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大肠杆菌是寄生于人肠道内的一种细菌,其代谢产物能与染料伊红美蓝反应而使菌落呈紫黑色。测定水样是否符合饮用水的卫生标准,常用滤膜法测定大肠杆菌的总数。滤膜法的大致流程如下图1所示。请回答下列问题:

(1)据题意分析,图中培养基除了加入水、碳源、氮源和无机盐为大肠杆菌生长繁殖提供营养物质外,还需添加_______________和伊红美蓝。

(2)获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌入侵,本实验中所使用的培养皿等玻璃器皿的常用灭菌方法有_____________。

(3)在无菌操作条件下,将10 mL待测水样加入到90 mL无菌水中,稀释后的菌液通过滤膜法测得伊红美蓝培养基上的菌落数平均为124个,紫黑色菌落数平均为29个,推测1L待测水样中的大肠杆菌总数约为____________个。

(4)若饮用水中大肠杆菌超标,可引发多种感染。为了研究不同浓度的甲抗生素对A、B两种大肠杆菌的抑菌效果,做如下实验。  

I.取稀释后的A、B两种大肠杆菌菌液少许,分别与溶化并冷却至45℃左右的培养基混匀后倒平板各5个;

II.待平板凝固后,在每个平板中央的培养基里各打一个直径为3mm的孔,并在孔中分别加入不同浓度的甲抗生素

III.在适宜条件下培养一段时间,可在孔的周围观察到一圈清晰区,按图2所示测量清晰区的直径,数据如下表。

甲抗生素浓度/µg/mL

5.0

7.5

10.0

15.0

20.0

清晰区直径/mm

A大肠杆菌

5

8

13

17

B大肠杆菌

5

7

9

14

19

①由表1数据可知,甲抗生素对A、B大肠杆菌的增长都有抑制作用,但_______大肠杆菌对甲抗生素敏感性较强。判断依据是_____________。

②为了更准确地说明清晰区的出现是因为甲抗生素的作用,本实验还需增设一组在上述平板孔内加入 _____________作为对照。

③本实验需将上述接种后的平板与_______________在相同条件下培养,以检查培养基灭菌是否合格以及培养过程中是否受到杂菌污染。

高二生物实验题困难题

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