根据微生物的相关知识回答下列问题：（1）在分离、纯化菌株之前，先要制作培养基，调节pH在灭...

根据微生物的相关知识回答下列问题：

（1）在分离、纯化菌株之前，先要制作培养基，调节pH在灭菌之________(填“前”或“后”）。在分离目的菌的过程中，通常选用__________培养基（按物理性质分类）进行选择培养以增加其浓度。纯化菌株时通常使用的接种工具是_____________________。

（2）下表是培养某微生物所用的固体培养基的配方，请回答:

注：将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL

①根据培养基的成分分析，所培养微生物的同化作用类型是______________。

②统计饮用水中大肠杆菌数目时，___________（填“需要”或“不需要”）设置对照；原因是__________。

③若要分离分解尿素的细菌，需将培养基中的___________换成__________。

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[生物——选修1：生物技术实践]

请运用酵母菌的分离与纯化、果酒制作与应用的知识，回答下列问题：

（1）在酵母菌的分离与纯化过程中，需将培养基的pH调至______。对培养基进行灭菌常采用的方法是________。

（2）在选择培养并获得酵母菌单菌落的过程中，可采用_______法将含酵母菌的样液接种于固体培养基表面，对获得的菌种可采用_______的方法长期保存。

（3）在无氧条件下，酵母菌将丙酮酸分解成_________，在发酵结束前，接种在果汁中的酵母菌种群数量呈现_____增长。

（4）醋酸菌在______充足条件下可将果酒中的乙醇变为_____，再变为醋酸。

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[生物一选修1:生物技术实践]

某小组开展“市售鲜猪肉中大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析”的研究，进行了相关实验操作，回答下列问题：

（1）菌株的分离纯化:切取鲜猪肉表层样品接入蛋白胨大豆肉汤培养基中，放在37℃摇床振荡培养18h。取肉汤接种于琼脂平板培养基上，培养后再挑取单菌落，接种培养，培养一段时间后，再次挑取单菌落接种于固体培养基上，多次重复此步骤。菌落是指由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的______________；操作过程中液体培养的目的是______________，反复接种固体培养基的目的是____________________________。

（2）下面是纸片扩散法对猪大肠杆菌的耐药性实验。

步骤1:用打孔器制成直径约6 mm的圆形滤纸片，浸入一定浓度的氨苄西林，烘干；

步骤2:取含大肠杆菌的菌液均匀涂布于______________上；

步骤3：在培养基上，每隔一定距离贴一片含药物的圆形滤纸片，培养，观察。

分析与评价：

①观察发现，在每个纸片周围都形成了抑菌圈，其直径的大小表示大肠杆菌对氨苄西林的敏感性。抑菌圈直径越大，敏感性越______________（填“高”或“低”）。

②发现在抑菌圈外长满多种不同形态的菌落，其原因可能是_________________________。

③欲比较五倍子和黄连提取液对猪大肠杆菌的抑制作用，为治疗提供依据。请写出实验思路:________。

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无菌操作是微生物接种技术的关键；传统发酵技术和微生物分离、纯化、应用过程及植物组织培养和动物细胞培养过程中，均要无菌操作。回答下列相关问题：

（1）消毒和灭菌是两个不同的概念，灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力。消毒仅指杀死一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害。下列哪些事物适用于消毒处理　　　　　　　　　 。

①皮肤　　　 ②饮用水　　 ③牛奶　　 ④注射器　　 ⑤培养皿　　

⑥接种环　　 ⑦培养基　　 ⑧果汁　　 ⑨酱油　　　　 ⑩手术刀

A．①②③⑧⑨ B．④⑤⑥⑦⑩　　 C．①②③④⑤⑥⑧　　 D．以上全部

（2）配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行调整　　　　　　　 ，接种前要进行　　　　 ，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在无菌条件下进行。

（3）在微生物的实验室培养中，获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。下图是利用　　　　　　　　　　 法进行大肠杆菌接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。为达到这一目的，操作上应注意：

① 每次划线前要　　　　　　　　　　　　 ；

② 冷却后从上一区划线末端开始划；

③ 首尾区　　　　　　 。

（4）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被

污染。对固体培养基应采用的检测方法是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 ，观察培养基上是否有菌落产生。

（5）有位同学在家制作泡菜时，为避免杂菌污染而向泡菜坛中加入了青霉素，结果发酵失败，原因可能是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

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请根据所学微生物培养与计数的相关知识，回答下列问题。

（1）实验室制备牛肉膏蛋白胨培养基时常需要加入________作为凝固剂，该培养基在制作过程中常采用_____________法进行灭菌，在灭菌前常需要调整培养基的_______。

（2）若要用此培养基对微生物进行计数统计，应采用___________法接种；在接种前，随机取灭菌后的空平板在恒温箱中先行培养24h，这样做的目的是_______。

（3）下表是某同学调查的市面上一种常见的面膜的部分成分，请问答下列问题。

羟苯甲酯：广谱抗菌物质，能抑制革兰氏阴性、阳性细菌，对酵母菌及霉菌有较强的抑制作用。

①网上流传“面膜等同于细菌培养基”。根据微生物培养的知识并结合该种面膜的组成成分来分析，你认为此说法___（合理/不合理），理由是 __________。（答一点即可）

②生活中许多人喜欢利用天然材料直接替代面膜产品，如黄瓜切片、芦荟切片、鸡蛋清等。结合所学知识对这一行为进行评价并给出你自己的建议：____________________。

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发酵面团中含有较为丰富的酵母菌，科研人员从酵母菌中筛选含有高活性淀粉酶的菌株，用于实际生产。回答下列有关酵母菌分离、纯化的相关问题：

（1）在配制的用于分离高活性淀粉酶的酵母菌的培养基中，除含有水、淀粉、氮源和_______等营养成分外，培养基还需要满足微生物生长对_______________的要求。

（2）纯化酵母菌的关键步骤是_____________，最常用的方法是__________________。

（3）筛选具有高产淀粉酶的酵母菌时，如果菌落周围的培养基上出现___________，则可以判定此处酵母菌产淀粉酶的能力强于其他酵母菌。

（4）分离得到的高活性酵母菌菌株需留一部分进行长期保存，可釆用______________的方法进行保存。

（5）活性淀粉酶的合成场所位于___________。科研人员可以从培养酵母菌的培养液中提取活性淀粉酶，此方法的依据是_______________________。

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酸奶和泡菜的制作都离不开乳酸菌，请回答下列有关制作酸奶和泡菜的问题：

（1）分离纯化乳酸菌的培养基中含蛋白胨，蛋白胨提供的主要营养有_________；培养基灭菌常采用_________法；检验培养基灭菌是否合格的方法是_________。

（2）培养乳酸菌一段时间后，培养基中的pH会下降，原因是_____________________。

（3）家庭制作泡菜时，一般需要配制泡菜盐水，但会因其含盐量过高而影响口感。直接接种乳酸菌制作泡菜时，产生的大量乳酸能够___________，因此可以采用低盐工艺制作泡菜，从而大幅降低泡菜的含盐量。

（4）乳酸菌活菌数是衡量酸奶营养价值的一个重要指标，为检测某酸奶中乳酸菌的含量，取不同稀释度的样品各1 mL涂布到固体培养基上，在适宜条件下培养一段时间，统计得到106、107、108三个稀释度的培养基上的平均菌落数依次为433个、76个、8个，据此估算，每毫升样品中的乳酸菌数约为_________个，接种乳酸菌所用的接种工具是_________。

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酸奶和泡菜的制作都离不开乳酸菌，请回答下列有关制作酸奶和泡菜的问题：

（1）分离纯化乳酸菌的培养基中含牛肉膏，牛肉膏提供的主要营养有___________；培养皿灭菌常采用___________法；检验培养基灭菌是否合格的方法是___________。

（2）培养乳酸菌一段时间后，培养基中的pH会下降，原因是______________________。

（3）家庭制作泡菜时，一般需要配制泡菜盐水，但会因其含盐量过高而影响口感。直接接种乳酸菌制作泡菜时，产生的大量乳酸能够抑制___________，因此可以采用低盐工艺制作泡菜，从而大幅降低泡菜的含盐量。

（4）乳酸菌活菌数是衡量酸奶营养价值的一个重要指标，为检测某酸奶中乳酸菌的含量取不同稀释度的样品各1mL涂布到固体培养基上，在适宜条件下培养一段时间，统计得到106、107、108三个稀释度的培养基上的平均菌落数依次为413个，86个、13个，据此估算，每毫升样品中的乳酸菌数约为___________个，接种乳酸菌所用的接种工具是___________。

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纤维素酶在生物燃料制作、布料处理中起重要作用。目前，利用微生物提高纤维素酶产量是主要发展方向。如下图，用紫外线照射含有纤维素分解菌的土样，分离、培养，再检测各菌株的纤维素酶的产生量。请回答下列相关问题：

（1）从自然界获取纤维素分解菌，采集土样时应选择　　　　 的环境。

（2）紫外线照射的目的是　　　　 ，A0组未经紫外线处理，其作用是作为　　　　 。

（3）经高压灭菌锅灭菌的培养基，需要冷却后才能用来倒平板。常用于估计培养基已冷却到50℃左右的简便方法为　　　　　　　　　　　　 。

（4）上述培养皿中的培养基除含有水和无机盐、酵母膏、水解酪素、琼脂等外，还应有　　　　　　　 ，目的是选择纤维素分解菌。

（5）上述检测结果如图所示。由图可知，A5组酶活力与Ao组相同，最可能的原因是 　　　　　　 。

（6）若用刚果红染色法比较纤维素分解菌产生纤维素酶的量的多少，可通过观察平板培养基上以纤维素分解菌为中心的透明环（如图）来比较。其中与A1对应的是图中的　　　　　 。

（7）若要保证上右图透明圈中均为单个细胞形成的菌落，操作要求是　　　 。

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微生物培养与分离技术是生物中重要的实验技术．根据有关的微生物知识，回答下列问题：

（1）培养基的制备需经过计算、称量、溶化和　　　　 、　　　　 等过程．上述过程中，需要在超净工作台上操作的是　　　　 ．

（2）纯化菌种时为了得到单一菌落，常采用的接种方法是　　　　 和　　　　 ；在对培养液中酵母菌的种群数量进行统计时，计数的方法是　　　　 ．

（3）为达到筛选土壤中分解尿素细菌的目的，平板内的固体培养基应选择尿素作为唯　　　　 ；培养基中加入指示剂　　　　 以鉴定其中是否含有能分解尿素的细菌．

（4）若要筛选分解纤维素的细菌，在土壤取样、选择培养后，需进行　　　　 和　　　　 操作，通过染色并观察　　　　 的有无挑选出所需菌种．

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