研究发现，利用抗体抑制肿瘤细胞表面的CD47蛋白的活性，可促进巨噬细胞吞噬肿瘤细胞。为制备...

研究发现，利用抗体抑制肿瘤细胞表面的CD47蛋白的活性，可促进巨噬细胞吞噬肿瘤细胞。为制备抗CD47抗体，研究人员先利用基因工程方式制备CD47蛋白，图为含CD47基因的外源DNA、质粒DNA的有关信息， EcoRI、BamHI、SalI、XhoI 均为限制酶，Kanr、Tcr分别为卡那霉素抗性基因、四环素抗性基因。

（1）为了形成合适的重组质粒，应该选用限制酶________切割外源DNA和质粒DNA。

A．EcoRI和XhoI　　 B．BamHI和XhoI

C．EcoRI和SalI　　 D．BamHI和SalI

（2）重组质粒导入大肠杆菌的成功率很低，需经筛选才能获得导入成功的大肠杆菌，以下菌种为所需菌种的是________。

A．能在含卡那霉素的培养基上生长的菌种

B．能在含四环素的培养基上生长的菌种

C．能在含卡那霉素的培养基上生长、而不能在含四环素的培养基上生长的菌种

D．能在含四环素的培养基上生长、而不能在含卡那霉素的培养基上生长的菌种

下图为制备抗CD47单克隆抗体的过程示意图，A、B、C 表示细胞，①、②表示过程。

（3）给小鼠注射的抗原物质是________________，该物质被小鼠的免疫细胞识别，引起下列四项中的________过程，形成细胞A。

A．天然免疫　　 B．非特异性免疫　　 C．细胞免疫　　 D．体液免疫

（4）过程①表示________________过程，形成的细胞C称为________________。过程②表示用________________技术获得大量细胞。共同培养巨噬细胞和癌细胞，加入不同浓度的抗CD47抗体，测定巨噬细胞吞噬癌细胞的吞噬系数，得到了如图所示的结果。

（5）结合图及题干信息分析，以下描述正确的是________（多选）。

A．癌细胞表面的CD47蛋白能影响巨噬细胞吞噬癌细胞

B．较高浓度的抗CD47抗体有利于巨噬细胞吞噬癌细胞

C．使用抗CD47抗体治疗癌症需要严格控制抗体的浓度

D．抗CD47抗体能有效抑制癌细胞的增殖达到治疗目的

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癌细胞表面蛋白“PDL﹣1”与T细胞表面蛋白“PD﹣1”特异性结合后，可抑制T细胞活性并启动其凋亡，导致肿瘤细胞发生免疫“逃逸”。研究者对“PD﹣1”基因进行克隆、表达及生物学活性鉴定，为制备抗体打基础。研究中所用引物α和β碱基序列见图1、几种常用限制酶名称及识别序列与酶切位点见图2：

（1）首先提取细胞中的mRNA反转录生成_____作为模板：设计含有不同的限制酶切点的α和β序列为引物，通过_____技术扩增目的基因。

（2）选用图1中的两种名称分别为_____的限制酶将“pIRES2﹣EGFP质粒”载体进行双切，再用DNA连接酶将其与目的基因拼接，构建表达载体。该表达载体的组成，除了目的基因、标记基因抗卡那霉素基因外，还必须具有_____等

（3）而后一定温度下，与经过Ca2+处理的感受态大肠杆菌混合培养在含有_____培养基中，可筛选出已经完成转化的大肠杆菌，继续培养该种大肠杆菌以扩增重组DNA。

（4）将扩增后的“pIRES2﹣EGFP载体/PD﹣1重组DNA”转入可高度表达外源基因的原代293T细胞。一段时间后，为确定PD﹣1基因是否表达，检测细胞膜表面是否具有_____。为判断其是否具有生物学活性和功能，则可裂解293T细胞，提取该物质看能否与_____发生结合，从而阻断“PD﹣1与PDL﹣1信号通路”。研究中还会有一步骤，只将“pIRES2﹣EGFP载体”转入293T细胞，其目的是_____。

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经研究表明，在多种肿瘤细胞中的TOP2A蛋白大量表达，因此成为抗肿瘤的研究靶点，某科研单位制作了TOP2A蛋白的单克隆抗体。请回答：

(1)利用基因工程制备TOP2A蛋白：将TOP2A蛋白基因和质粒用___________处理并连接成重组质粒，然后导入经_________处理的大肠杆菌，并将大肠杆菌接种到含氨苄青霉素的LB液体培养基中培养，经离心得到菌体，破碎提纯得到TOP2A蛋白。

(2)TOP2A蛋白单克隆抗体的制备:将TOP2A蛋白反复多次注射到小鼠体内，使其发生_________，取经过免疫的小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞在物质_________介导下发生细胞融合，形成杂交瘤细胞。并将各杂交瘤细胞单独分装培养，经筛选、___________后，获得能产生单一抗体的__________

A.连续细胞系B.有限细胞系C.连续细胞株D.有限细胞株

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研究发现，癌细胞表面的PD﹣L1蛋白质可与T细胞表面的PD﹣1蛋白结合，导致T细胞不能全面启动对癌细胞的免疫攻击。通过临床实验证明，使用抗PD﹣1抗体可使癌症患者的肿瘤快速萎缩，这种使用抗PD﹣1抗体治疗癌症的方法叫做癌症免疫疗法。下列与此相关的叙述正确的是

A. 抗PD﹣1抗体可直接杀死癌细胞

B. 癌症免疫疗法是通过体液免疫发挥作用的

C. 抗PD﹣1抗体作用于T细胞而不作用于癌细胞

D. 人体所有的细胞都有PD﹣1基因，并都会表达

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研究发现，癌细胞表面的PD﹣L1蛋白质可与T细胞表面的PD﹣1蛋白结合，导致T细胞不能全面启动对癌细胞的免疫攻击．通过临床实验证明，使用抗PD﹣1抗体可使癌症患者的肿瘤快速萎缩，这种使用抗PD﹣1抗体治疗癌症的方法叫做癌症免疫疗法。下列与此相关的叙述正确的是

A．抗PD﹣1抗体可直接杀死癌细胞

B．癌症免疫疗法是通过体液免疫发挥作用的

C．抗PD﹣1抗体作用于T细胞而不作用于癌细胞

D．PD﹣L1蛋白和PD﹣1蛋白均可与抗PD﹣1抗体结合

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研究发现：免疫细胞释放的MIF分子能抑制表皮生长因子受体蛋白（EGFR）的活性；EGFR的激活能够促进多种肿瘤的增长；癌细胞能释放降解MIF分子的酶MMP13。下列相关叙述正确的是（　　　 ）

A．免疫细胞通过释放MIF分子来实现相应的免疫功能

B．MIF分子通过抑制表皮生长因子的活性，进而抑制肿瘤的增长

C．癌细胞能释放酶MMP13，是其易扩散和转移的主要原因

D．癌细胞被患者服用的抗癌药物杀死属于细胞凋亡

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研究发现：免疫细胞释放的MIF分子能抑制表皮生长因子受体蛋白(EGFR)的活性；EGFR的激活能够促进多种肿瘤的增长；癌细胞能释放降解MIF分子的酶MMP13。下列相关叙述正确的是

A．免疫细胞通过释放MIF分子来实现相应的防卫功能

B．MIF分子通过抑制表皮生长因子的活性，进而抑制肿瘤的增长

C．癌细胞能释放酶MMP13，是其易扩散和转移的主要原因

D．癌细胞被患者服用的抗癌药物杀死属于细胞凋亡

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研究发现，癌细胞表面的 PD-L1 蛋白可与 T 细胞表面的 PD-1 蛋白结合，导致 T 细胞不能全面启动对癌细胞的免疫攻击，使用抗 PD-1 抗体可使癌症患者的肿瘤快速萎缩。叙述正确的是（　　 ）

A.癌细胞的清除体现了免疫系统的监控和清除功能

B.PD-L1 蛋白和 PD-1 蛋白结合，这体现了细胞膜的选择透过功能

C.PD-L1 蛋白和 PD-1 蛋白均可与抗 PD-1 抗体结合

D.癌症患者体内的 PD-1 蛋白表达不足会降低机体细胞免疫的能力

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研究发现T细胞表面的PD-1和癌细胞表面的PD-L1结合后，T细胞的活性会受到抑制，使其无法识别癌细胞，导致癌细胞的免疫逃逸。来那度胺是一种新型免疫调节剂，临床用于肿瘤的治疗。研究人员利用HepG2细胞（一种肝癌细胞）对来那度胺的作用机理进行了相关研究。下列说法错误的是（　　 ）

A.HepG2细胞中的遗传物质可能受到损伤，细胞的增殖失去控制

B.当体内出现癌细胞时，机体主要通过细胞免疫发挥免疫防卫功能

C.HepG2细胞表面的糖蛋白减少，其细胞中可能发生多个基因突变

D.来那度胺可能减少了PD-1和PD-L1的结合进而增强了T细胞的活性

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研究发现，癌细胞能够分泌F蛋白，F蛋白与T细胞表面的L蛋白结合后，抑制T细胞活化。下列相关叙述不正确的是（　　 ）

A.提高体内L蛋白基因表达量能预防肿瘤发生

B.阻断F蛋白与L蛋白结合可恢复T细胞的活性

C.T细胞增殖分化成的效应T细胞可裂解癌细胞

D.L蛋白的单克隆抗体可能作为肿瘤治疗的药物

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