科研人员设计了一段DNA序列并导入人体细胞，该序列仅与癌细胞内的特定蛋白结合，启动相关基因...

科研人员设计了一段DNA序列并导入人体细胞，该序列仅与癌细胞内的特定蛋白结合，启动相关基因的表达，表达产物可“命令”淋巴细胞杀死癌细胞。下列叙述不正确的是

A. 该过程体现了基因的选择性表达

B. 该过程既有体液免疫又有细胞免疫

C. 基因表达产物需经过内质网和高尔基体的加工及运输

D. 效应T细胞杀死癌细胞体现了细胞间的信息交流功能

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人体细狍中的P21基因控制合成的P21蛋白可通过调控细胞周期来抑制细胞的恶性增植。科研人员发现与P21基因启动子区某段DNA序列互补的RNA分子（saRNA）对P21基因的表达有影响，并对此进行了研究。

（1）P21基因的启动子区有__________酶识别与结合的位点，此酶可催化相邻两个核苷酸分子的_______之间形成化学键。

（2）脂质体是磷脂分散于水中时形成的具有__________层分子结构的球形囊泡，可与细胞膜融合，将物质送入细胞内部。研究人员将包裹了人工合成的saRNA的脂质体转入人胆囊癌细胞中，同时设置对照，对照组将包裹了____________的脂质体转入同种细胞中。一段时间后，检测P21基因的mRNA生成量及胆囊癌细胞的存活率，结果如上两幅图。图示说明____________________。

（3）研究发现，P21基因启动子区合成的RNA能募集一种蛋白至此区域抑制转录过程，当saRNA转入细胞后，经处理并活化，活化的saRNA能与上述RNA结合，使转录过程的抑制作用______________，从而影响P2I基因的表达。由此为癌症的治疗提供了新的思路和方法。

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人体细胞中P21蛋白可抑制细胞的恶性增殖。科研人员发现，与P21基因启动子某段序列互补的RNA分子（saRNA）对P21基因的表达有影响。请分析回答问题：

（1）P21基因控制P21蛋白合成包括________和________两个阶段。

（2）P21基因的启动子有________酶的识别与结合位点，此酶可催化相邻两个核苷酸分子的________之间形成化学键。

（3）研究发现，P21基因启动子合成的RNA能募集一种蛋白至此区域抑制转录过程，当saRNA转入细胞后，经处理并活化，活化的saRNA能与上述RNA结合，使人转录过程的抑制作用________，从而增强P21基因的表达，由此为癌症的治疗提供了新的思路和方法。

（4）脂质体是磷脂分散于水中时形成的具有________层分子结构的球形囊泡，可与细胞膜融合，将物质送入细胞内部。为验证上述科研成果，研究人员将包裹了人工合成的________的脂质体转入人胆囊癌细胞中，同时设置对照，对照组将包裹了________（选填“能”或“不能”）与P21基因启动子某段序列互补的RNA分子的脂质体转入同种细胞。一段时间后，检测P21基因的mRNA生成量及胆囊癌细胞的存活率，结果如下图所示。图示说明，saRNA能显著降低癌细胞存活率的直接原因是________。

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科研人员将荧光素酶基因整合到慢病毒载体，利用载体将荧光素基因导入人淋巴瘤细胞。操作过程中含有以下几个过程：

(1)利用FCR技术扩增荧光素酶基因片段，首先需要设计两种引物，序列分别为(5’－GAACA………AAAAC－3’)和(5’－GAAGT………TCCCC－3’)两种引物的碱基序列分别与___________互补，且引物必须具有一定长度(如15-30个左右碱基)，以确保___________。

(2)切割慢病毒载体DNA，用___________酶将其与荧光素酶基因连接，构建出荧光素酶慢病毒重组载体。用重组载体去感染人淋巴瘤细胞，最终获得能稳定表达荧光素脂的淋巴瘤细胞。对获得的淋巴瘤细胞进行培养，培养温度应为___________，需要的气体主要有O2和CO2，其中CO2的作用是______________________。

(3)通过统计细胞数量，比较含荧光素酶基因的淋巴瘤细胞(甲)和不含荧光素酶基因的淋巴瘤细胞(乙)的生长情况，结果如图(a)，据图可看出这两种细胞生长趋势基本相似，说明___________；再分别取第5、6、7、8、9、10代的含荧光素酶基因的淋巴瘤细胞，加入荧光素酶底物，检测荧光强度，结果如图(b)，说明_______________。

(4)将含荧光素酶基因的淋巴瘤细胞注入裸鼠(无胸腺)体内，通过检测___________，可反映出小鼠体内肿瘤细胞的数量、大小和转移情况。

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科研人员将荧光素酶基因整合到慢病毒载体，利用载体将荧光素酶基因导入人淋巴瘤细胞。操作过程中含有以下几个过程：

（1）利用PCR技术扩增荧光素酶基因片段，首先需要设计两种引物，序列分别为（5'-CAACA·········AAAAC- 3'）和（5' -CAAGT·········TCCCC-3'）。

两种引物的碱基序列分别与_____________互补，且引物必须具有一定长度（如15一30个左右碱基），以确保_______________________。

（2）切割慢病毒载体DNA，用___________酶将其与荧光素酶基因连接，构建出荧光素酶慢病毒重组载体。用重组载体去感染人淋巴瘤细胞，最终获得能稳定表达荧光素酶的淋巴瘤细胞。对获得的淋巴瘤细胞进行培养，培养温度应为_________，需要的气体主要有O2和CO2，其中CO2的作用是__________________。

（3）通过统计细胞数量，比较含荧光素酶基因的淋巴瘤细胞（甲）和不含荧光素酶基因的淋巴瘤细胞（乙）的生长情况，结果如图（a)，据图可看出这两种细胞生长趋势基本相似，说明________________；再分别取第5、6、7、8、9、10代的含荧光素酶基因的淋巴瘤细胞，加人荧光素酶底物，检测荧光强度，结果如图（b），说明____________________。

（4）将含荧光素酶基因的淋巴瘤细胞注入裸鼠（无胸腺）体内，通过检测_________，可反映出小鼠体内肿瘤细胞的数量、大小和转移情况。

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酿酒酵母不能利用木糖制约了利用植物原料生产乙醇的经济效益。木酮糖激酶是木糖转化、利用的关键酶，为提高酵母细胞中木酮糖激酶的表达量，科研人员将两种启动子与木酮糖激酶基因结合并导入酿酒酵母细胞，构建能同时利用葡萄糖和木糖的重组酿酒酵母。下左图表示相关研究过程，右表是几种限制性内切酶的识别序列及切割位点。请回答：

(1)重组质粒中终止子的作用是____。表中切割DNA后形成相同黏性末端的限制性内切酶是____，黏性末端为____。

(2)过程③使用的限制性内切酶是________。过程⑤需先用LiAc处理酿酒酵母细胞，其目的是__________，使细胞处于能吸收环境中DNA的状态。

(3)结合图示分析，进行工程菌筛选时，在含四环素的培养基上长出的菌落不一定是导入重组质粒的酿酒酵母，这是因为____________。

(4)研究人员对筛选得到的两种重组酵母(甲中导入启动子A，乙中导入启动子B)细胞中木酮糖激酶活力及发酵乙醇得率进行比较(发酵条件：1 L 15 g·L－1的葡萄糖和50 g·L－1的木糖培养基中，120 h)结果如下表。

从木酮糖激酶酶活力分析，可以得出的结论是启动子A的功能比启动子B____，但本实验中乙醇得率相差不大，其可能的原因是___________________________________________。

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为了研究视神经病变诱导基因（OPTN）的分子机制，科研人员用OPTN基因的部分DNA片段构建表达载体，导入细胞后转录出的RNA会抑制细胞中OPTN蛋白的合成。实验中使用的DNA片段和载体上限制酶的识别序列如下：

请回答：

（1）应选用BamHⅠ和HindⅢ切割载体质粒，理由是____________。

（2）重组质粒上____________（填“有”或“无”）BamHⅠ的识别序列，因此可通过酶切法鉴定质粒是否重组成功，方法如下：用BamHⅠ和XhoⅠ两种限制酶处理质粒，未重组的质粒将产生____________种片段，重组的质粒将产生____________种片段。

（3）重组质粒导入细胞后，能抑制细胞中OPTN蛋白合成的原因是____________。

（4）要证明导入重组质粒的细胞中OPTN基因的表达受到抑制，需要设置____________作为对照组。通常采用____________法检测细胞中OPTN蛋白的表达水平。

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干扰素（INF）通过与细胞表面相应受体结合，诱导细胞产生抗病毒蛋白而实现其抗病毒作用。科研人员将人的INF受体基因导入小鼠细胞内，在小鼠细胞中高效表达INF受体，从而提高了小鼠对INF的敏感程度，增强了其抗病毒能力。请回答下列问题：

（1）获取INF受体基因时，需要提取人体细胞中的mRNA，再加入______酶合成cDNA。提取人体细胞的mRNA时需要加入RNA酶抑制剂，以避免________。与基因组文库相比，cDNA文库中的____________（填“部分基因”或“全部基因”）可以在不同物种间交流。

（2）利用PCR扩增目的基因时，在DNA双链解开后，要适当降低体系温度，目的是___________。

（3）将含有INF受体基因的重组载体导入小鼠细胞的方法为___________，其受体细胞一般是___________。若要判断INF受体基因是否成功被导入受体细胞，需要利用基因探针进行检测，基因探针指的是____________。

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抗菌肽通常是由短氨基酸序列构成的小分子肽，具有广谱抗菌活性，对病毒和癌细胞都有一定的杀伤力，科研人员将抗菌肽基因导入大肠杆菌细胞内获得了能高效表达抗菌肽的工程菌。请回答下列问题。

（1）利用PCR技术扩增抗菌肽基因时，设计的引物之间不能________，以避免引物自连。反应体系中，使模板DNA解旋的操作方法是________，加入的Taq酶所起的作用是________。

（2）大肠杆菌含有许多蛋白酶，在制备抗菌肽目的基因表达载体时宜选用分泌型载体。分泌型载体能将抗菌肽在信号序列的指引下运出细胞外，使用分泌型载体的突出优点是________。将基因表达载体导入大肠杆菌前，需要用________处理大肠杆菌制备________细胞。

（3）抗菌肽本身对大肠杆菌具有一定的杀伤性，对抗菌肽的分子构造进行改造，可得到对大肠杆菌杀伤性小的抗菌肽，该改造技术直接改造的对象是________。

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第三代疫苗——DNA疫苗是指将编码抗原蛋白的基因插入到适宜的质粒中得到的重组DNA分子，将其导入人体内，在人体细胞内表达的产物可直接诱导机体免疫应答，且可持续一段时间。下列有关DNA疫苗的叙述，正确的是

A．表达产物是抗体          B．基本组成单位是脱氧核苷酸

C．是经改造后的乙肝病毒    D．生产过程不需要DNA连接酶和限制性核酸内切酶

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