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科研人员将荧光素酶基因整合到慢病毒载体，利用载体将荧光素基因导入人淋巴瘤细胞。操作过程中含有以下几个过程：
(1)利用FCR技术扩增荧光素酶基因片段，首先需要设计两种引物，序列分别为(5’－GAACA………AAAAC－3’)和(5’－GAAGT………TCCCC－3’)两种引物的碱基序列分别与___________互补，且引物必须具有一定长度(如15-30个左右碱基)，以确保___________。
(2)切割慢病毒载体DNA，用___________酶将其与荧光素酶基因连接，构建出荧光素酶慢病毒重组载体。用重组载体去感染人淋巴瘤细胞，最终获得能稳定表达荧光素脂的淋巴瘤细胞。对获得的淋巴瘤细胞进行培养，培养温度应为___________，需要的气体主要有O2和CO2，其中CO2的作用是______________________。
(3)通过统计细胞数量，比较含荧光素酶基因的淋巴瘤细胞(甲)和不含荧光素酶基因的淋巴瘤细胞(乙)的生长情况，结果如图(a)，据图可看出这两种细胞生长趋势基本相似，说明___________；再分别取第5、6、7、8、9、10代的含荧光素酶基因的淋巴瘤细胞，加入荧光素酶底物，检测荧光强度，结果如图(b)，说明_______________。
(4)将含荧光素酶基因的淋巴瘤细胞注入裸鼠(无胸腺)体内，通过检测___________，可反映出小鼠体内肿瘤细胞的数量、大小和转移情况。
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科研人员将荧光素酶基因整合到慢病毒载体，利用载体将荧光素酶基因导入人淋巴瘤细胞。操作过程中含有以下几个过程：
（1）利用PCR技术扩增荧光素酶基因片段，首先需要设计两种引物，序列分别为（5'-CAACA·········AAAAC- 3'）和（5' -CAAGT·········TCCCC-3'）。
两种引物的碱基序列分别与_____________互补，且引物必须具有一定长度（如15一30个左右碱基），以确保_______________________。
（2）切割慢病毒载体DNA，用___________酶将其与荧光素酶基因连接，构建出荧光素酶慢病毒重组载体。用重组载体去感染人淋巴瘤细胞，最终获得能稳定表达荧光素酶的淋巴瘤细胞。对获得的淋巴瘤细胞进行培养，培养温度应为_________，需要的气体主要有O2和CO2，其中CO2的作用是__________________。
（3）通过统计细胞数量，比较含荧光素酶基因的淋巴瘤细胞（甲）和不含荧光素酶基因的淋巴瘤细胞（乙）的生长情况，结果如图（a)，据图可看出这两种细胞生长趋势基本相似，说明________________；再分别取第5、6、7、8、9、10代的含荧光素酶基因的淋巴瘤细胞，加人荧光素酶底物，检测荧光强度，结果如图（b），说明____________________。
（4）将含荧光素酶基因的淋巴瘤细胞注入裸鼠（无胸腺）体内，通过检测_________，可反映出小鼠体内肿瘤细胞的数量、大小和转移情况。
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科研人员将红色荧光蛋白基因导入烟草细胞培育转基因烟草，如图①②③为两个红色荧光蛋白基因随机整合在染色体上的三种转基因烟草的体细胞示意图。不考虑交叉互换和突变，下列说法正确的是
A.植株①减数分裂产生的卵细胞中一定不含有红色荧光蛋白基因
B.植株③的一个花粉细胞中至少含有1个红色荧光蛋白基因
C.处于有丝分裂后期时有4条染色体含有红色荧光蛋白基因的细胞来自植株①②③
D.处于减数第二次分裂后期时可能含4个红色荧光蛋白基因的细胞来自植株①和③
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（10分）研究人员利用生物工程技术，探究猪bmp15基因在不同组织细胞中的特异性表达。该工程技术基本流程如下图（EGFP基因控制合成增强型绿色荧光蛋白；过程②表示表达载体2成功导入各组织细胞）。请回答：
（1）过程①中，需利用 限制酶处理表达载体1。
（2）过程②中，常采用 技术将表达载体2成功导入受体细胞。
（3）培养受体细胞时，通常需在培养液中添加一定量的 ，以防污染。
（4）在实验结果的基础上，提取上述猪肌肉细胞的 （mRNA/DNA），利用标记的EGFP基因作探针，进行分子杂交，可进一步探究猪bmp基因特异性表达的原因。
（5）据实验结果推测，猪bmp15基因在 细胞特异性表达。
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科研人员借助恒河猴的抗艾滋病基因对家猫DNA进行改造，同时利用荧光水母的基因培育出抗艾滋荧光猫，以期找到治疗艾滋病的新方法。
（1）通过PCR技术可在体外大量扩增抗艾滋病毒基因。该扩增过程需要的引物实质上是一种_______，需要加入的酶是_______，PCR与体内DNA复制的不同之处主要表现在温度环境，在PCR中先用90℃高温处理的目的是_______，而这一过程在细胞中是通过_______实现的。
（2）抗艾滋荧光猫又称试管动物，其生殖方式属于________。要使得体外受精获得成功，在卵子受精之前要对精子进行________处理。若要在短时间内生产大量的抗艾滋荧光猫，可采用的技术是______，操作时要注意___________。
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内皮素（ET）是一种多肽,主要通过与靶细胞膜上的ET受体（ETA）结合而发挥生物学效应。科研人员通过构建表达载体，实现ETA基因在大肠杆菌细胞中的高效表达，其过程如下图所示，
图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因，限制酶ApaⅠ的识别序列为
，限制酶XhoⅠ的识别序列为
。请据图分析回答：
（1）进行过程①时，需要加入缓冲液、引物、dNTP和___________酶等。完成过程①②③的目的是
___________。
（2）过程③和⑤中，限制酶XhoⅠ切割DNA，使___________键断开，形成的黏性末端是___________。
（3）构建的重组表达载体，目的基因上游的启动子是___________的部位，进而可驱动基因的转录。除图中已标出的结构外，基因表达载体还应具有的结构是___________。
（4）过程⑥要用CaCl2预先处理大肠杆菌，使其成为容易吸收外界DNA的___________细胞。
（5）将SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因，其目的是有利于检测___________。
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肉皮素（ET）是一种多肽，主要通过与靶细胞膜上的ET受体（ETA）结合而发挥生物学效应。科研人员通过构建表达载体，实现ETA基因在大肠杆菌细胞中的高效表达，其过程如下图所示，图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因，限制酶ApaI的识别序列为
，限制酶XhoI的识别序列为
。请据图分析回答：
（1）进行过程①时，需要加入缓冲液、引物、dNTP和 酶等。完成过程①②③的目的是 __________。
（2）过程③和⑤中，限制酶XhoI切割DNA,使 键断开，形成的黏性末端是_________。
（3）构建的重组表达载体，目的基因上游的启动子是 的部位，进而可驱动基因的转录。除图中已标出的结构外，基因表达载体还应具有的结构是 。
（4）过程⑥要CaCl2预先处理大肠杆菌，使其成为容易吸收外界DNA的 细胞。
（5）将SNAP基因表达的产物是一种荧光蛋白，将与ETA基因结合构成融合基因，其目的是有利于检测 。
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（15 分） 科研人员将绿色荧光蛋白（GTP）基因导入金鱼的受精卵中进行有关研究，请回答：
（1）上述过程中的 GTP 基因称为 , 该基因可由 mRNA 形成。
（2）已知 GTP 基因的 DNA 两端分别有 EcoR I、Sma I切割位点，切割下来的 GTP 基因含有 末端和 末端。
（3）质粒用 EcoR I、Sma I 切割之后，需用 将 GTP 基因与其连接形成重组质粒。
（4）GTP 基因重组质粒导入受精卵通常用 法，受精卵经过卵裂、桑椹胚、 、原肠胚等阶段发育为胚 胎。紫外光下观 察，可以看到转基因鱼发光部位存在差 异，其原因是 。
（5）构建重组质粒时，可用 GTP 代替抗氨苄青霉素基因作为 。
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科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗。在该操作过程中会用到基因工程、核移植、早期胚胎培养等技术。据此回答以下相关问题：
（1）基因治疗是把正常基因导入病人体内，使该基因的________发挥功能，从而达到治疗疾病的目的。目前，___（填“体内基因治疗”或“体外基因治疗”或“体内和体外基因治疗”）处于初期的临床试验阶段。
（2）核移植：取干扰素基因缺失小鼠的上皮细胞的细胞核，移植到去核卵母细胞中，得到________；在去除卵母细胞的细胞核时，可用微型吸管把位于________之间的第一极体一并吸出。
（3）早期胚胎培养得到ES细胞：ES细胞具有胚胎细胞的特性，在功能上，具有__________，即可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞。ES细胞在________上，或在添加抑制因子的培养液中，能够维持不分化的状态。
（4）将目的基因导入ES细胞：构建__________ ，再采用 ________（填仪器名称）进行显微注射，将其导入ES细胞。
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科研人员将某种荧光蛋白(GFP)基因导入金鱼的受精卵中来进行有关研究，请回答：
（1）以上过程的GFP基因称为______基因，该基因可由mRNA________形成。
（2）已知含GFP基因的DNA两端分别有EcoRI 与 SmaI切割位点，切割下来的GFP基因含有____末端和______末端。
（3）质粒用EcoRI、SmaI切割之后，需用___________酶将GFP基因与其连接形成重组质粒。
（4）构建重组质粒时，可用GFP基因代替抗氨苄青霉素基因作为_____________。
（5）GFP基因重组质粒导入受精卵通常用__________法，受精卵经过卵裂、桑堪胚、______、原肠胚等阶段发育为胚胎。紫外光下观察，可以看到转基因鱼发出荧光的部位存在差异，其原因是_________________________。
，限制酶XhoⅠ的识别序列为
。请据图分析回答：
，限制酶XhoI的识别序列为
。请据图分析回答：