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生物技术实践模块（10分）
请在标有序号的空白处填空，并将序号及相应答案写在答题纸上。
（1）在工业生产中，为提高酶的使用效率和产品纯度，一般需要将酶进行固定化处理。利用石英砂固定α-淀粉酶的方法属于________①________
A．吸附法 B． 偶联法 C． 交联法 D．包埋法
（2）一定浓度的淀粉溶液流过α-淀粉酶固化柱后，被水解成________②________，遇碘显________③________色。
（3）α-淀粉酶可以通过枯草杆菌发酵生产，以下是利用诱变育种方法培育获得产生较多淀粉酶的菌株的主要实验步骤。
（原理：菌株生长过程可释放淀粉酶分解培养基中的淀粉，在菌落周围形成透明圈。）
第一步：将枯草杆菌株接种到________④________培养基上进行扩大培养。
第二步：将枯草杆菌株分成两组，A组用________⑤________处理，B组不处理（作对照）。
第三步：制备多个含淀粉的固体培养基。
第四步：将A、B组分别稀释后，分别在含淀粉的固体培养基上利用________⑥________法分离，适宜条件下培养得到单菌落。
第五步：观察A、B组各菌落周围的________⑦________。
实验结果预期：
根据诱发突变率低的特点，预期________⑧________。
根据诱发突变不定向性的特点，预期________⑨________。
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【生物—选修模块1：生物技术实践】
请回答与微生物分离和培养有关的问题:
（1）稀释涂布平板法分离纯化土壤中微生物的正确操作步骤是___________（填序号）。为减少误差，在设置平板是一般要______或以上数目平板；若统计出在稀释倍数为105的平板上的平均菌落数为30个，所用稀释液的体积为0．2ml，则每克样品中的菌落数为_______________。
①土壤取样
②称取10g土壤加入盛有90ml无菌水的锥形瓶中制备土壤提取液
③吸取0．1ml溶液进行涂布平板
④依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度
（2）无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。其中对培养基和培养皿进行灭菌的常用方法分别是___________、__________；要求实验操作应在_____________进行，以避免周围环境中微生物的污染。
（3）要从富含纤维素的环境中分离纤维素分解菌，而寻找耐热菌要从高温热泉中，这说明寻找目的菌的方法是：______________。
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【生物——选修模块1：生物技术实践】（15分）
（1）传统发酵技术应用十分广泛，果酒和果醋就是常见例子。当发酵装置由果酒酿造转为果醋酿造时，首先要提高__________，并注意适时通过充气口__________。
（2）菊花的组织培养，一般选择__________（开花/未开花）植株的茎上部新萌生的侧枝；一般将pH控制在__________左右，温度控制在18至22℃，并每天光照12h。植物激素中，生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、__________和__________的关键性激素。
（3）植物芳香油的提取方法有蒸馏、压榨和萃取等，柑橘芳香油的制备通常使用__________法。为提高出油率，需要将柑橘皮干燥去水，并用__________浸泡。
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（15分）（选修模块1：生物技术实践）
在啤酒生产过程中，发酵是重要环节。生产过程大致如下：将经过灭菌的麦芽汁充氧，接入啤酒酵母菌菌种后输入发酵罐。初期，酵母菌迅速繁殖，糖度下降，酒精浓度渐渐上升，泡沫不断增多。当糖度下降到一定程度后，结束发酵。最后分别输出有形物质和啤酒。根据上述过程，回答以下问题：
（1）该过程表明啤酒酵母异化作用的特点是 。
（2）初期，酵母菌迅速繁殖的主要方式是 。
（3）酒精主要是啤酒酵母菌进行 作用产生的代谢产物。
（4）经测定酵母菌消耗的糖中，98.5%形成了酒精和其它发酵产物。其余1.5%则用于 。
（5）请写出由麦芽糖→葡萄糖→酒精的反应方程式。
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【生物——选修模块1：生物技术实践专题】发酵法生产酒精后的废液(pH 4.3)含有大量有机物，可用于培养、获得白地霉菌体，生产高蛋白饲料。培养、制取白地霉菌体的实验过程示意图：
请据图分析回答问题：
(1)实验过程中培养白地霉的培养基是________。培养基定量分装前，先调节________，分装后用棉塞封瓶口，最后________处理。
(2)图中①过程称为________，从甲到乙的培养过程是为了____________。白地霉的代谢类型为____________。
(3)为确定菌体产量，图中②操作之前，应先称量__________________的质量。过滤后需反复烘干称量，直至__________________。所获菌体干重等于______________________。
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[生物—选修模块1：生物技术实践]（15分）
Ⅰ．纤维素酶的成本能否下降，是能否实现乙醇工业化生产的关键因素。纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取。某同学设计了如下分离土壤中纤维素分解菌的实验流程：土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养。
①培养纤维素酶分解菌的土样最好选择在 环境采集。
②以下是一种培养基配方：纤维素5g、NaNO31g、Na2HPO4·7H20 1．2g、KH2PO40．9 g、MgSO4·7H2O 0．5g、KCl 0．5g、酵母膏0．5 g、水解酪素0．5g（蒸馏水定容到1000mL）。该培养基能够增加样品中纤维素分解菌的浓度，其原理是 。
③为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，可以在鉴别培养基上加入刚果红染液，将筛选获得的菌液稀释后用 方法接种到鉴别培养基上，然后挑选产生透明圈的菌落作为菌种进行扩大培养。
Ⅱ．回答下列与芳香油提取相关的问题：
（1）玫瑰精油适合用水蒸气蒸馏法提取，其理由是玫瑰精油具有 的性质。蒸馏时收集的蒸馏液不是纯的玫瑰精油，原因是 。
（2）当蒸馏瓶中的水和原料量一定时，蒸馏过程中，影响精油提取量的主要因素有蒸馏时间和 。当原料量等其他条件一定时，提取量随蒸馏时间的变化趋势是 。
（3）如果蒸馏过程中不进行冷却，则精油提取量会 。
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[生物—选修模块1 生物技术实践]
生物组织中有机物的提取方法有很多种。例如，凝胶色谱法、电泳、蒸馏、压榨法和萃取等，不同的有机物提取的方法各有不同。
（1）玫瑰精油称为“液体黄金”，是世界香料工业不可取代的原料，提取出的玫瑰精油要求不含有任何添加剂或化学原料，其提取方法主要是 。
（2）杏仁油富含矿物质和维生素，是一种质地轻柔、高渗透性的保湿剂，主要通过________法提取。
（3）用萃取法提取胡萝卜素，萃取的效率主要取决于________；新鲜的胡萝卜在干燥时，如果温度太高，会导致________。
（4）在胡萝卜素的提取实验中，在瓶口安装冷凝回流装置是为了________。
（5）在影响萃取的各种因素中，原料颗粒的________、________和________，萃取的和________等因素，对萃取效果均有很大的影响。
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（2013•辽宁二模）[生物﹣﹣选修l生物技术实践]
下列是对土壤微生物开展探究活动的三个案例，请在相应的空白处作答．
（1）案例l：探究落叶在土壤微生物的作用下是否发生腐烂（分解）．
设计思路：
组别 对照组 实验组
处理
情况 不做处理的带落叶的土壤 处理过的带落叶的土壤
将等量的带落叶的土壤，用带有编号的相同的塑料袋分别包扎好，并埋在5cm深的土壤中
对实验组土壤应该进行 灭菌 处理，尽可能排除 土壤微生物 的作用．
（2）案例Ⅱ：探究土壤微生物对淀粉的分解作用．
实验步骤：
①将取自农田的土壤制成土壤浸出液，放在烧杯中静置一段时间．
②另取两只烧杯，编号为A、B，放入等量的淀粉糊．在A烧杯中加入30mL土壤浸出液，B烧杯中加入 30 mL（等量）蒸馏水（无菌水） ．
③在室温条件下放置7天后，从A烧杯中取20mL溶液，分别加入A1和A2两支试管各10mL；从B烧杯中取20mL溶液，分别加入B1和B2两支试管各10mL．
④在A1和B1中加入碘液；在A2和B2中加入 （等量的）斐林试剂 ，并进行 水浴加热 处理．
⑤观察各试管的 颜色变化 ，记录实验结果．
（3）案例Ⅲ：探究土壤微生物中是否含有分解纤维素的细菌的实验过程中，应将土壤浸出液接种在以 纤维素 为惟一碳源的培养基上，并用 刚果红 （试剂）加以鉴别．
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（2013•黄州区一模）【生物一选修模块1：生物技术实践】
请回答下列与生物技术实践相关的问题：
（1）利用纤维素解决能源问题的关键是高性能纤维素酶的获取．科学家利用培养基从土壤中筛选出能分解纤维素的细菌，这类细菌经过大量培养后可以从中提取纤维素酶．
①土壤中富含各种微生物，将土壤浸出液接种到特定培养基上，可得到能分解纤维素的细菌，实验室中获取纯净菌种常用的接种方法有 平板划线法 和 稀释涂布平板法 ．
②虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、 无机盐、碳源、氮源
（2）酵母菌是一种真菌，可用于制作果酒．
①果汁发酵后是否产生酒精，可以用 重铬酸钾 来检验，在酸性条件下，该物质与酒精反应呈现特定的颜色．
②酵母菌细胞固定化可大大提高生产效率．固定酵母菌细胞时首先需要将干酵母放入 蒸馏水 中活化；若制得的凝胶珠着色过浅，可能是 海藻酸钠浓度过低 ．
（3）突变菌往往带有一些特殊的基因，在获得这些基因的过程中，PCR技术相当重要．PCR扩增反应中加入引物的作用是 使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸 ．
（4）加酶洗衣粉中有的加香精，高档洗衣粉中的香精是由植物芳香油制成的，目前从植物中提取芳香油的方法有 萃取法、蒸馏法、压榨法 等．
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[生物——选修模块1：生物技术实践]（15分）
白僵菌具有高效的杀虫效果，现已应用于多种害虫的防治。白僵菌能溶解昆虫的表皮，并在虫体内生长繁殖，消耗虫体养分，产生各种毒素，导致害虫死亡。请回答下面的问题：
（1）从多种微生物中分离白僵菌菌种的培养基属于________培养基，其成分包括________、________、水和无机盐，此外，培养基还应满足白僵菌生长对________、________以及氧气的要求。
（2）纯化白僵菌时，常用的接种方法是稀释涂布平板法和________。稀释涂布平板法还可用于白僵菌的计数，为了保证结果准确，一般选择菌落数在________的平板进行计数，但统计的菌落数往往比活菌的实际数目。对于需要长期保存的菌种，可以采用________的方法。
（3）方离与培养过程中，培养基和接种工具都要进行灭菌处理，其中接种环应采用________灭菌的方法。
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