土壤中的某些微生物能合成脲酶，从而分解尿素，可用含有KH2P04、Na2HPO4、MgSO...

土壤中的某些微生物能合成脲酶，从而分解尿素，可用含有KH₂P0₄、Na₂HPO₄、MgSO₄.葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水的培养基分离上述微生物。有关叙述正确的是

A. 该培养基灭菌后还应调节pH才能接种

B. 可用该培养基研究微生物的群体生长规律

C. 要提高脲酶的活性，应修饰的部位在腺酶基因的非编码区

D. 能在该培养基上生长的微生物自身能合成生长因子

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（13分）微生物与人类关系密切，请分析有关的资料并回答问题：

表1：A培养基配方

表2：B培养基配方

（1）A培养基中氮源物质是________ ，B培养基中属于碳源的是______。据B培养基的成分，所培养微生物的同化作用类型是 ________ 。

（2）依物理性质划分，A培养基属于________培养基。如果要分离土壤中能分解尿素的细菌，应选择上述________种培养基，该培养基能分离该菌的原因是 ________。

（3）制备培养基的基本操作步骤是                                       （        ）

a．倒置培养基             b．计算                       c．溶化                       d．称量            e．灭菌   f．调PH值

A．a→b→c→d→f→e                                 B．e→b→d→f→c→a

C．b→d→f→c→a→e                                      D．b→d→c→f→e→a

（4）通常培养基采用 ________ 法灭菌，原因是 ________ 。在制备固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，应将平板倒过来放置，这样做的目的是 ________。

（5）培养微生物时，接种方法有多种，常用的除了涂布法，还有 ________法、________法。将接种环在火焰上灼烧并冷却后才能接种的原因是 ________ 。

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为了从土壤中分离获得尿素分解菌的单菌落，某同学设计了A、B两种培养基其成分如下表所示。请回答下列相关问题：

注：“＋”表示有，“－”表示无

（1）培养基中的葡萄糖能为细菌的生长繁殖提供___________和___________，通常情况下，制备培养基时要根据所培养微生物的不同来调节培养基的pH，其原因是______________________。

（2）据表判断，培养基A___________（填“能”或“不能”）用于分离获得尿素分解菌的单菌落，原因是___________；培养基B不能用于分离尿素分解菌，原因是______________________。

（3）若要统计样品中活菌的数目，可选用___________法进行计数。

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下面是某同学制作果酒和果醋的实验流程图以及分离土壤中能分解尿素的细菌的培养基配方。请回答有关问题：

预分离土壤中能分解尿素的细菌的培养基配方

（1）图中方框内应该填写的实验步骤是___________，此步骤中起主要作用的微生物是___________，其发酵时___________（填“需要”或“不需要”）氧气，适宜的发酵温度范围是___________。

（2）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？___________（填“能”或“不能”），原因是_________________________________。

（3）如果想进一步对初步筛选得到的菌株进行纯化并计数，可采用的接种方法是_________________。通常鉴定分解尿素的细菌的方法是在培养基中加入___________指示剂。

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下表是某同学列出的分离并计数土壤中微生物培养基的配方，据此回答下列问题：

（1）制备培养基时，将上述物质溶解并用蒸馏水定容至1000mL后，还要进行　　　　　　 和　　　　　　　 。

（2）从功能上看，该培养基属于　　　　　　 培养基，细菌能利用培养基中的氮源是由于能合成　　　　　　 。

（3）用稀释涂布平板法统计样本菌落数时，　　　　　　 （需要/不需要）设置对照组（即不接种进行培养），原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（4）某同学在3个培养基上分别涂布稀释倍数为106的土壤样液0．1mL，培养一段时间后，其菌落数分别为180、220、320个，则每毫升原土壤样液中上述微生物的数量为　　　　　　 ，此方法测定的活菌数比实际活菌数少的原因为　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

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请回答下列有关尿素分解菌的筛选和计数的问题：

（1）从土壤中分离尿素分解菌时，所用培养基应以____________作为唯一氮源。该培养基中含有KH2P04和Na2HP04，其作用有____________（答出两点即可）。对该培养基进行灭菌的常用方法为____________。

（2）在培养基中加入 ____________指示剂可用来鉴定尿素分解菌，原理是尿素分解菌能合成和分泌____________，将尿素分解成氨而使周围环境的pH上升，从而使该指示剂变色。

（3）若要检测土样中的尿素分解菌含量，应采用____________法接种。若实验时取0.1mL稀释液接种，发现稀释倍数为104的5个平板上，长出的菌落数分别为9、147、150、153和360，则每升土壤样液中的细菌数量为____________个。

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生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，为从土壤中微生物筛选到能分解尿素的细菌。培养基成分如下表所示，实验步骤如图1所示。回答下列问题

（1）分解尿素的细菌能分泌________酶，能将尿素分解成__________。

（2）培养基中为“目的菌”生长提供氮源和碳源的物质分别来自________和_________。为了满足图示锥形瓶中目的菌对氧气的需求，在培养时应采用的操作方法是_______________________________。

（3）图中将细菌转到固体培养基上时，应采用________法接种以获得单个菌落。初步筛选出来的菌种还需要用生化的方法作进一步的鉴定，鉴定方法是检测初步筛选目的菌种培养基的pH，若pH_______（降低/不变/升高），说明该菌种能够分解尿素。

（4）A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。有同学认为造成A同学实验结果的原因是培养基被杂菌污染。为了证实该说法，则进一步实验的操作思路是________________。

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下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是

A．KH2P04、Na2HP04、MgS04．7H20、葡萄糖、尿素、琼脂、水

B．KH2P04、Na2HPO4 、MgS04．7H20、葡萄糖、琼脂、水

G．KH2P04、Na2HPO4 、MgS04．7H20、尿素、琼脂、水

D．KH2P04、Na2HPO4 、MgS04．7H20、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水

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某同学做“微生物的分离与培养”实验，所配制的培养基配方如下表所示，相关叙述错误的是（　　 ）

A.该培养基为选择培养基，可用于分离尿素分解菌

B.若要对培养的微生物进行计数，接种时可采用稀释涂布平板法或平板划线法

C.对分离出的细菌进行鉴定时，可在培养基中加入刚果红，若pH升高，指示剂变红

D.利用该培养基分离得到的细菌能合成葡萄糖苷酶，将葡萄糖分解获取能量

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下列是与微生物培养有关的问题，请回答：

（1）某细菌固体培养基的组成成分是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水，其中凝固剂是　　　　　　　 ，碳源是　　　　　　　 ，氮源是　　　　　　　 。已知只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长，故该培养基属于　　　　　　 培养基。按照化学成分分类，该培养基属于　　　　　　 培养基。

（2）将少量细菌接种到一定体积的液体培养基中，适宜条件下培养，定时取样测定菌体数目，以时间为横坐标，以细菌数目的对数为纵坐标，可得到细菌的　　　　　　　 曲线。该曲线中以菌体数目的对数作为纵坐标的原因是　　　　　　　 。实验室中，为了获得形态和生理特征一致的菌体，一般应在　　　　　　　 期取材。

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