基因 D. 可用二苯胺检测受体细胞是否含生长激素基因
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用 限制酶XbaI和SacI（两种酶切出的粘性末端不同）切割某DNA，获得含目的基因的片段。若利用该片段构建基因表达载体，应选用下图中的Ti质粒是
注：图中箭头所指的位置是限制酶识别和切割的位点
A. 
B. 
C. 
D. 
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HIV属于逆转录病毒，是艾滋病的病原体。回答下列问题：
（1）用基因工程方法制备HIV的某蛋白（目的蛋白）时，可先提取HIV中的 ，以其作为模板，在
的作用下合成 。获取该目的蛋白的基因，构建重组表达载体，随后导入受体细胞。
（2）从受体细胞中分离纯化出目的蛋白，该蛋白作为抗原注入机体后，刺激机体产生的可与此蛋白结合的相应分泌蛋白是 。该分泌蛋白可用于检测受试者血清中的HIV，检测的原理是 。
（3）已知某种菌导致的肺炎在健康人群中罕见，但是在艾滋病患者中却多发。引起这种现象的根本原因是HIV主要感染和破坏了患者的部分 细胞，降低了患者免疫系统的防卫功能。
（4）人的免疫系统有 癌细胞的功能，艾滋病患者由于免疫功能缺陷，易发生恶性肿瘤。
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HIV属于逆转录病毒，是艾滋病的病原体。回答下列问题：
（1）用基因工程方法制备HIV的某蛋白（目的蛋白）时，可先提取HIV中的 ，以其作为模板，在
的作用下合成 。获取该目的蛋白的基因，构建重组表达载体，随后导入受体细胞。
（2）从受体细胞中分离纯化出目的蛋白，该蛋白作为抗原注入机体后，刺激机体产生的可与此蛋白结合的相应分泌蛋白是 。该分泌蛋白可用于检测受试者血清中的HIV，检测的原理是 。
（3）已知某种菌导致的肺炎在健康人群中罕见，但是在艾滋病患者中却多发。引起这种现象的根本原因是HIV主要感染和破坏了患者的部分 细胞，降低了患者免疫系统的防卫功能。
（4）人的免疫系统有 癌细胞的功能，艾滋病患者由于免疫功能缺陷，易发生恶性肿瘤。