下面是某同学制作果酒和果醋的实验流程图以及分离土壤中能分解尿素的细菌的培养基配方。请回答有...

下面是某同学制作果酒和果醋的实验流程图以及分离土壤中能分解尿素的细菌的培养基配方。请回答有关问题：

预分离土壤中能分解尿素的细菌的培养基配方

（1）图中方框内应该填写的实验步骤是___________，此步骤中起主要作用的微生物是___________，其发酵时___________（填“需要”或“不需要”）氧气，适宜的发酵温度范围是___________。

（2）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？___________（填“能”或“不能”），原因是_________________________________。

（3）如果想进一步对初步筛选得到的菌株进行纯化并计数，可采用的接种方法是_________________。通常鉴定分解尿素的细菌的方法是在培养基中加入___________指示剂。

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[生物——选修1：生物技术实践专题]（15分）

下面是某同学制作果酒和果醋的实验流程图以及预分离土壤中能分解尿素的细菌的培养基配方，请回答有关问题。

（1）图1中方框内应该填写的的实验步骤是　　　　　　 ，此步骤中起主要作用的微生物是　　　　 ，其发

酵时　　　 （需要／不需要）氧气，适宜的发酵温度范围是　　　 。　

（2）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？　　　　　　 (能/不能)，原因

是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（3）如果想进一步对初步筛选得到的菌株进行纯化并计数，可采用的接种方法是　　 。通常鉴定分

解尿素的细菌的方法是在培养基中加入　　　　 指示剂。

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【选修1——生物技术实践】尿素是一种高浓度氮肥，通过土壤中某些细菌分解为氨后,被植物吸收利用。某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下：

（1）根据培养基的成分分析，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？____(填“能”或“不能”），原因是____。在接种前需要检测培养基灭菌是否彻底，常用的检测方法是____。

（2）要统计每克土壤样品中活菌数目，最好采用____法接种。某同学取稀释倍数为105倍的菌液0.1ml接种后，测得平板上菌落数为156、178和191，则每毫升样品中的菌落数为____。

（3）某同学在分离纯化土壤中分解尿素的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，可能的原因是____，为避免此种现象发生，正确的操作方法是____。

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尿素是一种高浓度氮肥，通过土壤中某些细菌分解为氨后,被植物吸收利用。某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下：

（1）根据培养基的成分分析，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？_____(填“能”或“不能”），原因是_____。在接种前需要检测培养基灭菌是否彻底，常用的检测方法是_____。

（2）要统计每克土壤样品中活菌数目，最好采用_____法接种。某同学取稀释倍数为105倍的菌液0.1ml接种后，测得平板上菌落数为156、178和191，则每毫升样品中的菌落数为_____。

（3）某同学在分离纯化土壤中分解尿素的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，可能的原因是_____，为避免此种现象发生，正确的操作方法是_____。

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某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计单位体积内的活菌数目。按照培养基的配方称取，并将各种物质溶解后，用蒸馏水定容、灭菌，制成固体培养基备用。回答问题：

（1）在配制培养基时，需加入___________作为唯一的氮源，该培养基从功能上看属于________培养基，配制好的培养基应用_____________法灭菌。

（2）培养分解尿素的细菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是

____________________________________________。

（3）若要统计土壤样品中尿素分解菌的数目，宜采用____________法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的菌落数目就能大约推测出样品中的活菌数。一同学在稀释倍数为104的培养基中测得平板上菌落数的平均值为24.6，则每毫升样品中的活菌数是（所用稀释液的体积为0.2mL）

___________________________________________。

（4）实验中使用过的培养基及其培养物必须经过____________处理后才能丢弃，以防止微生物的扩散。

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某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计单位体积内的活菌数目。按照培养基的配方称取，并将各种物质溶解后，用蒸馏水定容、灭菌，制成固体培养基备用。回答问题：

（1）在配制培养基时，需加入___________作为唯一的氮源，该培养基从功能上看属于________培养基，配制好的培养基应用_____________法灭菌。

（2）培养分解尿素的细菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是

____________________________________________。

（3）若要统计土壤样品中尿素分解菌的数目，宜采用____________法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的菌落数目就能大约推测出样品中的活菌数。一同学在稀释倍数为104的培养基中测得平板上菌落数的平均值为24.6，则每毫升样品中的活菌数是（所用稀释液的体积为0.2mL）

___________________________________________。

（4）实验中使用过的培养基及其培养物必须经过____________处理后才能丢弃，以防止微生物的扩散。

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下表是某同学列出的分离土壤中微生物培养基的配方，据此回答下列问题：

（1）从作用上看，该培养基属于　　 养基，提供氮源的物质是　　 ，细菌能利用该氮源是由于体内能合成　　 酶。

（2）在对分离的能分解尿素的细菌进行鉴定时，还需在培养基中加入　　 指示剂，若指示剂变　　 ，说明有目的菌株存在。

（3）为了测定微生物的数量，接种时应采用　　 法，某同学在4个培养基上分别接种稀释倍数为106的土壤样液0.1mL，培养后菌落数分别为180、155、176、129个，则每毫升原土壤样液中上述微生物的数量为　　 ，测定的活菌数比实际活菌数　　 （填“低”“高”“基本一致”）。

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下表是某同学列出的分离并计数土壤中微生物培养基的配方，据此回答下列问题：

（1）制备培养基时，将上述物质溶解并用蒸馏水定容至1000mL后，还要进行　　　　　　 和　　　　　　　 。

（2）从功能上看，该培养基属于　　　　　　 培养基，细菌能利用培养基中的氮源是由于能合成　　　　　　 。

（3）用稀释涂布平板法统计样本菌落数时，　　　　　　 （需要/不需要）设置对照组（即不接种进行培养），原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（4）某同学在3个培养基上分别涂布稀释倍数为106的土壤样液0．1mL，培养一段时间后，其菌落数分别为180、220、320个，则每毫升原土壤样液中上述微生物的数量为　　　　　　 ，此方法测定的活菌数比实际活菌数少的原因为　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

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下表是某同学列出的分离土壤中微生物的培养基配方，据此回答下列问题：

将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL

（1）从作用上看，该培养基属于________________培养基，提供氮源的物质是__________，细菌能利用该氮源是由于体内能合成__________酶。

（2）在对分离的能分解尿素的细菌进行鉴定时，还需在培养基中加入__________指示剂，若指示剂变__________， 说明有目的菌株存在。

（3）为了测定微生物的数量，接种时应采用__________法，某同学在4个培养基上分别接种稀释倍数为106 的土壤样液0.1 mL，培养后菌落数分别为180、155、176、129个，则每升原土壤样液中上述微生物的数 量为__________个，测定的活菌数比实际活菌数__________（填“低”“高”或“基本一致”）。

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尿素是一种高浓度氮肥且长期施用没有不良影响，但尿素只有通过土壤中某些细菌的分解作用，才能被植物吸收利用．某同学要分离出土壤中能分解尿素的细菌，并尝试进行计数，培养基配方如下：

K2HPO4　　 NaCl　　 H2O　　 葡萄糖　　 尿素　　 酚红　　 琼脂

0.12g　　 0.12g　　 15mL　　 0.025g　　 2.0g　　 0.25mg　　 0.5g

（1）分解尿素的细菌都能合成 脲酶 ，该种细菌在生态平衡中起到什么作用？ 参与了氮循环（或维持氮平衡） ．写出细菌分解尿素的方程式 ．

（2）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？ 不能 （能/不能），原因是 琼脂是未被纯化的混合物，内含一定的含氮化合物，尿素不是唯一氮源，不能选择出只以尿素为氮源的微生物 ．

（3）分离得到分解尿素的细菌后，如果要扩大培养，则应选择 培养基进行培养．培养一段时间后，使用 对微生物细胞进行计数．计数过程中，下列哪种行为会影响计数的准确性 A

A．计数时直接从静置培养的试管底部取培养液进行计数

B．如果方格内微生物细胞数量多于300 个，培养液先稀释后再计数

C．如果微生物细胞有粘连，要数出团块中的每一个细胞

D．压在方格线上的细胞只计左线和上线上的细胞数

（4）为了提高尿素肥效，可以将分解尿素的酶和尿素混合，制成“加酶尿素”．为了提高“加酶尿素”中酶的利用率，可采用 固定化酶 技术．

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